當濃縮到剩下1ml時,取50ul緩沖溶液,加入10ul流穿,看有沒變藍色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管,用5mgml的BSA離心10min,再取流穿,跑蛋白膠或Bradford粗測,繼續(xù)加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作,防止蛋白受熱),直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發(fā)生蛋白沉淀,導致堵管。若發(fā)生沉淀,要確定沉淀的具體原因,是蛋白濃度過高還是Buffer不合適;前者可用多根超濾管同時超濾,降低濃度的辦法解決,后者的方法是換不同的緩沖溶液,直到蛋白不發(fā)生沉淀為止。超濾離心管可以用于分離提取動植物組織中的DNA、RNA等核酸分子,以進行基因克隆和功能研究。紹興濃縮超濾離心管推薦
超濾離心管可以滅菌嗎?1. 超濾離心管使用75%的乙醇消毒。2. 不能121℃滅菌,否則會變形,不論是是密理博、頗爾還是賽多利斯的都不能。3. 超濾管應當干燥保存,買回來的時候就是干的。當然也可以濕潤保存,但是應當保存在20%的乙醇中,是為了防止沒洗去的殘留的液體長菌堵膜。4. 有人說濕潤保存不能干,指的是卷式和板式超濾膜。離心管是一個簡單的可以承受高轉速壓力的管子,比如離一些樣品,分離出上清沉淀。超濾離心管會有一個類似于內(nèi)管和外管的兩個部分,內(nèi)管中是帶有一定分子量的膜,當高速離心時,分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即內(nèi)管中),就是超濾的原理.常用于濃縮樣品。河南外泌體超濾離心管廠商超濾離心管還可以用于濃縮樣品,減少其體積并提高濃度。
以下是處理超濾管,重復利用超濾管的步驟。倒出超濾管里的水,用milliQ水輕輕潤洗幾次,【若管底有可見的蛋白沉淀,可以先加入水,然后用設備頭吹打,注意不要碰到膜,吹打至沉淀懸起,然后倒掉,不可用自來水猛沖】然后加入0.2M的NaOH溶液,室溫放置20min,期間平衡超濾管。再離心10min。倒出殘留的NaOH溶液,將管芯浸入MilliQ水的燒杯(1或2L)中,放置幾個小時,再換新的水,放置幾個小時,不斷稀釋NaOH濃度。50ml管和蓋子用自來水洗,內(nèi)壁再用MilliQ水洗干凈。取出浸沒的管芯,加至接近滿的MilliQ水,50ml管也加滿MilliQ水,將管芯慢慢放入50ml。離心管,排出部分水,然后蓋上蓋子,放4度保存,直到下次使用。一般來說,按照上述步驟和注意事項,每根管用三四年不會壞。
一般來說,我們較常用的離心管就是塑料離心管,塑料離心管的優(yōu)缺點也很明顯,優(yōu)點是它的硬度較小,可以利用穿刺法來得到我們需要的物質(zhì)。但這也正是它的缺點,因為硬度小,所以它也更容易變形,抗腐蝕性也差,所以它的壽命是比較短的。塑料離心管的還可以按照材質(zhì)來選擇,分別有聚乙烯(PE),聚碳酸酯(PC),聚丙烯(PP)這三種材質(zhì)。一般大規(guī)模的實驗室都是將塑料離心管做一次性使用,但一般的實驗室還是會循環(huán)使用,不推薦循環(huán)使用,因為這樣會造成實驗結果的不準確性,但如果非要做循環(huán)使用的話小編還是建議使用pp材質(zhì)的離心管,然后經(jīng)過高壓高溫進行消毒,pp材質(zhì)是上述三種材質(zhì)中較好的,所以在選擇的時候我們盡量選擇pp材質(zhì)的離心管。超濾離心管適用于從細胞培養(yǎng)基、血漿、尿液等樣品中提取蛋白質(zhì)、核酸、多糖等大分子化合物。
超濾離心管應用:1、組成部分:該裝置包括一個蓋子、一個過濾器和一個50ML的離心管。2、帶有擺桶式或定角式轉子的離心器以及可以容納50mL試管的樣本腔/試管座。①注意:為了避免在離心過程中損壞裝置,在旋轉前請檢查間隙。 3、帶有200微升(μL)的移液管,用于濃縮液回收適用性。①注意:該產(chǎn)品未經(jīng)消毒,只供一次使用,保質(zhì)期3年。為確保對預定用途的適用性,建議進行初步的回收和截留試驗。4、濃縮含有抗原、抗體、酶、核酸(單株或雙株DNA/RNA樣本)、微生物、洗出液和凈化樣本的生物樣本。5、凈化組織培養(yǎng)基提取液和細胞溶解液中的大分子成分,從反應混合液中去除引物、連接或分子標記,在HPLC之前去除蛋白質(zhì)。超濾離心管可以去除混合物中的雜質(zhì)和低分子量化合物,得到高純度的目標化合物。四川高離心力離心管哪家強
超濾離心管通常需要在低溫條件下進行操作,以避免目標分子被破壞或失活。紹興濃縮超濾離心管推薦
超濾離心管只需5到15分鐘,即可對50到500L樣本進行簡便、可靠的濃縮與脫鹽處理:快速處理樣本。通常,回收率高于90%;備有低蛋白質(zhì)結合的Omega、Bio-Inert或GHP濾膜可供選擇。對應各種截留分子量,備有各種編碼以供輕松識別的顏色可供選擇。結構材料為低結合聚丙烯。超聲焊接密封,防止側流或密封不嚴。適用于配合1.5mL試管的標準離心轉子。超濾離心管通常不需要預處理即可使用,不過對于蛋白質(zhì)樣本處理,特別是較稀的蛋白質(zhì)溶液來說(<10ug/mL),用超濾膜濃縮回收率常常是不定量的。雖然PES材料使非特異吸附較小化,但是,某些蛋白,特別是稀的時候,會有問題。非特異結合的程度隨著個別蛋白結構的不同而不同。紹興濃縮超濾離心管推薦