上海lncRNA高通量測(cè)序原理

通過(guò)顯微鏡使用血球計(jì)數(shù)板質(zhì)檢能觀察到懸液背景質(zhì)量和細(xì)胞數(shù)目及活性的評(píng)估。讓我們?cè)賮?lái)回顧一下臺(tái)盼藍(lán)染色原理：臺(tái)盼藍(lán)染色原理：臺(tái)盼藍(lán)不能透過(guò)活細(xì)胞正常完整的細(xì)胞膜，故活細(xì)胞不被染色。而死細(xì)胞的細(xì)胞膜透性增高，可使染料進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)而使死細(xì)胞染成淡藍(lán)色。怎樣通過(guò)血球計(jì)數(shù)板進(jìn)行質(zhì)檢操作呢？將血球計(jì)數(shù)板擦拭干凈，取干凈的蓋玻片蓋在計(jì)數(shù)板上；將細(xì)胞懸液混勻（或10μl臺(tái)盼藍(lán)+10μl細(xì)胞懸液），吸出10μl懸液至計(jì)數(shù)板上蓋玻片的一側(cè)使細(xì)胞核懸液鋪滿蓋玻片和計(jì)數(shù)板之間；在顯微鏡下分別對(duì)V1/V2/V3/V4四個(gè)計(jì)數(shù)區(qū)域進(jìn)行計(jì)數(shù)；按細(xì)胞計(jì)數(shù)公式進(jìn)行計(jì)算，計(jì)算公式：細(xì)胞總數(shù)={(V1+V2+V3+V4)/4}*10000*懸液體積*稀釋倍數(shù)，V1/V2/V3/V4為各個(gè)計(jì)數(shù)區(qū)的細(xì)胞數(shù)目，細(xì)胞活率=活細(xì)胞數(shù)目/總細(xì)胞數(shù)目*100%。單細(xì)胞測(cè)序到底是什么？上海lncRNA高通量測(cè)序原理

怎樣通過(guò)血球計(jì)數(shù)板進(jìn)行質(zhì)檢操作呢？將血球計(jì)數(shù)板擦拭干凈，取干凈的蓋玻片蓋在計(jì)數(shù)板上；將細(xì)胞懸液混勻（或10μl臺(tái)盼藍(lán)+10μl細(xì)胞懸液），吸出10μl懸液至計(jì)數(shù)板上蓋玻片的一側(cè)使細(xì)胞核懸液鋪滿蓋玻片和計(jì)數(shù)板之間；在顯微鏡下分別對(duì)V1/V2/V3/V4四個(gè)計(jì)數(shù)區(qū)域進(jìn)行計(jì)數(shù)；按細(xì)胞計(jì)數(shù)公式進(jìn)行計(jì)算，計(jì)算公式：細(xì)胞總數(shù)={(V1+V2+V3+V4)/4}*10000*懸液體積*稀釋倍數(shù)，V1/V2/V3/V4為各個(gè)計(jì)數(shù)區(qū)的細(xì)胞數(shù)目，細(xì)胞活率=活細(xì)胞數(shù)目/總細(xì)胞數(shù)目*100%。上海市生工高通量測(cè)序服務(wù)對(duì)于需要進(jìn)行RNA抽提的部分特殊樣品，可以將組織在液氮中研磨后用TRIzol懸浮后用普通冰袋寄送。

什么是KBSeq全質(zhì)粒測(cè)序？它基于第二代測(cè)序技術(shù)，一次性對(duì)大量質(zhì)粒（比較多可達(dá)6000個(gè)樣本）進(jìn)行并行測(cè)序，利用生物信息學(xué)分析，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行序列組裝并獲得每一個(gè)質(zhì)粒的完整序列信息。所以我們也稱它為，可以部分替代一代測(cè)序的高通量測(cè)序技術(shù)。測(cè)序長(zhǎng)度：對(duì)于測(cè)序長(zhǎng)度較長(zhǎng)，如果我們用Sanger測(cè)序往往需要花費(fèi)大量的時(shí)間，而我們KBSeq全質(zhì)粒測(cè)序則只需要5-7天，就可以測(cè)通片段長(zhǎng)度小于30kb以下的片段。樣本用量：KBSeq全質(zhì)粒測(cè)序?qū)τ跇颖镜牧?，要求的也比較少，比如質(zhì)粒我們的樣本要求DNA的濃度需≥ 1 ng/μl, 體積需≥5 μl，如果比較珍貴的樣本或者是樣本比較難提取的，KBSeq就更為適合了。

生工靶向捕獲測(cè)序，項(xiàng)目介紹：利用序列捕獲技術(shù)將基因組特定區(qū)域DNA捕捉并富集后進(jìn)行高通量測(cè)序的基因組分析方法。全外顯子測(cè)序即通過(guò)對(duì)某一基因組中的所有外顯子進(jìn)行測(cè)序從而獲得所有外顯子區(qū)域內(nèi)的突變信息。由于該技術(shù)在臨床上的潛力，被《科學(xué)》雜志評(píng)為2010年科學(xué)進(jìn)展之一。外顯子組測(cè)序可用于尋找單基因疾病、復(fù)雜疾?。ㄈ缣悄虿　⒎逝职Y等代謝綜合癥）、甚至是cancer的致病基因或易感基因。生工生物采用Aglient SureSelect系列外顯子捕獲系統(tǒng)，可以高效富集人全外顯子區(qū)域，并結(jié)合Illumina XTen測(cè)序平臺(tái)進(jìn)行深度測(cè)序。后期可以完成SNP/InDel/CNV等變異檢測(cè)，形成完整的分析報(bào)告。單細(xì)胞測(cè)序技術(shù)可以檢測(cè)復(fù)雜組織中單個(gè)細(xì)胞不同的生物學(xué)特性.

