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AO/PI染色原理:吖啶橙(AO)是一種小分子染料,可以通過完整的細(xì)胞膜,嵌入所有細(xì)胞(活細(xì)胞和死細(xì)胞)的細(xì)胞核,呈現(xiàn)綠色熒光;碘化丙啶(PI)只能通過不完整的細(xì)胞膜,即死細(xì)胞的細(xì)胞膜,嵌入所有死細(xì)胞的細(xì)胞核,呈現(xiàn)紅色熒光,通過標(biāo)記出的綠色熒光和紅色熒光就可以辨別出活細(xì)胞和死細(xì)胞,這種特異性染色的方法也可以排除無核細(xì)胞、雜質(zhì)、碎片等的干擾。熒光細(xì)胞計數(shù)儀檢測結(jié)果可以讓我們直觀的看到:細(xì)胞濃度(總細(xì)胞,活細(xì)胞,死細(xì)胞)、細(xì)胞存活率(臺盼藍(lán)和雙熒光AO/PI染色)、細(xì)胞平均直徑、細(xì)胞聚團(tuán)率、細(xì)胞直徑分布等結(jié)果的展示。DNA樣品請?zhí)峁╇娪灸z圖,濃度>20 ng/μl,總量一般1~2 μg。乙醇沉淀DNA或凍干DNA,可冰袋運輸,不超過3天。靶向捕獲高通量測序服務(wù)
如果你的樣品是質(zhì)?;蛘呤蔷?,那為什么不試試我們的KBSeq呢?準(zhǔn)確、迅速,可以說是KBSeq的代名詞了,關(guān)鍵是還可以省錢,估計這是很多小伙伴們一定會說,你這個服務(wù)單價可比Sanger貴多了,怎么可能會省錢呢?Sanger測序的價格:常規(guī)的一代測序基本上要每800 bp就測一個反應(yīng),那我們來算一下14000/800=17.5,那基本上就要測18個反應(yīng)了,按照現(xiàn)在生工官方的價格區(qū)間,這個屬于反應(yīng)數(shù)在10-49個反應(yīng)之間的,那每個反應(yīng)的價格為26元,這樣算下來18*26=468元,還要加上引物合成的費用,實驗周期的話大概率是要超過15天的。KBSeq全質(zhì)粒測序的價格:序列長度屬于6-15 kb之間,159元,實驗的周期大概在5-7天左右。上海地區(qū)靶向捕獲高通量測序生物信息分析經(jīng)驗豐富,可以滿足客戶標(biāo)準(zhǔn)分析到定制分析作圖的需求。
生工高通量測序樣品要求,環(huán)境樣品:如果是新鮮土壤/污泥樣品,可以以冰袋運輸,不超過3天;如果是凍存過的樣品(-20°C或者-80°C冰箱保存),為避免反復(fù)凍融,建議用足量的干冰(根據(jù)經(jīng)驗,在秋冬季節(jié),如果打包合適,3公斤塊狀干冰可以維持30-40小時)寄送;如果是水體樣品,建議采用濾膜過濾后,將濾膜寄送來生工。生工不負(fù)責(zé)過濾。要求濾膜3張,冰袋運輸,不超過3天。其余特殊環(huán)境樣品,具體咨詢生工高通量測序部。
DNA樣品:請?zhí)峁╇娪灸z圖,濃度>20 ng/μl,總量一般1~2 μg。乙醇沉淀DNA或凍干DNA,可冰袋運輸,不超過3天。
單細(xì)胞測序是什么?單細(xì)胞測序是基于高通量測序(Next-generationsequencingtechnology,NGS)方法,檢測群體中單細(xì)胞基因組、單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組、單細(xì)胞表觀基因組及單細(xì)胞蛋白組,提供細(xì)胞間差異的高分辨率視圖,從分子水平揭示細(xì)胞奧秘。單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組測序(Single-cellRNA-Sequencing,ScRNA-Seq)指在單細(xì)胞水平上對mRNA進(jìn)行高通量測序和分析的技術(shù)。單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組測序能獲得單個細(xì)胞內(nèi)近萬個基因的表達(dá)信息,為辨別生物組織中各種細(xì)胞類型的轉(zhuǎn)錄組特征和全方面揭示細(xì)胞之間基因表達(dá)的異質(zhì)性提供了有力的工具[3]。說到細(xì)胞異質(zhì)性(Cellheterogeneity),就要說到我們?yōu)槭裁匆脝渭?xì)胞測序技術(shù)了。Life Ion torrentPGM 運行314、316、318芯片,可以承接擴(kuò)增子測序、靶區(qū)域測序、基因組重測序服務(wù)。
通過顯微鏡使用血球計數(shù)板質(zhì)檢得到質(zhì)檢結(jié)果:明場(細(xì)胞未染色):主要可以觀察懸液背景質(zhì)量(背景干凈,無雜質(zhì)碎片,無細(xì)胞團(tuán)塊);臺盼藍(lán)場(細(xì)胞與臺盼藍(lán)染色后):主要可以觀察活性(主要為活細(xì)胞,未染色藍(lán)色的為活細(xì)胞);通過臺盼藍(lán)場計算活率:90%>80%;細(xì)胞濃度:710cells/μl;等結(jié)果來看,血球計數(shù)板質(zhì)檢結(jié)果的展示可以看出所有指標(biāo)均符合上機標(biāo)準(zhǔn),屬于高質(zhì)量單細(xì)胞懸液。以上就是我們本次的單細(xì)胞懸液質(zhì)檢指南分享啦。關(guān)鍵是KBSeq還可以省錢。多重PCR高通量測序服務(wù)
于微生物樣品,請客戶如實聲明所屬物種,對于可能致病的微生物,生工保留拒收的權(quán)利。靶向捕獲高通量測序服務(wù)
全轉(zhuǎn)錄組測序(Total RNA-Seq),項目介紹:全轉(zhuǎn)錄組是指特定細(xì)胞在特定狀態(tài)下所能轉(zhuǎn)錄出來的所有RNA的總和,包括mRNA和非編碼RNA(non-coding RNA)。針對非編碼RNA的研究主要集中在具有調(diào)控作用的miRNA,lncRNA和circRNA。基于二代測序技術(shù)的全轉(zhuǎn)錄組測序研究,同時分析同一樣本中的mRNA,lncRNA,circRNA和miRNA,并且通過關(guān)聯(lián)分析,使研究內(nèi)容更加系統(tǒng)化,致力于深入挖掘生命現(xiàn)象背后的轉(zhuǎn)錄調(diào)控問題。組織樣品或者總 RNA, 樣品名稱清晰,干冰運輸。靶向捕獲高通量測序服務(wù)
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