揚(yáng)州阿爾茲海默癥疾病動(dòng)物模型建模

    pirb在軸突生長(zhǎng)錐表達(dá)，位于富含肌動(dòng)蛋白的前緣和synapsin免疫陽(yáng)性的囊泡中，在神經(jīng)元突起的表達(dá)呈點(diǎn)狀分布。文獻(xiàn)表明，pirb表達(dá)隨年齡增加，特別是在老齡認(rèn)知損傷的小鼠海馬中，pirb能夠抑制軸突再生和突觸可塑性。研究表明小鼠aβ寡聚體對(duì)海馬長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)的破壞作用需要pirb的參與，在ad轉(zhuǎn)基因模型中，pirb不僅參與成年小鼠記憶缺失，而且介導(dǎo)幼年小鼠視皮層突觸可塑性的丟失。這些研究提示我們，pirb參與突觸可塑性，抑制pirb可能對(duì)ad起到***效應(yīng)。但是在cns，pirb的功能和下游抑制性信號(hào)通路仍然未被闡明，因此迫切需要pirb的細(xì)胞和動(dòng)物模型。目前對(duì)于pirb基因功能的研究，多采用可溶性的pirb的胞外段(pirbextracellularpeptide，pep)和抑制劑，或者采用慢病毒轉(zhuǎn)染。前者受到是否能夠透過(guò)血腦屏障和抑制劑效率的影響，后者慢病毒轉(zhuǎn)染在原代細(xì)胞和在體的轉(zhuǎn)染效率比較低，使研究pirb的功能受到極大的限制。為解決這些問(wèn)題，我們通過(guò)crispr/cas9技術(shù)建立了pirb基因敲入小鼠，將pirb基因敲入c57bl/6j的rosa26位點(diǎn)，為研究pirb在免疫系統(tǒng)或者神經(jīng)系統(tǒng)的作用和機(jī)制提供了很好的工具。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型。廣泛應(yīng)用于藥效評(píng)價(jià)、轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)等醫(yī)學(xué)前沿領(lǐng)域。揚(yáng)州阿爾茲海默癥疾病動(dòng)物模型建模

1、動(dòng)物模型名稱(chēng)：酒精誘導(dǎo)的肝硬化大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬：SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別：雄性4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡：5周5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重：150g-160g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境：SPF級(jí)。1、實(shí)驗(yàn)方法：用酒精誘導(dǎo)法。大鼠每天按10mL/kg體重灌服酒精混合物（酒精：吡唑：玉米油＝10mL：25mg：2mL）造模，每周2次按0.3mL/kg劑量腹腔注射給予CCl4:橄欖油＝1：3，連續(xù)灌服60天。解剖取肝臟進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)：肝組織可見(jiàn)肝硬化病理改變（S1級(jí)~S4級(jí)）。呼吸疾病動(dòng)物模型建模哪家好大量的遺傳變異可作為研究人類(lèi)疾病的借鑒。

    pirb-cki)pirb基因敲入的小鼠，pirb基因敲入到特異性組織或細(xì)胞中。其中pirb-cwt小鼠表達(dá)cre，但不含有l(wèi)oxp-pirb等位基因，pirb-chetandpirb-cki小鼠表達(dá)cre并分別含有一個(gè)或者兩個(gè)loxp-pirb等位基因。其中f3代雜交小鼠純合子/雜合子鑒定所用的pcr引物如下：f3:5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’r3:5’-atactccgaggcggatcacaa-3’f5:5’-gcatctgacttctggctaataaag-3’homozygotes:644bpheterozygotes:644bp/453bpwildtypeallele:453bp組織特異性的基因敲入也可以通過(guò)加入另一對(duì)引物，用pcr來(lái)驗(yàn)證：pcrforconstitutivekiallele:f6:5’-ggcaacgtgctggttattgtg-3’r6:5’-ggctgtactctgaggataggcttag-3’f7:5’-agatctgcaagctaattcctgc-3’withcki:1180bp/215bpconstitutivekiallele:303bp注意：如果dna的樣本不夠純，或者pcr的延伸時(shí)間不夠長(zhǎng)，可能擴(kuò)增不出來(lái)1180bp的產(chǎn)物。cre陽(yáng)性pcr鑒定所需的引物如下:forward:5’-gaacgcactgatttcgacca-3’reverse:5’-gctaaccagcgttttcgttc-3’creamplicon:204bp。序列表西安醫(yī)學(xué)院pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型及其構(gòu)建方法(artificialsequence)1ggcaggcttaaaggctaacctgg23223dna人工序列。

    來(lái)源：ZSCI基礎(chǔ)研究中如果加入動(dòng)物實(shí)驗(yàn)部分則使得研究更加趨于完善，投稿時(shí)中稿率也相應(yīng)會(huì)增加。但將動(dòng)物實(shí)驗(yàn)做好卻不是一件容易的事情。這篇文章主要講動(dòng)物模型的構(gòu)建技術(shù)，把骨科、糖尿病相關(guān)的動(dòng)物模型構(gòu)建做了一個(gè)***的技術(shù)匯總，建議先碼后讀，文章內(nèi)容有部分做了簡(jiǎn)化，想看詳細(xì)講解可以在文末獲取課件！一、骨科相關(guān)動(dòng)物模型1.骨關(guān)節(jié)炎1）骨關(guān)節(jié)炎模型構(gòu)建方法（誘發(fā)性）-關(guān)節(jié)腔內(nèi)手術(shù)法、關(guān)節(jié)腔注射法。2）模型評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)①SafraninO染色與OARSI評(píng)分（PMID：31046827、30942801）②HE染色與OARSI評(píng)分（PMID：30609097）③SafraninO染色與Mankin評(píng)分（PMID：30609097）2.骨質(zhì)疏松癥1）骨關(guān)節(jié)炎模型構(gòu)建方法去趨法模型PMID：31037128實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：小鼠方法：在戊巴比妥麻醉下進(jìn)行雙側(cè)卵巢切除術(shù)以誘導(dǎo)骨質(zhì)疏松癥，同時(shí)對(duì)照組小鼠*進(jìn)行卵巢外置但未切除。2）模型檢測(cè)指標(biāo)(PMID：31037128)①HE染色②Micro-CT③TRAcP染色④Micro-CT相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)3.類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）是一種慢性自身免疫性疾病狀態(tài)，其特征是滑膜增生，軟骨退化和脊椎關(guān)節(jié)的骨侵蝕4.強(qiáng)直性脊柱炎1）強(qiáng)直性脊柱炎模型構(gòu)建方法2）模型檢測(cè)指標(biāo)。疾病動(dòng)物模型建模好做嗎？

