如何區(qū)別真假胎牛血清:沉淀,很多血清客戶(hù),會(huì)發(fā)現(xiàn)進(jìn)口血清有沉淀,從而懷疑血清的質(zhì)量問(wèn)題,這是沒(méi)有根據(jù)的。血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生,對(duì)血清質(zhì)量沒(méi)有任何影響,沉淀的產(chǎn)生原因很多,和廠(chǎng)家的加工生產(chǎn)方式密切相關(guān)。國(guó)產(chǎn)的血清,大多來(lái)自北方,由于價(jià)格低廉,保存環(huán)境都不好,從采的血、冷凍、運(yùn)輸?shù)缴a(chǎn)會(huì)經(jīng)過(guò)多次凍融,每次凍融過(guò)程,就會(huì)析出部分纖維蛋白沉淀,這樣,血清成品過(guò)濾后看起來(lái)反而更加的“干凈”,很少有沉淀產(chǎn)生。澄清度,進(jìn)口胎牛血清由于蛋白和脂類(lèi)等物質(zhì)含量低,表現(xiàn)為稀薄、清淡,而國(guó)產(chǎn)血清,因?yàn)榻^大多數(shù)是新生牛血清,相對(duì)而言更加粘稠,顏色略深,這對(duì)于初步接觸血清的人很難判斷,但把兩者進(jìn)行對(duì)比,可容易分辨。因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分較少。揚(yáng)州優(yōu)級(jí)血清
胎牛血清應(yīng)該如何保存,可以存放多久?胎牛血清可長(zhǎng)期儲(chǔ)存于-20℃冰箱中。倘若把胎牛血清存放在4℃冰箱,請(qǐng)不要超過(guò)一個(gè)月。如果一次性無(wú)法用完一瓶血清,建議將胎牛血清無(wú)菌條件下分裝并儲(chǔ)存于-20℃,避免反復(fù)凍融。如何正確地解凍胎牛血清?采用逐步解凍法,將胎牛血清從-20℃冰箱轉(zhuǎn)入4℃冰箱融解,隨后分裝。切忌直接將胎牛血清從-20℃冰箱轉(zhuǎn)移至室溫解凍,這樣很容易因?yàn)闇囟茸兓髮?dǎo)致胎牛血清中的蛋白質(zhì)凝集從而出現(xiàn)沉淀?;窗布?xì)胞培養(yǎng)用血清胎牛血清能夠用在科研、工業(yè)生產(chǎn)、人或獸疫苗生產(chǎn)的質(zhì)量控制及生物技術(shù)藥物的質(zhì)量控制領(lǐng)域。
如何區(qū)別真假胎牛血清:免疫球蛋白,國(guó)產(chǎn)血清的只是定性檢測(cè),結(jié)果也很不準(zhǔn)確,進(jìn)口胎牛血清大多定量檢測(cè)。免疫球蛋白的數(shù)值能完全體現(xiàn)出時(shí)的牛齡情況,國(guó)產(chǎn)血清,基本都是新生牛的,血清中容易產(chǎn)生IgM,IgG的含量也偏高,進(jìn)口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也較低。其它不管是國(guó)產(chǎn)還是進(jìn)口血清,都是不測(cè)Antibiotic的(無(wú)四環(huán)素胎牛血清之外)。國(guó)外,Antibiotic的使用很?chē)?yán)格,用量也很少,每頭奶牛的產(chǎn)品包括血清都可以溯源的,因此可以做到胎牛血清中不含Antibiotic或含量極低;國(guó)內(nèi),Antibiotic的濫用已成了普遍現(xiàn)象,血清中殘留很高,對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)極為不利,這是國(guó)產(chǎn)血清質(zhì)量差的根本原因。
胎牛血清融化方法:只要2.5個(gè)小時(shí),溫和有效地加快了水融化的速度,另一方面,融化過(guò)程中可以間斷輕輕搖擺瓶子,讓蛋白在瓶中混勻。此方法不但節(jié)約了時(shí)間,而且較大限度減少了血清沉淀出現(xiàn)的幾率。血清融化過(guò)程中,蛋白質(zhì)會(huì)比水先融化。冰塊底部亮亮的細(xì)絲就是融化中的蛋白,血清在培養(yǎng)細(xì)胞中,比較重要的是利用它的活性的因子,因此,融化過(guò)程中較大限度地保留因子的活性,就變得非常重要?;貞浺幌?,細(xì)胞復(fù)蘇時(shí),要保持細(xì)胞的活性,我們是要遵循“快融”原則還是“慢融”原則呢?快融!血清同樣如此!三步法需要兩個(gè)半小時(shí),4℃過(guò)夜需要大約10個(gè)小時(shí)(冰箱一般設(shè)2-8℃,所以各實(shí)驗(yàn)室融化時(shí)間會(huì)稍有出入)。胎牛血清進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。
胎牛血清對(duì)細(xì)胞貼壁中的作用:在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),大部分來(lái)自實(shí)體組織感官的細(xì)胞會(huì)貼壁。它們?cè)跈C(jī)體內(nèi)時(shí),也是與其他細(xì)胞或者細(xì)胞外基質(zhì)結(jié)合的,貼壁對(duì)維持細(xì)胞的良好形態(tài)和促進(jìn)細(xì)胞的增殖有益處。有人培養(yǎng)許旺細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)貼壁良好的細(xì)胞,其增殖率也較高。人的造血干細(xì)胞培養(yǎng),更是需要有貼壁細(xì)胞構(gòu)成“造血微環(huán)境”。有人發(fā)現(xiàn)這些貼壁細(xì)胞包括成纖維細(xì)胞,巨噬細(xì)胞,上皮樣細(xì)胞,脂肪細(xì)胞,它們交錯(cuò)連接,構(gòu)成網(wǎng)狀支架結(jié)構(gòu)。培養(yǎng)基中加入牛血清,對(duì)于粘附細(xì)胞的貼壁也很有幫助。牛血清中含有玻連蛋白、纖黏連蛋白,對(duì)細(xì)胞粘附都有促進(jìn)作用。需注意,熱滅活小牛血清會(huì)降低血清對(duì)細(xì)胞粘附的促進(jìn)作用,尤其在細(xì)胞旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)時(shí)更為明顯。熱滅活目的是為了去除血清中補(bǔ)體等對(duì)熱敏感的物質(zhì),但是在胎牛血清中對(duì)補(bǔ)體的滅活則明顯沒(méi)有必要。揚(yáng)州優(yōu)級(jí)血清
胎牛血清加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。揚(yáng)州優(yōu)級(jí)血清
胎牛血清:胎牛血清初次解凍后,應(yīng)按單次習(xí)慣用量分裝,分裝后的血清仍-20°C凍存。若置于4°C的血清,應(yīng)在一周內(nèi)用完。為保證細(xì)胞培養(yǎng)的較佳效果,血清和培養(yǎng)基的配置,應(yīng)遵循“現(xiàn)用現(xiàn)配”原則。配好的培養(yǎng)液,應(yīng)于一周內(nèi)用完。血清避免反復(fù)凍融,避免在4°C或更高溫度儲(chǔ)存過(guò)久,否則會(huì)破壞血清中有效活性成分,影響血清品質(zhì)。胎牛血清是由胎牛血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)物等,其組成成份大部分已知,但還有一部分尚不清楚,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。其中不含細(xì)胞、纖維蛋白和凝血因子。揚(yáng)州優(yōu)級(jí)血清
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