在體光纖成像記錄的目的是實(shí)時(shí)檢測(cè)細(xì)胞的活性變化。基于鈣離子濃度變化的熒光成像技術(shù)被較多用來記錄神經(jīng)元活性。在體光纖記錄方法與傳統(tǒng)的在體電生理記錄方法有著不同的特點(diǎn),光纖記錄因其穩(wěn)定、方便、易上手而應(yīng)用較多。首先,將熒光蛋白表達(dá)在特定類型的神經(jīng)元中,光纖記錄可以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞類型特異性的活性檢測(cè),而用電生理記錄的方法記錄特定類型的神經(jīng)元的活性比較困難。其次,電生理記錄容易受到環(huán)境中的電信號(hào)以及動(dòng)物的行為動(dòng)作影響,而光纖記錄相對(duì)來說有著較強(qiáng)的抗干擾性能。然后,光纖記錄相對(duì)穩(wěn)定,可以很容易實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)時(shí)程的活性檢測(cè),例如動(dòng)物的整個(gè)學(xué)習(xí)過程,而利用電生理記錄實(shí)現(xiàn)起來則相對(duì)困難。較后,光纖記錄用神經(jīng)元群體的熒光強(qiáng)度變化來表征神經(jīng)元整體的活性變化,不能反映單個(gè)神經(jīng)元的活性,而電生理記錄則能夠檢測(cè)到單個(gè)神經(jīng)元的活性,具有更高的空間分辨率。在體光纖成像記錄同時(shí)不受外界光纖干擾。廈門在體影像光纖
在體光纖成像記錄在自由活動(dòng)動(dòng)物的深部腦區(qū)實(shí)現(xiàn)光信號(hào)記錄和神經(jīng)細(xì)胞活性調(diào)控;高質(zhì)量,亞細(xì)胞分辨率的成像;多波長(zhǎng)成像,實(shí)現(xiàn)較多的鈣離子成像(GCaMP or RCaMP),和光遺傳實(shí)驗(yàn),特定目標(biāo)光刺激;在體光纖成像系統(tǒng)是模塊化設(shè)計(jì),使用者擁有很高的靈活性,可以隨時(shí)根據(jù)研究需要對(duì)系統(tǒng)進(jìn)行調(diào)整,比如調(diào)整光源,波長(zhǎng),濾光片,相機(jī)等。在深部腦區(qū)選定的特定神經(jīng)細(xì)胞或部分獲得連續(xù)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)流,然后對(duì)單細(xì)胞提取密度軌跡。鈣離子成像軌跡也可以被同步,與其他行為學(xué)實(shí)驗(yàn)(攝像拍攝,獎(jiǎng)勵(lì)設(shè)備等)同步時(shí)間標(biāo)記。汕頭神經(jīng)元光纖成像記錄應(yīng)用有關(guān)生命活動(dòng)的小分子在體光纖成像記錄等都可以被標(biāo)記。
對(duì)生物體內(nèi)的突觸結(jié)構(gòu)和蛋白進(jìn)行空間分布的研究時(shí),成像系統(tǒng)需要具備高的成像速度,防止出現(xiàn)生物體移動(dòng)造成的重影現(xiàn)象;成像的超高動(dòng)態(tài)范圍和熒光信號(hào)的超高線性度:像的熒光強(qiáng)度計(jì)數(shù)需要具有對(duì)的的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義證明實(shí)驗(yàn)結(jié)論的正確性,因此圖像的熒光強(qiáng)度值必須能夠精確反映體內(nèi)蛋白、基因濃度的高低,這需要檢測(cè)器具有超高的動(dòng)態(tài)范圍能夠同時(shí)記錄強(qiáng)信號(hào)和弱信號(hào),并且在此動(dòng)態(tài)范圍內(nèi)圖像計(jì)數(shù)值與真實(shí)的熒光信號(hào)對(duì)的線性變化以正確反映蛋白、基因的濃度。
在體光纖成像記錄相干斷層掃描的局限性是單能掃描生物組織表面下1-2毫米的深度。這是由于深度越大,光線無散射的射出表面的比例就越小,以至于無法檢測(cè)到。但是在檢測(cè)過程中不需要樣品制備過程,成像過程也不需要接觸被成像的組織。更重要的是,設(shè)備產(chǎn)生的激光是對(duì)人眼安全的近紅外線,因此幾乎不會(huì)對(duì)組織造成傷害。使用光學(xué)反向散射或后向反射的測(cè)量成像組織的內(nèi)部橫截面微結(jié)構(gòu),像在體外在人的視網(wǎng)膜上,并在一個(gè)其他的病因斑塊在透明,弱散射介質(zhì)和不透明的。醫(yī)生可以在體光纖成像記錄直觀地進(jìn)行診斷和分析。
在體生物發(fā)光成像不需要外部光源激發(fā), 自發(fā)熒光少,而在體光纖成像記錄,需要特定波長(zhǎng)的外部激發(fā)光源激發(fā), 自發(fā)熒光較多, 故前者比后者靈敏度更高, 在體生物發(fā)光斷層成像原型系統(tǒng), 主要由 CCD相機(jī)、 固定小動(dòng)物的支架、 控制裝置 (使支架水平運(yùn)動(dòng)、 垂直運(yùn)動(dòng)或旋轉(zhuǎn)) 、完全密閉的不透光的成像暗箱等組成。將小動(dòng)物麻醉后固定在支架上, 并置于成像暗箱中, 由控制裝置帶動(dòng)支架沿水平方向運(yùn)動(dòng)、 垂直方向運(yùn)動(dòng)或旋轉(zhuǎn), 利用相機(jī)從多個(gè)不同角度和位置對(duì)活的物體小動(dòng)物的生物發(fā)光現(xiàn)象進(jìn)行投影成像 然后將采集到的數(shù)據(jù)信息傳輸?shù)接?jì)算機(jī)中, 并采用特定的圖像重建算法定位動(dòng)物體內(nèi)的發(fā)光光源, 得到活的物體動(dòng)物體內(nèi)發(fā)光光源的精確位置信息。在體光纖成像記錄用于對(duì)細(xì)胞內(nèi)部的各個(gè)細(xì)胞器進(jìn)行染色。鹽城腦立體定位光纖記錄服務(wù)
在體光纖成像記錄技術(shù)是在散射介質(zhì)(或稱為隨機(jī)介質(zhì))成像的基礎(chǔ)上發(fā)展。廈門在體影像光纖
小動(dòng)物在體光纖成像記錄具有靈敏度高、直觀、操作簡(jiǎn)單、能同時(shí)觀測(cè)多個(gè)實(shí)驗(yàn)標(biāo)本,相比 PET、SPECT 無放射損害等優(yōu)點(diǎn),但也有其自身的缺陷,例如動(dòng)物組織對(duì)光子吸收、空間分辨率較低等問題,因而仍需不斷地完善和改進(jìn)。小動(dòng)物活的物體成像按成像性質(zhì)屬于功能成像,如何能更好地與結(jié)構(gòu)成像技術(shù)相結(jié)合,使實(shí)驗(yàn)結(jié)果不但能夠定量,而且還能精確定位,這是活的物體成像技術(shù)今后的發(fā)展方向之一。成像技術(shù)可以提供的數(shù)據(jù)有對(duì)的定量和相對(duì)定量?jī)煞N。廈門在體影像光纖