傳統(tǒng)病原微生物檢測(cè)方法概況:隨著醫(yī)學(xué)微生物學(xué)研究技術(shù)的不斷發(fā)展,病原學(xué)診斷已不再局限于病原體水平,深入到分子水平、基因水平的檢測(cè)手段不斷出現(xiàn)并被應(yīng)用于臨床和實(shí)驗(yàn)。核酸分子雜交技術(shù)、PCR技術(shù)、基因芯片技術(shù)、高通量測(cè)序技術(shù)等檢測(cè)方法,自動(dòng)化程度高,快速省時(shí)、無(wú)污染、結(jié)果精確,可以準(zhǔn)確靈敏地鑒定病原微生物。傳統(tǒng)的病原微生物的檢測(cè)方法有:直接涂片鏡檢、分離培養(yǎng)與生化反應(yīng)、組織細(xì)胞培養(yǎng)、血清學(xué)與免疫學(xué)檢測(cè)、血清學(xué)與免疫學(xué)檢測(cè)、基因檢測(cè)(核酸雜交技術(shù)、基因芯片技術(shù)、PCR技術(shù)、環(huán)介導(dǎo)恒溫核酸擴(kuò)增法等)。未知病原微生物鑒定要注意什么事項(xiàng)?深圳未知病原篩查排行
有些微生物是有益的,也有些微生物的存在可引起多種應(yīng)變性疾病和傳染性疾病,會(huì)對(duì)人身體健康產(chǎn)生不良的影響;還會(huì)使食品及原料腐爛和變質(zhì)。所以,微生物檢測(cè)必須嚴(yán)格把關(guān)。微生物檢測(cè)的必要性:1、食品:食品因含有微生物可依賴生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)成分,因此食品會(huì)受到微生物不同程度的污染。食品質(zhì)量安全關(guān)系到人民**的身體健康,生命安全及社會(huì)經(jīng)濟(jì)。為了食品的安全,人們的健康,微生物檢測(cè)極其必要。2、醫(yī)院:醫(yī)院都和微生物有著極為密切的關(guān)系。加強(qiáng)醫(yī)院的微生物檢驗(yàn)與監(jiān)測(cè),對(duì)于預(yù)防和控制醫(yī)院起著十分重要的作用。3、空氣:室內(nèi)空氣是微生物污染的重要傳播途徑。室內(nèi)舒適的溫度,濕度等環(huán)境條件以及相對(duì)密閉的室內(nèi)更為各種有害微生物滋生創(chuàng)造了條件。只有有效地檢測(cè)微生物的含量,才能采取有效地措施,才能保證人體健康不受微生物的危害。未知病毒檢測(cè)診斷未知病毒必須在活細(xì)胞內(nèi)寄生并復(fù)制的非細(xì)胞型微生物。
病原微生物檢測(cè)方法-多種PCR結(jié)合使用,基因芯片技術(shù)與多重PCR結(jié)合可以通過(guò)PCR對(duì)目的基因進(jìn)行放大,通過(guò)基因芯片的熒光探針增加檢測(cè)的靈敏性和特異性,使得兩種檢測(cè)技術(shù)的優(yōu)勢(shì)互補(bǔ),已應(yīng)用于病原微生物的檢測(cè)。將病原體特異性基因作為靶基因設(shè)計(jì)出引物與探針,進(jìn)行多重PCR擴(kuò)增,制備出寡核苷酸芯片,再對(duì)待測(cè)樣本靶基因進(jìn)行多重PCR擴(kuò)增,將擴(kuò)增產(chǎn)物與病原菌多重PCR基因芯片檢測(cè)體系雜交,可根據(jù)雜交信號(hào)直觀地判讀樣品中所含病原體的種類、型別、毒力、侵襲力,從而對(duì)病原體進(jìn)行檢測(cè)和鑒定。
