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超濾是大分子脫鹽、濃縮較方便的方法,重復(fù)性好,得率有保障,已經(jīng)在蛋白、抗體、病毒、核酸、囊泡等樣品制備中建立標(biāo)準(zhǔn)操作;在目前大熱的外泌體制備中也已經(jīng)成為主流方法。超濾管采用離心方式快速處理樣品,是很多科研小伙伴們每天要用到的基本裝備。但是,在默克生命科學(xué)團(tuán)隊(duì)推出超濾管中文說明書(AU0.5/4/15)之前,我們發(fā)現(xiàn)近90%的使用者在選擇和使用過程中因?yàn)槿狈Ρ匾畔⒍鴽]有獲得較佳體驗(yàn),更重要的是,寶貴的樣本會(huì)遭受本可避免的損失!如果目的蛋白是120kDa,請(qǐng)問應(yīng)該選擇的超濾管規(guī)格是100k,50k,還是30k甚至10k?你采用的是1/2,1/3抑或1/6算法?這些沒有統(tǒng)一的說法,是因?yàn)椴煌瑥S家的膜的截留分子量的定義不同。超濾離心管可以用于分離各種生物樣品,如血漿、細(xì)胞培養(yǎng)液、酶溶液等。北京濃縮超濾離心管選擇
超濾作為一種膜分離技術(shù),普遍應(yīng)用于生物樣品的濃縮、脫鹽和緩沖液置換,其原理是溶液在力的作用下,通過超濾膜孔徑的篩濾,大分子量的顆粒被截留下來,而水、溶劑和低分子量溶質(zhì)則允許透過膜,從而達(dá)到濃縮、脫鹽和緩沖液置換的目的,這種方法較大的特點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便、快速、高效,可同時(shí)濃縮和純化分子。如何使用超濾心離心管1. 使用角轉(zhuǎn)子加到超濾裝置上,較大樣本量為15 毫升(Anavo Ultra-15)。2. 將帶蓋過濾裝置放入離心機(jī)轉(zhuǎn)子內(nèi); 用一個(gè)類似的裝置來平衡。3. 使用定角轉(zhuǎn)子時(shí),將薄膜面板朝上定位,較大旋轉(zhuǎn) 5000 xg,旋轉(zhuǎn) 30 分鐘。4. 為了回收濃縮的溶質(zhì),在過濾裝置的底部插入一個(gè)移液管,通過左右掃動(dòng)的方式將樣品抽離,以保證總回收率。超濾液可貯存在離心管中。說明:為達(dá)到較佳回收率,離心后應(yīng)立即取出濃縮樣品。寧波蛋白分離離心管價(jià)位使用超濾離心管時(shí)要注意控制轉(zhuǎn)速,以避免過度旋轉(zhuǎn)導(dǎo)致超濾膜損壞或溢出樣品。
超濾離心管只需5到15分鐘,即可對(duì)50到500L樣本進(jìn)行簡(jiǎn)便、可靠的濃縮與脫鹽處理:快速處理樣本。通常,回收率高于90%;備有低蛋白質(zhì)結(jié)合的Omega、Bio-Inert或GHP濾膜可供選擇。對(duì)應(yīng)各種截留分子量,備有各種編碼以供輕松識(shí)別的顏色可供選擇。結(jié)構(gòu)材料為低結(jié)合聚丙烯。超聲焊接密封,防止側(cè)流或密封不嚴(yán)。適用于配合1.5mL試管的標(biāo)準(zhǔn)離心轉(zhuǎn)子。超濾離心管通常不需要預(yù)處理即可使用,不過對(duì)于蛋白質(zhì)樣本處理,特別是較稀的蛋白質(zhì)溶液來說(<10ug/mL),用超濾膜濃縮回收率常常是不定量的。雖然PES材料使非特異吸附較小化,但是,某些蛋白,特別是稀的時(shí)候,會(huì)有問題。非特異結(jié)合的程度隨著個(gè)別蛋白結(jié)構(gòu)的不同而不同。
