如何使用疾病動物模型建模評價

來源: 發(fā)布時間:2021-10-27

1、動物模型名稱:FSH聯(lián)合HCG致超排懷孕小鼠模型2、實驗動物種屬:KM小鼠或NIH小鼠3、實驗動物性別:雌性4、實驗動物年齡:3~4周齡5、實驗動物體重:16~18g6、實驗動物環(huán)境:SPF級 1、實驗方法:注射用重組人促卵泡***(FSH)聯(lián)合注射絨促性素(HCG)誘導。對雌鼠于按5IU/只腹腔注射50IU/mL的FSH溶液,注射46~48h后按5IU/只再腹腔注射50IU/mL的HCG溶液,并于注射HCG當天下午約16:00~17:00按雌雄鼠1:1合籠。次日早上檢查雌鼠陰栓情況。2、檢測標準:合籠后次日雌鼠檢查出現(xiàn)陰栓,表明成功構建了超排懷孕小鼠模型。人類疾病的動物模型是指各種醫(yī)學科學研究中建立的具有人類疾病模擬表現(xiàn)的動物。如何使用疾病動物模型建模評價

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    r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’步驟4、鑒定為pirb基因敲入的f0代雄性小鼠7周齡、雌性小鼠6周齡分別與野生型異性小鼠交配獲得f1代雜合子小鼠,圖2為本發(fā)明f1代雜合子小鼠pirb基因敲除小鼠的流程圖,小鼠出生后20天進行pcr鑒定,若有陽性小鼠出生,則表示轉基因已經(jīng)整合到生殖細胞。(1)通過pcr方法對獲得的f1代小鼠進行基因型的鑒定:(a)dna的提?。悍椒?:采用takaraminibestuniversalgenomicdnaextractionkit()來獲得高純度的基因組dna。步驟a.每只小鼠剪下一段尾巴(2~5mm),放入離心管中,加入180μlbuffergl,20μl蛋白激酶k和10μlrnasea。步驟b.將步驟a離心管內(nèi)于56℃孵育過夜。步驟c.過夜后12000rpm離心2min去除雜質(zhì)。步驟d.加入200μlbuffergb和200μl無水乙醇,充分混勻。步驟e.將吸附柱放在收集管上,將步驟d得到的樣品加到吸附柱里,12000rpm離心2min,棄掉收集管中液體。步驟f.棄去液體后在吸附柱中加入500μlbufferwa,12000rpm離心1min,棄掉收集管中液體。步驟g.在收集管中加入700μlbufferwb,12000rpm離心1min。棄掉收集管中液體。注意:bufferwb需要與100%乙醇預混,沿管壁加入bufferwb沖走殘余的鹽。步驟h.重復步驟g一次。松江區(qū)如何使用疾病動物模型建模大鼠疾病建模請找上海東寰。

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    空白組卵巢內(nèi)細胞形態(tài)完整,可見各級卵泡生長活躍,并大多數(shù)為原始卵泡,卵泡顆粒層較多,黃體發(fā)育好。4mg、6mg組(***、八天給藥)有炎性細胞浸潤,各級卵泡減少,閉鎖卵泡增加。2mg組(連續(xù)給藥7天)可見很少次各級卵泡,及成熟卵泡,大多數(shù)為閉鎖卵泡,卵泡顆粒層變薄,黃體明顯減少。結論:使用%氯化鈉溶液及10mg的醫(yī)用順鉑(齊魯制藥)配制成2mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg連續(xù)腹腔注射7天,造模效果比較好。根據(jù)實驗結果得出:本發(fā)明可對比不同劑量順鉑、不同給藥時間的卵巢早衰造模方法,從而有效的確定大鼠卵巢模型建立方案。給本領域技術人員提供上述實施例,以完全公開和描述如何實施和使用所主張的實施方案,而不是用于限制本文公開的范圍。對于本領域技術人員而言顯而易見的修飾將在所附權利要求的范圍內(nèi)。

1、動物模型名稱:環(huán)磷酰胺致白細胞減少癥小鼠模型2、實驗動物種屬:KM小鼠或NIH小鼠3、實驗動物性別:雄性4、實驗動物年齡:約4周齡5、實驗動物體重:18~22g6、實驗動物環(huán)境:SPF級,1、實驗方法:環(huán)磷酰胺誘導。小鼠按30mg/kg體重劑量腹腔注射環(huán)磷酰胺,連續(xù)注射5d。所有小鼠在注射前、注射第3、5日,以及停止注射第2、5、8、11、15日時分別**作外周血象檢測,觀察外周血白細胞總數(shù)。***1次檢測觀察后麻醉處死小鼠,取其股骨,用Hanks液沖洗骨髓細胞,顯微鏡下觀察骨髓有核細胞數(shù)。2、檢測標準:模型組小鼠的外周血白細胞總數(shù)明顯降低,鏡下觀察模型組小鼠的骨髓有核細胞數(shù)較正常對照組小鼠明顯降低。避免了在人身上進行實驗所帶來的風險。

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    具體實施方式下面結合附圖和具體實施方式對發(fā)明作進一步闡述。本發(fā)明構建了pirb基因敲入的小鼠動物模型,將pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的內(nèi)含子1內(nèi)。具體來說,構建一個cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒,將其克隆進入rosa26基因的內(nèi)含子1中。rosa26基因(ncbireferencesequence:)位于小鼠的七號染色體。本發(fā)明pirb基因敲入的小鼠動物模型的構建方法,具體按照以下步驟具體實施:步驟1、根據(jù)小鼠rosa26基因(genebank:))序列,利用cas-desigher軟件在1號內(nèi)含子設計grna靶序列,并搜索小鼠dbm-db基因組數(shù)據(jù)庫基因,采用crispr脫靶效應軟件cas-offinder檢測潛在的脫靶位點:**終選取兩個grna,grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如:seqid**:ggcaggcttaaaggctaacctgg將grna1和grna2分別與trancrrna在25℃孵育10min形成二級結構;步驟2、利用c57bl/6小鼠文庫bac克隆,通過pcr擴增獲得pirb基因cds的同源臂,采用in-fusion方法構建含有cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒的質(zhì)粒打靶載體,通過酶切、pcr及測序?qū)Υ虬匈|(zhì)粒載體進行驗證,圖1為構建好的pirb基因打靶載體的示意圖。確定研究疾病目的了解影響疾病發(fā)生的內(nèi)在與外在因素。奉賢區(qū)成瘤疾病動物模型建模

可根據(jù)要求提供構建成功的模型動物或相關組織材料。如何使用疾病動物模型建模評價

1、動物模型名稱:高脂飼料致高脂血癥大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雄性4、實驗動物年齡:成年5、實驗動物體重:180~220g1、實驗方法:大鼠給予高脂飼料喂養(yǎng)20天。分別于造模前和造模20天**,測定血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C的含量2、檢測標準:造模20天后模型組大鼠血清TC、TG、HDLC、LDLC均***增加,與對照組比較具統(tǒng)計學差異。1.提供動物模型構建過程中的原始實驗記錄及數(shù)據(jù)圖片。2.根據(jù)要求提供構建成功的模型動物或相關組織材料。如何使用疾病動物模型建模評價

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