基因芯片技術(shù)指的是通過(guò)微電子技術(shù)和微加工技術(shù),將海量的基因寡核苷酸進(jìn)行高密度且有序排列,使其排列在纖維膜和硅片等載體上,從而形成信息檢測(cè)芯片。采用基因芯片技術(shù)對(duì)檢測(cè)樣品DNA經(jīng)過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增后制備的探針點(diǎn)樣在基因芯片的表面,經(jīng)過(guò)熒光標(biāo)記的寡核苷酸點(diǎn)和芯片表面的探針進(jìn)行雜交,然后使用掃描儀對(duì)芯片上的熒光分布進(jìn)行分析,從而確定樣品微生物DNA中是否有某些特定的微生物?;蛐酒瑱z測(cè)技術(shù)還可在寡核苷酸的探針中添加相應(yīng)探針,借此在一定程度上擴(kuò)大檢測(cè)范圍,同時(shí)通過(guò)添加并調(diào)整探針使基因芯片檢測(cè)的準(zhǔn)確性得以提升。從理論上來(lái)說(shuō),利用基因芯片技術(shù)可在一次試驗(yàn)中有限檢測(cè)出全部潛在致病原,或者在一張基因芯片中檢出一種治病原的遺傳學(xué)指標(biāo),使基因芯片技術(shù)檢測(cè)的速度、靈敏度以及便捷性等得到提升,解決傳統(tǒng)操作的自動(dòng)化程度低、效率低以及操作復(fù)雜等問(wèn)題。每種病毒都有相應(yīng)的病毒試劑。
傳統(tǒng)的血清學(xué)與分子生物學(xué)方法如ELISA與PCR,由于病原微生物的特異性差異,有時(shí)只能用于病原微生物特定種甚至特定種特定株系分離物的檢測(cè);而電鏡與生物學(xué)接種鑒定方法又難以將病原微生物鑒定至物種水平。相比之下,高通量測(cè)序技術(shù)可以提供一條新的病原微生物鑒定途徑。病原微生物檢測(cè)的不可知性使得高通量測(cè)序成為研究這類病原微生物的有用工具。目前,該技術(shù)在人類與動(dòng)植物病原微生物的鑒定中已經(jīng)有較多的應(yīng)用。高通量測(cè)序在臨床virology領(lǐng)域的應(yīng)用病毒作為一種古老的物種存在于自然界,幾乎能夠在任何物種寄生,與人類健康息息相關(guān)。雖然大部分病毒沒(méi)有出現(xiàn)明顯的臨床癥狀,少數(shù)病毒能夠引起人類多種疾病,表現(xiàn)出包括發(fā)熱、腹瀉、出血、出疹、呼吸道癥狀、神經(jīng)系統(tǒng)癥狀等。每種病毒都有相應(yīng)的病毒試劑和測(cè)定方法。杭州RNA新病毒檢測(cè)診斷
一般來(lái)說(shuō),在一定的培養(yǎng)條件下,同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。深圳未知病原篩查排行
實(shí)現(xiàn)病原微生物種類鑒定有哪些技術(shù)手段?病原微生物的研究歷史不算長(zhǎng)。發(fā)展至今已經(jīng)有了成套的檢測(cè)體系。利用不同類別的微生物有其本身不同于其他微生物的特點(diǎn),如從培養(yǎng)形態(tài)、顯微鏡觀測(cè)形態(tài)、生物學(xué)功能、致病性、生物化學(xué)反應(yīng)、抗原抗體反應(yīng)、核酸序列等方面,都可以進(jìn)行相當(dāng)程度的鑒別。即便如此,依然有很多微生物通過(guò)傳統(tǒng)技術(shù)無(wú)法鑒別。高通量測(cè)序技術(shù)問(wèn)世,給微生物鑒別打開(kāi)一扇新的大門(mén)。它對(duì)核酸進(jìn)行測(cè)序是非特異的,因此,對(duì)一無(wú)所知的核酸也可以實(shí)現(xiàn)鑒別。深圳未知病原篩查排行
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