根據(jù)其大小,又分為1.5ml、2ml、5ml、10ml、15ml、50ml等,國(guó)產(chǎn)的離心管一般就是這幾個(gè)規(guī)格,用的較多的也就是10ml和50ml的。如果您的離心機(jī)是配30ml或者其他規(guī)格的離心管時(shí),就要考慮進(jìn)口的了。另外,離心管還有圓底和尖底,以及螺旋蓋和插蓋之分。螺旋蓋的離心管帶有較精細(xì)的刻度,插蓋的只有一個(gè)總體的容量標(biāo)示。實(shí)驗(yàn)室常用的離心管有塑料的和玻璃的,一般塑料的用的較多,因?yàn)椴AУ碾x心管不能用在高速或者超速離心機(jī)上。塑料的離心管又有PP(聚丙烯)、PC(聚碳酸酯),PE(聚乙烯)等材質(zhì)。PP的管子性能相對(duì)來說比較好。塑料的離心管透明或者半透明,可以直觀的看到樣品離心情況,但是比較容易變形,抗有機(jī)溶劑的腐蝕性較差,所以使用壽命較短。因此,實(shí)驗(yàn)室一般會(huì)經(jīng)常購買離心管。超濾離心管通常需要在低溫條件下進(jìn)行操作,以避免目標(biāo)分子被破壞或失活。
超濾離心管可以滅菌嗎?1. 超濾離心管使用75%的乙醇消毒。2. 不能121℃滅菌,否則會(huì)變形,不論是是密理博、頗爾還是賽多利斯的都不能。3. 超濾管應(yīng)當(dāng)干燥保存,買回來的時(shí)候就是干的。當(dāng)然也可以濕潤(rùn)保存,但是應(yīng)當(dāng)保存在20%的乙醇中,是為了防止沒洗去的殘留的液體長(zhǎng)菌堵膜。4. 有人說濕潤(rùn)保存不能干,指的是卷式和板式超濾膜。離心管是一個(gè)簡(jiǎn)單的可以承受高轉(zhuǎn)速壓力的管子,比如離一些樣品,分離出上清沉淀。超濾離心管會(huì)有一個(gè)類似于內(nèi)管和外管的兩個(gè)部分,內(nèi)管中是帶有一定分子量的膜,當(dāng)高速離心時(shí),分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即內(nèi)管中),就是超濾的原理.常用于濃縮樣品。超濾離心管可以通過手動(dòng)或自動(dòng)方式進(jìn)行操作,以適應(yīng)不同的實(shí)驗(yàn)室流程要求。濃縮超濾離心管廠家
超濾離心管可用于分離和純化各種大分子化合物,如蛋白質(zhì)、核酸、多糖等。北京濃縮超濾離心管選擇
實(shí)驗(yàn)室常用的離心管有塑料的和玻璃的,一般塑料的用得較多,因?yàn)椴AУ碾x心管不能用在高速或者超速離心機(jī)上。塑料的離心管又有PC (聚碳酸酯)、PE (聚乙烯)、PP(聚丙烯)等材質(zhì)。PP的管子性能相對(duì)來說比較好。塑料的離心管透明或者半透明,可以直觀地看到樣品的離心情況,但是比較容易變形,抗有機(jī)溶劑的腐蝕性較差,所以使用壽命較短。因此,實(shí)驗(yàn)室一般會(huì)經(jīng)常購買離心管。PC (聚碳酸酯):透明度較好,硬度大,可以高溫消毒,但不耐強(qiáng)酸強(qiáng)堿以及一些有機(jī)溶劑如酒精之類。主要用于5萬轉(zhuǎn)以上的超高速離心。PE(聚乙烯):不透明。和丙銅、醋酸、鹽酸等不反應(yīng),較為穩(wěn)定,高溫下容易變軟。PP(聚丙烯):半透明,化學(xué)及溫度穩(wěn)定性較好,但是在低溫下會(huì)變脆,所以在離心時(shí)不要在4℃以下。北京濃縮超濾離心管選擇