目前對我國首例輸入性裂谷熱病例病毒進(jìn)行全基因組測定,分析其進(jìn)化來源及潛在變異.方法提取樣本核酸,非特異性反轉(zhuǎn)錄擴(kuò)增病毒基因組RNA,使用IonTorrent二代測序儀進(jìn)行病毒全基因組測定.對獲得的基因組數(shù)據(jù)進(jìn)行序列拼接、比對、進(jìn)化樹構(gòu)建和關(guān)鍵位點(diǎn)分析.結(jié)果通過測定獲得了病毒全基因組11979nt,該測定病毒屬E基因分支,序列與先前南非分離株Kakamas相似度較高(>98%).病毒Gn蛋白C端信號肽區(qū)存在1個(gè)氨基酸突變.結(jié)論本研究分析測定的裂谷熱病毒全基因組與目前非洲流行株高度相似,病毒基因特征未出現(xiàn)明顯變異。病毒全基因組測序產(chǎn)品特點(diǎn):對采集臨床樣本直接檢測。成都病毒序列測序要多久
需要對病毒的全基因組進(jìn)行測序的應(yīng)用場景:在探普生物長時(shí)間運(yùn)行過程中,我們接觸到的對病毒的全基因組進(jìn)行測序項(xiàng)目有比較豐富的應(yīng)用場景。先,從事基因進(jìn)化/疫苗/藥品/抗體研制方向的研究的研究者一定會用到測序。這種場景一般是用密集的sanger測序監(jiān)測某幾個(gè)關(guān)鍵基因,搭載一定頻率的全基因組測序。這樣的組合省時(shí)省力省經(jīng)費(fèi),同時(shí)能達(dá)到研究目的。此外,有的單位需要對傳染病的病原進(jìn)行流行病學(xué)監(jiān)測和研究,如疾控/疫控中心、醫(yī)院的傳染病科室以及一些高校和研究所的相應(yīng)課題組,可能需要對病毒的全基因組進(jìn)行測序以后,結(jié)合其他上下游的研究數(shù)據(jù),達(dá)到研究或者監(jiān)測疫病的目的。國內(nèi)深度測序分析哪家好病毒全基因組測序具有的特點(diǎn):采用高通量測序儀,全流程質(zhì)控。
病毒全基因組測序定:探普生物對病毒的全基因組進(jìn)行測序的實(shí)驗(yàn)基于二代測序技術(shù)。樣本經(jīng)過核酸純化-文庫構(gòu)建-生物信息學(xué)分析這3大基本流程后轉(zhuǎn)換成了序列數(shù)據(jù)。先,在核酸純化環(huán)節(jié),探普提供專門針對性的核酸純化樣本指南,以提高目的物種的核酸純度和得率,與此同時(shí)探普生物也提供核酸純化服務(wù)。第二,文庫構(gòu)建環(huán)節(jié),樣本的核酸具備濃度低,總量少的特點(diǎn)。探普生物專門針對這一點(diǎn)開發(fā)了超微量核酸文庫構(gòu)建,可以將0.01ng/μl甚至更低濃度的核酸構(gòu)建成測序文庫。第三,生物信息學(xué)分析環(huán)節(jié)。生存環(huán)境和狀態(tài)決定了對病毒的全基因組進(jìn)行測序的下機(jī)數(shù)據(jù)一般都伴隨大量的宿主和其他微生物的數(shù)據(jù)。探普生物基于該特點(diǎn),優(yōu)化了自有數(shù)據(jù)庫,搭載了專門用的的生物信息學(xué)分析流程,可處理復(fù)雜背景下的目標(biāo)物種序列。
病毒(Virus)由一種核酸分子(DNA或RNA)與蛋白質(zhì)(Protein)構(gòu)成或由蛋白質(zhì)構(gòu)成(如朊病毒)。根據(jù)遺傳物質(zhì)的組成,可分為單鏈DNA病毒(ssDNA)、雙鏈DNA病毒(dsDNA)、單鏈RNA病毒(ssRNA)、雙鏈RNA病毒(dsRNA)和蛋白質(zhì)病毒(如朊病毒)。根據(jù)宿主類型的不同,可以分為噬菌體(細(xì)菌病毒)、植物病毒(煙花葉病毒)和動(dòng)物病毒(如禽流感病毒、天花病毒和HIV等)。病毒全基因組測序(VirusWholeGenomeSequencing,VWGS),是指基于第二代高通量測序技術(shù),對病毒全基因組進(jìn)行測序,利用生物信息分析手段,得到病毒的全基因組序列,解析編碼信息,并獲得相應(yīng)的變異信息。病毒全基因組測序產(chǎn)品特點(diǎn):樣本的所有病原信息一網(wǎng)打盡。
病毒全基因組測序,高通量測序技術(shù)的發(fā)展在生物信息學(xué)分析方面,通過新的分析軟件的研發(fā)和原有分析軟件的升級,對測序所得數(shù)據(jù)的分析也變得更加可靠;除此之外,伴隨著BasSpace等服務(wù)的出現(xiàn),進(jìn)行數(shù)據(jù)分析工作所需的設(shè)備成本也在逐步降低。將來,伴隨著高通量測序技術(shù)與數(shù)據(jù)分析技術(shù)的不斷進(jìn)步,測序精度與可靠性的上升,測序與數(shù)據(jù)分析成本的下降,高通量測序技術(shù)會在各個(gè)領(lǐng)域得到應(yīng)用。在病原微生物檢測和鑒定應(yīng)用中,高通量測序技術(shù)勢必會成為不可或缺的技術(shù)并發(fā)揮越來越重要的作用。高通量測序?qū)嶒?yàn)足夠靈敏和完善,方能獲得準(zhǔn)確、可信任的結(jié)果。全基因組測序覆蓋面廣。DNA病毒高通量測序分析公司
新一代測序中基因從頭測序和重測序有什么區(qū)別?成都病毒序列測序要多久
病毒基因組測序的標(biāo)準(zhǔn)有:測序的完成程度,決定著基因組的下游應(yīng)用,包括設(shè)計(jì)診斷產(chǎn)品、反向遺傳系統(tǒng)以及開發(fā)調(diào)整對策等。研究團(tuán)隊(duì)希望能夠通過五條標(biāo)準(zhǔn)來填補(bǔ)這樣的空白,這些標(biāo)準(zhǔn)涵蓋了完成病毒基因組的整個(gè)階段,使用不依賴測序技術(shù)的簡單條件規(guī)定了五個(gè)類別。不同的測序技術(shù)可能會很快淘汰更新,因此我們這些標(biāo)準(zhǔn)沒有關(guān)聯(lián)任何特定的測序平臺,可以長時(shí)間的使用下去。一種基于二代測序的pedv病毒基因組分析方法。目前現(xiàn)有的pedv分析方法兩方面的局限,第1,pedv病毒二代測序數(shù)據(jù)中存在部分甚至大量的宿主豬的基因組序列,宿主基因組的污染會影響pedv病毒基因組的拼接。第二,拼接預(yù)測病毒基因結(jié)構(gòu)的方法主要是genemarks等預(yù)測軟件,但由于pdev病毒基因組中基因相互重疊,其中基因內(nèi)部還存在ribosomalframeshift現(xiàn)象,現(xiàn)有的基因預(yù)測軟件并不能準(zhǔn)確識別出正確的基因結(jié)構(gòu)。成都病毒序列測序要多久
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