人乳腺*裸鼠模型：1、實(shí)驗(yàn)方法：**細(xì)胞移植法、**組織塊移植法。a.**細(xì)胞移植：**細(xì)胞在二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)至足夠數(shù)量。取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的**細(xì)胞，用0.25％胰酶消化，用不完全培養(yǎng)液配成濃度不低于1×107個(gè)/mL的細(xì)胞懸液，于小鼠乳腺脂肪墊注射0.2mL細(xì)胞懸液，注意每次注射前需混勻細(xì)胞懸液。b.**組織塊移植：**接種于動(dòng)物長(zhǎng)至1cm時(shí)，取新鮮的**組織塊，在不完全培養(yǎng)液中漂洗，切取生長(zhǎng)良好、魚(yú)肉裝的瘤組織，將其剪切成約1.5mm直徑的小**塊。將動(dòng)物接種部位消毒，剪一小口，將小**塊經(jīng)這一小口接種到小鼠乳腺脂肪墊，如切口較大需要縫合切口。哪里可以做動(dòng)物模型？金山區(qū)疾病動(dòng)物模型建模廠家

明確研究疾病的獨(dú)特資源確定小鼠疾病模型的初步選擇。揚(yáng)州阿爾茲海默癥疾病動(dòng)物模型建模

    PMID：15082495、7561688)①HE染色②關(guān)節(jié)側(cè)視圖③PCR鑒定、二、糖尿病相關(guān)動(dòng)物模型1.糖尿病***1）模型構(gòu)建（PMID：30826357）使用鏈佐星（STZ）注射ApoE-/-小鼠，建立糖尿病ApoE-/-小鼠模型，同時(shí)與ApoE-/-小鼠采用高脂喂養(yǎng)18周2）模型檢測(cè)指標(biāo)（PMID：29107826、28345659）3）生化指標(biāo)檢測(cè)4）超聲檢測(cè)5）主動(dòng)脈染色檢測(cè)2.糖尿病心肌病1）誘發(fā)性DCM模型模型構(gòu)建（PMID：29732743）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：大鼠方法：各大鼠一次性腹腔注射鏈脲佐菌素150mg·kg-1(STZ用mol·L-1，pH，現(xiàn)配現(xiàn)用)，并給予高脂飼料進(jìn)行喂養(yǎng)。①模型檢測(cè)指標(biāo)血糖檢測(cè)②HE染色③超聲心電圖2）自發(fā)性1型DCM模型3）自發(fā)性2型DCM模型3.糖尿病視網(wǎng)膜病變1）模型構(gòu)建PMID：30862093實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：小鼠方法：糖尿病雄性db/db（+/+Leprdb/J）小鼠。喂養(yǎng)至21周2）模型檢測(cè)指標(biāo)①膠質(zhì)原纖維酸性蛋白染色②TUNEL和HE染色DR組視網(wǎng)膜組織內(nèi)核層及外核層結(jié)構(gòu)松散，細(xì)胞排列紊亂GCL，神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層;INL，內(nèi)核層;ONL，外核層三、動(dòng)物模型構(gòu)建總結(jié)1.臨床資料合理性在納入臨床資料時(shí)，需關(guān)注特定疾病患者的流行病學(xué)趨勢(shì)，即疾病易發(fā)年齡，男女比例等，同時(shí)需考慮是否與體重、基因表達(dá)等具有相關(guān)性。2.模型合理性選擇合適，簡(jiǎn)便。揚(yáng)州阿爾茲海默癥疾病動(dòng)物模型建模

上海東寰生物科技有限公司是一家經(jīng)營(yíng)范圍為：從事生物科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開(kāi)發(fā)、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)咨詢(xún)、技術(shù)服務(wù)?；ぎa(chǎn)品（除危險(xiǎn)化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、煙花爆竹、民用物品、易制毒化學(xué)品）的銷(xiāo)售?！疽婪毥?jīng)批準(zhǔn)的項(xiàng)目，經(jīng)相關(guān)部門(mén)批準(zhǔn)后方可開(kāi)展經(jīng)營(yíng)活動(dòng)】。的公司，是一家集研發(fā)、設(shè)計(jì)、生產(chǎn)和銷(xiāo)售為一體的專(zhuān)業(yè)化公司。公司自創(chuàng)立以來(lái)，投身于原代細(xì)胞，細(xì)胞增殖與凋亡，細(xì)胞檢測(cè)試劑盒，動(dòng)物疾病模型，是商務(wù)服務(wù)的主力軍。上海東寰生物始終以本分踏實(shí)的精神和必勝的信念，影響并帶動(dòng)團(tuán)隊(duì)取得成功。上海東寰生物始終關(guān)注商務(wù)服務(wù)行業(yè)。滿足市場(chǎng)需求，提高產(chǎn)品價(jià)值，是我們前行的力量。