安徽GingisREXIdeS蛋白酶

來源: 發(fā)布時間:2024-10-04

與IdeS不同,在蛋白質zhiliao藥物的質量控制過程中,詳細分析和識別質量屬性非常重要。對于具有柔性連接子的融合蛋白療法,這包括確認連接蛋白的質量以及蛋白質接頭的質量。使用 Genovis的GlySERIAS 的連接子酶切可以通過分離連接的蛋白質結構域來幫助這種質量控制。然而,連接子中的大量甘氨酸殘基提供了酶的許多潛在消化位點,導致連接子內(nèi)多個位點同時水解。消化的產(chǎn)物通常由連接蛋白的幾種變體組成,并保留不同程度的連接子。雖然觀察到的異質性通常不會對蛋白質亞基的詳細表征產(chǎn)生負面影響,但有助于直接表征連接子,但有時需要更均勻的消化產(chǎn)物來詳細分析單個蛋白質結構域。使用GlySERIAS 的連接子酶切可以通過分離連接的蛋白質結構域來幫助這種質量控制。安徽GingisREXIdeS蛋白酶

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Genovis將固定化酶固定在磁珠上,用于在鉸鏈下方自動消化IgG。FabRICATOR(IdeS)是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶,可消化鉸鏈下方單個氨基酸位點的抗體,產(chǎn)生均質的F(ab')2和Fc片段。FabRICATORMagIC磁珠含有FabRICATOR固定化酶。這些微球能夠在中級表征工作流程中并行快速自動酶解多種抗體。它們專為自動化平臺而設計,但在無法實現(xiàn)自動化的情況下,在振動臺上的表現(xiàn)同樣出色。酶切消解后,樣品可直接轉移到LC-MS的自動進樣器進行快速色譜分析,或轉移到其他分析方法進行分析。自動平行抗體酶切和亞基生成允許處理與克隆選擇、工藝開發(fā)和潛在生物制藥穩(wěn)定性研究相關的大量樣品。自動抗體亞基分析可減少操作人員的時間和樣品處理錯誤的風險,并提高通量。安徽FabALACTICAIdeS蛋白酶IgASAP Sub1 的消化位點位于該擴展區(qū)域,使IgASAP酶具有 IgA1 特異性。

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當你應用像肽圖這樣的方法時,你可以從Genovis中級方法中獲得的信息量就沒有那么多了。一個主要的區(qū)別是你不能像在肽水平上那樣將修改定位到單個氨基酸。然而,中級分析比肽圖譜具有快速和簡單的巨大優(yōu)勢,因為需要分析的色譜峰要少得多,數(shù)據(jù)處理任務要簡單得多。此外,在中級實驗中,手工實驗步驟要少得多,F(xiàn)abALACTICA(IdeS)酶切消化方法不需要針對不同的人體IgG1進行優(yōu)化。一旦在氨基酸水平上進行了PTM表征,我們非常認為中級表征肽圖的一種補充方法,可以在更常規(guī)的基礎上應用。中級分析更適用于高通量或監(jiān)測類型的方法,并可用于支持肽圖分析。

Genovis的FabRICATOR(IdeS)是一種獨特的酶,可在鉸鏈區(qū)域下方的特定位點消化IgG,產(chǎn)生均勻的F(ab')2和Fc/2片段。除IgG外,沒有其他底物是已知的。IgG在30分鐘內(nèi)消化,如果孵育時間延長,則不存在過度消化的風險。由于FabRICATOR在生理反應條件下消化IgG,因此保留了免疫反應性。在37°C下獲得良好的活性,但也可以在室溫下使用較長的反應時間進行消解。FabRICATOR可消化人類的所有亞類以及猴子、兔子和綿羊IgG的某些亞類。它對小鼠IgG2a和IgG3的活性有限-為了消化這些抗體物種,我們建議使用FabRICATORZ。FabRICATOR是從化膿性鏈球菌克隆而來的,并在大腸桿菌中表達。該酶含有His標簽,分子量為37725Da。FabRICATOR是IdeS的重組修飾形式,由GenovisAB開發(fā),用于需要高標準和一致性的生物技術應用。有一種檢測FabRICATOR酶的方法。了解有關山羊多克隆抗體Anti-FabRICATOR的更多信息。Genovis將固定化酶固定在磁珠上,用于在鉸鏈下方自動消化 IgG。

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其他基于 IgG 的生物制藥需要仔細表征和監(jiān)測關鍵質量屬性,例如氧化、糖基化和其他翻譯后修飾。與抗體的克隆選擇、工藝開發(fā)和穩(wěn)定性研究相關的大量樣品通常通過液相色譜質譜 (LC-MS) 進行分析。然而,在LC-MS之前進行足夠規(guī)模的樣品制備通常具有挑戰(zhàn)性。為了解決樣品制備的挑戰(zhàn),Genovis將半胱氨酸蛋白酶FabRICATOR(IdeS)固定在磁性瓊脂糖珠上,現(xiàn)在稱為FabRICATOR MagIC。FabRICATOR固定在磁珠上,可同時快速自動消化多種抗體,促進中級表征工作流程。Genovis的FabRICATOR MagIC 如何以較少的用戶交互減少實驗和操作時間,降低樣品處理錯誤的風險,同時提高通量。QC方法需要執(zhí)行簡單,易于訓練,高度可重復,數(shù)據(jù)易于分析。安徽GingisREXIdeS蛋白酶

FabRICATOR Magic磁珠化IdeS酶切的自動抗體亞基分析可減少操作人員的時間和樣品處理錯誤的風險。安徽GingisREXIdeS蛋白酶

Genovis的FabRICATOR Fab2 (IdeS)試劑盒可消化兔 IgG,但要在親和步驟中捕獲 Fc 片段,您需要另一種填料,而不是試劑盒中通常包含的 CaptureSelect? Fc。如果您對處理兔IgG感興趣,請聯(lián)系Genovis團隊,我們將在FabRICATOR Fab2試劑盒中提供與兔Fc相容的樹脂色譜柱。使用FabRICATOR的抗體消化的簡單性、速度和可重復性也意味著這種酶可以被用于質量控制應用。 QC方法需要執(zhí)行簡單,易于訓練,高度可重復,數(shù)據(jù)易于分析,這正是您使用FabRICATOR所得到的。 因為它適用于一系列不同的IgG,這也意味著使用FabRICATOR進行QC工作的客戶將能夠在未來的產(chǎn)品中使用它。 這顯示了這種酶在抗體消化中是多么的有效。安徽GingisREXIdeS蛋白酶