傳統(tǒng)病原微生物檢測方法是生化方法。生化方法檢測病原微生物實際上是測定微生物特異性酶。由于各種微生物所具有的酶系統(tǒng)不完全相同,對許多物質(zhì)的分解能力亦不一致。因此可利用不同底物產(chǎn)生的不同代謝產(chǎn)物來間接檢測該微生物內(nèi)酶的有無,從而達到檢測特定微生物的目的。如沙門氏菌能產(chǎn)生辛酯酶,這一性能是除沙門氏菌外的各屬腸桿菌科細菌所不具備的。根據(jù)這一特性,甄宏太等報道了快速檢測沙門氏菌的辛酯酶法。大腸埃希氏菌具β2葡萄糖醛酸酶,但以O(shè)157:H7為腸出血性大腸埃希氏菌(EHEC)卻不具此酶,故β2葡萄糖醛酸酶陰性已成為初步篩查EHEC的重要特征。大多微生物鑒定系統(tǒng)是采用細菌分解底物后反應(yīng)液中pH變化的。長沙病原檢測檢測
傳統(tǒng)病原微生物檢測方法概況:隨著醫(yī)學(xué)微生物學(xué)研究技術(shù)的不斷發(fā)展,病原學(xué)診斷已不再局限于病原體水平,深入到分子水平、基因水平的檢測手段不斷出現(xiàn)并被應(yīng)用于臨床和實驗。核酸分子雜交技術(shù)、PCR技術(shù)、基因芯片技術(shù)、高通量測序技術(shù)等檢測方法,自動化程度高,快速省時、無污染、結(jié)果精確,可以準(zhǔn)確靈敏地鑒定病原微生物。傳統(tǒng)的病原微生物的檢測方法有:直接涂片鏡檢、分離培養(yǎng)與生化反應(yīng)、組織細胞培養(yǎng)、血清學(xué)與免疫學(xué)檢測、血清學(xué)與免疫學(xué)檢測、基因檢測(核酸雜交技術(shù)、基因芯片技術(shù)、PCR技術(shù)、環(huán)介導(dǎo)恒溫核酸擴增法等)。山東病毒篩查服務(wù)公司病原微生物檢測的不可知性,使高通量測序成為研究這類病原微生物的有用工具。
微生物檢測的相關(guān)知識:在保藏厭氧菌種或研究微生物的動力時常采用此法。做穿刺接種時,用的接種工具是接種針。用的培養(yǎng)基一般是半固體培養(yǎng)基。它的做法是:用接種針蘸取少量的菌種,沿半固體培養(yǎng)基中心向管底作直線穿刺,如某細菌具有鞭毛而能運動,則在穿刺線周圍能夠生長。澆混接種:該法是將待接的微生物先放入培養(yǎng)皿中,然后再倒入冷卻至45℃左右的固體培養(yǎng)基,迅速輕輕搖勻,這樣菌液就達到稀釋的目的。待平板凝固之后,置合適溫度下培養(yǎng),就可長出單個的微生物菌落。
微生物鑒定還可以用微生物對噬菌體的敏感性作為指標(biāo)來鑒定微生物的種屬。因為各種噬菌體都有其嚴(yán)格的宿主范圍,不同的細菌作為噬菌體的宿主對應(yīng)有特定的已知特性的噬菌體,其和噬菌體的作用方式也有接合,轉(zhuǎn)化,轉(zhuǎn)接,溶原性轉(zhuǎn)換和原生質(zhì)體融合等多種方式。部分細菌可以采用血清學(xué)反應(yīng)的方法來進行區(qū)分和鑒別,就比如說常見的疑似傷寒沙門菌的菌種鑒別,我們可以利用血清學(xué)反應(yīng),現(xiàn)有的已知的對應(yīng)的血清學(xué)反應(yīng)抗體,蘸取菌種液在抗體液中涂抹,看是否會出現(xiàn)血凝現(xiàn)象(即是否出現(xiàn)淡白色的凝集顆粒)。未知病毒是指未被證實的某種病毒。
在實驗室中,為了分離某些厭氧菌,可以利用裝有原培養(yǎng)基的試管作為培養(yǎng)容器,把這支試管放在沸水0浴中加熱數(shù)分鐘,以便逐出培養(yǎng)基中的溶解氧。然后快速冷卻,并進行接種。接種后,加入無菌的石蠟于培養(yǎng)基表面,使培養(yǎng)基與空氣隔絕。另一種方法是,在接種后,利用n2或co2取代培養(yǎng)基中的氣體,然后在火焰上把試管口密封。有時為了更有效地分離某些厭氧菌,可以把所分離的樣品接種于培養(yǎng)基上,然后再把培養(yǎng)皿放在完全密封的厭氧培養(yǎng)裝置中。未知病毒必須在活細胞內(nèi)寄生并復(fù)制的非細胞型微生物。北京RNA病毒鑒定公司
傳統(tǒng)病原微生物檢測方法:生化方法。長沙病原檢測檢測
病毒鑒定常用方法有哪些?病原學(xué)檢測主要適用于急性期血液標(biāo)本,一般認為發(fā)病7天內(nèi)檢測陽性率高。(1)核酸檢測:采用熒光定量RT-PCR方法,是目前早期診斷寨卡病毒病的主要檢測手段。(2)病毒分離:將標(biāo)本接種于蚊源細胞(C6/36)或哺乳動物細胞(BHK21、Vero)進行分離培養(yǎng),出現(xiàn)病變以后,用檢測核酸的方法鑒定病毒。也可使用乳鼠腦內(nèi)接種進行病毒分離。血清學(xué)檢測:(1)血清特異性IgM抗體:發(fā)病3天后可檢出病毒特異IgM抗體,但發(fā)病7天后檢出率高??刹捎肊LISA、免疫熒光等方法檢測。IgM抗體陽性,提示患者可能新近寨卡病毒,但寨卡病毒IgM抗體與登革病毒、黃熱病毒和西尼羅病毒等黃病毒有較強的交叉反應(yīng),易于產(chǎn)生假陽性。(2)中和抗體:采用空斑減少中和試驗方法檢測?;颊呋謴?fù)期血清中和抗體陽轉(zhuǎn)或滴度較急性期呈4倍及以上升高,且排除登革、乙腦等其他常見黃病毒,可以確診。長沙病原檢測檢測
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