血清的主要作用:對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用:有一些細(xì)胞,如內(nèi)皮細(xì)胞、骨髓樣細(xì)胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的,則有目的的使用血清來(lái)終止胰蛋白酶的消化作用。因?yàn)橐鹊鞍酌敢呀?jīng)被較廣用于貼壁細(xì)胞的消化傳代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷,特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時(shí),粘度起到重要作用。血清還含有一些微量元素和離子,他們?cè)诖x醫(yī)治中起重要作用,如SeO3,硒等。新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛。上海賽業(yè)胎牛血清品牌
未經(jīng)檢疫的胎牛血清可能攜帶傳染性物質(zhì),一旦流入境內(nèi),將會(huì)對(duì)人民**的生命健康造成重大威脅,如可能帶有瘋牛病病毒、牛病毒性腹瀉病毒、牛細(xì)小病毒、狂犬病毒或其他傳染性物質(zhì),具有極高的檢疫風(fēng)險(xiǎn)。此外,不合格的血清對(duì)實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性、穩(wěn)定性和真實(shí)性也會(huì)造成嚴(yán)重影響。無(wú)合格質(zhì)檢的胎牛血清存在支原體、病毒等污染,這對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果會(huì)造成嚴(yán)重不良影響;工藝不規(guī)范導(dǎo)致溶血,溶血較嚴(yán)重的血清含有許多胞內(nèi)產(chǎn)物,對(duì)細(xì)胞有刺激作用,影響實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定性和數(shù)據(jù)的真實(shí)性;血清批次不穩(wěn)定,實(shí)驗(yàn)結(jié)果難以重復(fù)。上海賽業(yè)胎牛血清品牌牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量較為大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份。
很好的胎牛血清對(duì)細(xì)胞成長(zhǎng)的作用:提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需的天然或天然的生長(zhǎng)因子。提供天然的結(jié)合蛋白,能識(shí)別氨基酸、脂質(zhì)、金屬離子和等,能結(jié)合并調(diào)節(jié)它們的活性。已知清蛋白即具有上述功能,并對(duì)細(xì)胞代謝、生物合成、增殖和存活具有潛在的影響。又如胎牛血清中富含胎球蛋白,具有多個(gè)鈣離子結(jié)合位點(diǎn),因而能調(diào)節(jié)和維持血清中的鈣離子濃度。天然含有粘附蛋白等細(xì)胞外基質(zhì)成分,促進(jìn)細(xì)胞的附著、鋪展。提供醫(yī)治功能。這主要通過(guò)血清中的某些蛋白與有毒的金屬離子結(jié)合來(lái)完成的。如金屬硫蛋白,對(duì)多種重金屬有高度親和性,并可消除細(xì)胞生長(zhǎng)環(huán)境中的氧自由基,具有很強(qiáng)的抗氧化活性,可防止細(xì)胞衰老。提供酸堿度緩沖的作用,以及維持滲透壓。提供蛋白酶抑制劑,使細(xì)胞免受蛋白酶的損傷。因此在細(xì)胞消化時(shí),常用含血清的培養(yǎng)液終止胰酶對(duì)細(xì)胞的作用。
熱滅活:一般是以56℃,30分鐘來(lái)處理已解凍的血清,因?yàn)榇思訜岵襟E,可以使補(bǔ)體去活化,而補(bǔ)體所參與的反應(yīng)有:溶細(xì)胞活性,平滑肌的收縮,肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放,增強(qiáng)吞噬作用,淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的趨化和。有必要做熱滅活嗎?實(shí)驗(yàn)顯示,經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅清,對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過(guò)的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn),或完全沒(méi)有任何作用,甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。而經(jīng)過(guò)熱處理的血清,沉淀物的形成會(huì)明顯的增多,這些沉淀物在倒立顯微鏡下觀察,像是 "小黑點(diǎn)",常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會(huì)使此沉淀物更增多,使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。購(gòu)買的時(shí)候注意詢問(wèn)廠家是否是已滅清。使用血清來(lái)終止胰蛋白酶的消化作用。
血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、、無(wú)機(jī)物等,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。胎牛血清的細(xì)菌內(nèi)有毒的 ≤5(EU/ml);牛腹瀉病毒:陰性;大腸桿菌噬菌體:陰性;支持細(xì)胞增殖(Sp2/0-Ag14) 生長(zhǎng)曲線(接種濃度)較為大增殖濃度≥2.5×106 個(gè)/ml;細(xì)胞倍增時(shí)間 ≤15h;克隆率 ≥85%。小牛血清取自出生10-30天的小牛。舟山特級(jí)胎牛血清品牌
胎牛血清提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。上海賽業(yè)胎牛血清品牌
很好的胎牛血清:免疫球蛋白,國(guó)產(chǎn)血清的只是定性檢測(cè),結(jié)果也很不準(zhǔn)確,進(jìn)口胎牛血清大多定量檢測(cè)。免疫球蛋白的數(shù)值能完全體現(xiàn)出的時(shí)的牛齡情況,國(guó)產(chǎn)血清,基本都是新生牛的,血清中容易產(chǎn)生IgM,IgG的含量也偏高,進(jìn)口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也較低。含量,此外,的使用也是要考慮在內(nèi)的。國(guó)內(nèi)外的血清,都不對(duì)進(jìn)行測(cè)試(無(wú)四環(huán)素胎牛血消除外)。其中,由于國(guó)外使用較為嚴(yán)格,用量有限,同時(shí)每頭奶牛的產(chǎn)品包括血清都可以追溯源頭,所以國(guó)外胎牛血清不含或者含量極低。但是國(guó)內(nèi)由于使用普遍,血清中殘留量很高,導(dǎo)致國(guó)產(chǎn)血清質(zhì)量很差,不利于細(xì)胞培養(yǎng)。上海賽業(yè)胎牛血清品牌
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