浙江N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)

GlycOCATCH?親和純化：用于粘蛋白型O-糖蛋白和肽親和純化的富集樹脂。GlycOCATCH親和純化以方便的離心柱形式提供。該產(chǎn)品包含：4 個 GlycOCATCH 親和純化微離心柱，每個柱能夠結(jié)合 50 μg 粘蛋白型 O-糖蛋白（總共 200 μg）。Genovis的SialEXO 凍干 200 單位，用于去除唾液酸；OpeRATOR 凍干 200 單位，用于結(jié)合的 O-糖蛋白的可選洗脫方法。1. 靶向 O-糖蛋白富集；2. 復(fù)雜樣品的特異性凈化；3. 用于改進(jìn) MS 分析的樣品制備。O-糖基化蛋白和肽的特異性富集：O-連接聚糖參與多種生物過程，包括抑制病原體引起的gan染、炎癥反應(yīng)、造血和細(xì)胞信號傳導(dǎo)。用SialEXO對依那西普糖蛋白去唾液酸化，并用ProteinSimple成像等電聚焦分析。浙江N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)

該酶適用于在釋放的聚糖結(jié)構(gòu)上修剪半乳糖，用于外切糖苷酶陣列，或用于生成具有均相 G0/G0F 聚糖譜的抗體。1. 高效β-半乳糖苷酶混合物 – 快速去除末端 β1-3 和 β1-4-連接的半乳糖；2. 有助于在亞基水平上識別糖基化修飾；3. 可固定在即用型離心柱中。Genovis的GalactEXO是一種外切糖苷酶，含有β-半乳糖苷酶的混合物，可有效去除N-和O-糖基化蛋白或寡糖上的半乳糖殘基。該混合物由兩種半乳糖苷酶組成，可高效水解 β1-3 和 β1-4 連接的半乳糖酶。GalactEXO在天然條件下水解糖蛋白，并在5.5至7.5的寬pH值范圍內(nèi)顯示活性。上海凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶瑞典GenovisFucosEXO凍干劑以凍干粉的形式提供，裝在2000單位的小瓶中，用于2mg糖蛋白的去碳基化。

經(jīng)過多年的經(jīng)驗積累及市場積淀，倍篤生物已組合多條不同產(chǎn)品線，分別滿足體外診斷、organoid及干細(xì)胞、細(xì)胞基因藥物等領(lǐng)域的需求。其中，細(xì)胞基因藥物領(lǐng)域產(chǎn)品線包含SAN HQ高鹽核酸酶及M-SAN HQ中鹽核酸酶、泊洛沙姆P 188 Bio、GMP級MSC/PSC培養(yǎng)基、GMP級膠原酶、AAV滴度檢測產(chǎn)品、工藝雜質(zhì)及外源污染物殘留檢測產(chǎn)品、聚糖分析用酶、ADC偶聯(lián)技術(shù)、QED抗體對、AAV中和抗體、蛋白酶等；相關(guān)品牌有挪威ArcticZymes Technologies、德國BASF、德國Sartorius、德國Nordmark、瑞典Genovis、美國QED、中國君研生物等。

在Genovis的PNGaseF去除N-聚糖并用SialEXO和GalactEXO截斷O-聚糖后，在質(zhì)譜圖中觀察到幾個與GalNAcs相關(guān)的峰。為了去除剩余的GalNAc殘基，應(yīng)用GalNAcEXO酶。用GalNAcEXO處理后觀察到的單個蛋白峰顯示完全去除剩余的GalNAcs。?GalNAcEXO在生理緩沖液和中性pH值中具有活性，使其與大多數(shù)樣品相容。此外，GalNAcEXO的活性不依賴于任何可能影響LC-MS分析的輔因子，如BSA。根據(jù)底物的性質(zhì)，糖蛋白的GalNAcEXO反應(yīng)在2小時內(nèi)完成，而更復(fù)雜的樣品可能需要孵育過夜。Genovis的GalNAcEXO也可固定在離心柱中，以便快速方便地處理樣品，在制備過程中不會殘留酶。GalNAcEXO 是一種 α-N-乙酰半乳糖胺苷酶，可有效水解糖蛋白上的末端 GalNAc 殘基。

Genvis測試去除唾液酸以揭示電荷變體：唾液酸是帶負(fù)電荷的糖殘基，存在于 N- 和 O-連接的聚糖上。唾液酸的固有電荷可能會使分析工作流程復(fù)雜化，從而掩蓋其他重要的修飾。Microspin 色譜柱可用于 2 x 0.5 mg、5 x 0.5 mg 或 10 x 0.5 mg 糖蛋白的去唾液酸化。1. 易于使用的離心柱；2. 提高酶與底物的比例，提高消化效率；3. 樣品中不含酶。因此，唾液酸的去除有助于研究蛋白質(zhì)中的潛在變體。該應(yīng)用展示了一種快速簡便的樣品制備方法，可在電荷異構(gòu)體分析之前去除所有唾液酸。因此，其水解需要底物蛋白以與酶活性相容的方式變性。上海凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis

OglyZOR 是一種內(nèi)切糖苷酶，可特異性水解天然糖蛋白上的he心 1 O-聚糖；浙江N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)

Genovis的ImpaRATOR? 和 OpeRATOR? - 兩種協(xié)同的作用：O-糖蛋白酶。使用ImpaRATOR或OpeRATOR消化后分析依那西普重糖基化區(qū)域O-聚糖位點的覆蓋率（圖3）。使用OpeRATOR鑒定對應(yīng)于所有13個O-聚糖位點的肽，而使用ImpaRATOR只能明確鑒定10個位點。ImpaRATOR 可能比 OpeRATOR （1） 具有更具選擇性的氨基酸序列偏好，此處由 S186 和 T245 位點缺乏消化來表明。此外，ImpaRATOR 在兩個相鄰的 O-糖基化氨基酸之間顯示出有限的裂解，如 S213 位點酶解肽的缺乏以及 T200 和 T217 位點酶解肽的低強度所證明的那樣。在OpeRATOR酶解樣品（T184-S199和T200-H204;圖2b和d），而在ImpaRATOR消化的樣品中，具有漏裂的相應(yīng)肽（S184-H204）的強度更高。 雖然OpeRATOR顯示出更高的O-聚糖位點覆蓋率，但使用ImpaRATOR進(jìn)行消化可以表征O-聚糖結(jié)構(gòu)，包括唾液酸化物種。例如，條形圖插入顯示了兩種糖肽 T184-V198 和 T205-P207 的 O-聚糖種類。這應(yīng)該與使用OpeRATOR的消化進(jìn)行比較，在OpeRATOR中，必須去除唾液酸才能產(chǎn)生酶活性，這意味著有關(guān)唾液酸化的信息丟失。總而言之，ImpaRATOR 和 OpeRATOR 酶共同提供了有關(guān)聚糖組成和 O-聚糖位點的完整信息。浙江N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)