EdU檢測(cè)方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。EdU檢測(cè)染料只有BrdU抗體大小的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)即可有效檢測(cè),可有效避免樣品損傷,在細(xì)胞和組織水平能更準(zhǔn)確地反映細(xì)胞增殖等現(xiàn)象。EdU染色(a)通過用10:1去離子水稀釋10x反應(yīng)緩沖液進(jìn)行配制1xEdU反應(yīng)緩沖液;(b)按照溶解200mg緩沖添加劑溶于1ml去離子水的比例稱取適量的粉末進(jìn)行溶解,即為可用的緩沖添加劑的濃度,建議現(xiàn)用現(xiàn)配;注:緩沖添加劑為白色粉末,較難準(zhǔn)確稱量,稱量范圍可稍微放寬,但是不應(yīng)超過±20%,且該粉末較易氧化,使用后請(qǐng)旋緊管蓋,如試劑出現(xiàn)棕黃色,則需報(bào)廢或更換EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒運(yùn)用再哪些領(lǐng)域?湖北正規(guī)EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒
EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)和BrdU細(xì)胞增殖檢測(cè)的對(duì)比。小分子化合物AndyFluor?azide與EdU之間的點(diǎn)擊化學(xué)(ClickChemistry)反應(yīng)不需要DNA變性,就可以進(jìn)行高效快速的細(xì)胞增殖檢測(cè)分析,該反應(yīng)不受雙鏈DNA中堿基對(duì)的影響,因此客戶了BrdU摻入法的弊端。圖2.使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒對(duì)細(xì)胞和組織的染色效果。使用10μMEdU處理A549細(xì)胞2小時(shí),然后分別使用AndyFluor?488azide(綠色,上圖)、AndyFluor?594azide(紅色,中間圖)檢測(cè)細(xì)胞增殖活性,使用DAPI進(jìn)行復(fù)染(藍(lán)色)。腹腔注射EdU到小鼠體內(nèi)(每公斤小鼠注射5mgEdU),分別于0、12、24小時(shí)之后取小鼠腸組織,制成切片用AndyFluor?488azide(綠色,下圖)檢測(cè)細(xì)胞的增殖情況,使用DAPI進(jìn)行復(fù)染(藍(lán)色)。福建咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒廠家EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒哪家好?上海東寰告訴您!
以及酶或熒光偶聯(lián)二抗,檢測(cè)單細(xì)胞水平的DNA合成(BrdUbased)。前者通過免疫熒光檢測(cè),后者通過熒光顯微鏡檢測(cè)。優(yōu)點(diǎn)是:使用核酸酶變性DNA,在不傷害細(xì)胞完整性的情況下使抗體結(jié)合BrdU。體內(nèi)外均可進(jìn)行標(biāo)記,且可同時(shí)使用其他標(biāo)記進(jìn)行檢測(cè),操作安全簡(jiǎn)便。適用于貼壁或懸浮細(xì)胞,冰凍或福爾馬林包埋組織切片。EdU與BrdU檢測(cè)法不同,EdU-Click檢測(cè),如EdU-Click594(BCK-EDU594)無需進(jìn)行DNA變性來檢測(cè)摻入的EdU,而是通過一次快速、高度特異性的點(diǎn)擊反應(yīng),將EdU高效地?fù)饺氲叫潞铣傻腄NA之中,通過EdU與不同熒光染料的特異性反應(yīng)檢測(cè)DNA復(fù)制活性,從而確地反映細(xì)胞的增殖情況。這一類細(xì)胞增殖用熒光標(biāo)記采用溫和的點(diǎn)擊實(shí)驗(yàn)方案,準(zhǔn)確且兼容各種抗體實(shí)驗(yàn)方案,整個(gè)實(shí)驗(yàn)可在30分鐘內(nèi)完成,在結(jié)果的數(shù)據(jù)豐富程度方面,堪比多重分析方法。
EdU法中的點(diǎn)擊反應(yīng)原理圖。摻入到細(xì)胞DNA中的EdU與熒光探針或生物素等標(biāo)記的疊氮化物,在銅離子的催化下發(fā)生共價(jià)反應(yīng),形成穩(wěn)定的三唑環(huán),使細(xì)胞DNA標(biāo)記上熒光探針或生物素。細(xì)胞增殖檢測(cè)是評(píng)估細(xì)胞活性、遺傳毒性及抗藥物效果等的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)手段。細(xì)胞增殖檢測(cè)的方法按照原理通常可以分為五類:膜損傷檢測(cè)、代謝活性檢測(cè)、ATP水平測(cè)定、DNA合成檢測(cè)和細(xì)胞熒光標(biāo)記檢測(cè)法。目前公認(rèn)的精確的檢測(cè)細(xì)胞增殖的方法是直接檢測(cè)細(xì)胞中DNA的合成EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的作用是什么?上海東寰告訴您。
細(xì)胞增殖是生活細(xì)胞的重要生理功能之一,是生物體的重要生命特征。細(xì)胞的增殖是生物體生長(zhǎng)、發(fā)育、繁殖以及遺傳的基礎(chǔ)。方式:真核生物的分裂依據(jù)過程不同有三種方式,有有絲分裂,無絲分裂,減數(shù)分裂。其中有絲分裂是人、動(dòng)物、植物、等一切真核生物中的一種*為普遍的分裂方式,是真核細(xì)胞增殖的主要方式。減數(shù)分裂是生殖細(xì)胞形成時(shí)的一種特殊的有絲分裂。多細(xì)胞生物,以細(xì)胞分裂的方式產(chǎn)生新的細(xì)胞,用來補(bǔ)充體內(nèi)衰老或死亡的細(xì)胞EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的功能具體介紹。湖北品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒供應(yīng)商
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EdU細(xì)胞增殖方法簡(jiǎn)單,方便,無需DNA變性,能夠與各種抗體或熒光蛋白同時(shí)標(biāo)記,以檢測(cè)細(xì)胞其他性狀特征。為了與其他熒光共同使用,東寰生物提供多種染料供選擇,覆蓋常用檢測(cè)通道,方便您輕松選擇適合的染料,比較大限度地?cái)U(kuò)展第三方染色的適用范圍,比較大限度地滿足您的檢測(cè)儀器要求,完全解決您的實(shí)驗(yàn)難題。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性操作,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識(shí)別位點(diǎn),更適合結(jié)合其他染料或蛋白標(biāo)記(如P65抗體)等進(jìn)行多重標(biāo)記,從而在細(xì)胞水平獲取更多的直觀多維特征信息,更適合深入開展細(xì)胞功能方面的研究。湖北正規(guī)EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