使用顯微鏡進(jìn)行懸液質(zhì)檢操作時(shí)應(yīng)注意：1.使用血球計(jì)數(shù)板時(shí)，可以提前鏡檢觀察每小格計(jì)數(shù)室內(nèi)是否潔凈無(wú)雜質(zhì)。若有雜質(zhì)灰層，則需要多次清洗，直至計(jì)數(shù)室潔凈無(wú)瑕；2.質(zhì)檢前將懸液輕微震蕩或使用擴(kuò)口gun頭吹打混勻；3.臺(tái)盼藍(lán)染色后需要盡快完成細(xì)胞計(jì)數(shù)，一般建議不要超過(guò)10分鐘；4.如果方格中細(xì)胞數(shù)目過(guò)多，難以數(shù)清，應(yīng)當(dāng)對(duì)細(xì)胞懸液進(jìn)行稀釋以便于計(jì)數(shù)；5.對(duì)于壓在方格界線上的細(xì)胞應(yīng)當(dāng)計(jì)數(shù)同側(cè)相鄰兩邊上的細(xì)胞數(shù)，一般可采取“數(shù)上線不數(shù)下線，數(shù)左線不數(shù)右線”的原則處理，另兩邊不計(jì)數(shù)。什么是KBSeq全質(zhì)粒測(cè)序？上海地區(qū)宏基因組高通量測(cè)序服務(wù)

X儀器本身有16個(gè)通道（Controller為8通道），每個(gè)通道極限多捕獲20000個(gè)細(xì)胞（Controller為10000個(gè)細(xì)胞） 。上海lncRNA高通量測(cè)序原理

對(duì)于用RNA組織保存液寄送的樣品，請(qǐng)按照RNA組織保存液說(shuō)明保存和寄送。請(qǐng)注意：1)樣品浸入組織保存液之前，對(duì)于動(dòng)物組織樣品，須以建議快速度將樣品剪切成厚度小于0.5cm的碎塊；對(duì)于植物樣品，須以建議快速度將樣品剪切成厚度小于0.3cm的碎塊。2)鼠肝、腎和脾等小organ樣品和沒(méi)有蠟質(zhì)保護(hù)層的植物樣品可不剪切直接放入保存液中保存，有蠟質(zhì)保護(hù)層的植物樣品需要先將蠟表皮破壞。3)確保將樣品完全浸泡在保存液中，不讓其粘貼在管壁和蓋上。上海lncRNA高通量測(cè)序原理

生工生物工程（上海）股份有限公司是一家研發(fā)、生產(chǎn)化學(xué)試劑、生化試劑、生物試劑、耗材、小型儀器及生物工程相關(guān)產(chǎn)品(以上經(jīng)營(yíng)涉及位險(xiǎn)化學(xué)品的只有分裝業(yè)務(wù))，銷售公司自產(chǎn)產(chǎn)品并提供售后技術(shù)服務(wù);從事上述產(chǎn)品的同類商品(危險(xiǎn)化學(xué)品限許可證規(guī)定范圍)的進(jìn)出口、批發(fā)、傭金代理(拍實(shí)除外)及相關(guān)配套服務(wù);提供生物工程技術(shù)服務(wù)、技術(shù)開(kāi)發(fā)、技術(shù)咨詢。:提供倉(cāng)儲(chǔ)業(yè)務(wù)。 【依法須經(jīng)批準(zhǔn)的項(xiàng)目。經(jīng)相關(guān)部門批準(zhǔn)后方可開(kāi)展經(jīng)營(yíng)活動(dòng)】的公司，致力于發(fā)展為創(chuàng)新務(wù)實(shí)、誠(chéng)實(shí)可信的企業(yè)。生工生物擁有一支經(jīng)驗(yàn)豐富、技術(shù)創(chuàng)新的專業(yè)研發(fā)團(tuán)隊(duì)，以高度的專注和執(zhí)著為客戶提供生化試劑，實(shí)驗(yàn)耗材，實(shí)驗(yàn)試劑，研發(fā)。生工生物繼續(xù)堅(jiān)定不移地走高質(zhì)量發(fā)展道路，既要實(shí)現(xiàn)基本面穩(wěn)定增長(zhǎng)，又要聚焦關(guān)鍵領(lǐng)域，實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)型再突破。生工生物創(chuàng)始人王啟松，始終關(guān)注客戶，創(chuàng)新科技，竭誠(chéng)為客戶提供良好的服務(wù)。