淮安哪一家疾病動物模型建模

來源: 發(fā)布時間:2021-10-21

    實驗期間每天進(jìn)行陰道涂片,觀測動情周期變化。進(jìn)一步地,檢測***水平是指:檢測雌***(e2)、促卵泡生長素(fsh)和促黃體生成素(lh)的水平。進(jìn)一步地,檢測對比卵巢重量是指:比較各組大鼠雙側(cè)卵巢臟器系數(shù)。進(jìn)一步地,陰道涂片是指:采用陰道脫落細(xì)胞涂片法,使用染色劑為亞甲基藍(lán)。本發(fā)明利用順鉑成功地建立了大鼠卵巢早衰模型,為基礎(chǔ)研究建立穩(wěn)定的卵巢早衰動物模型奠定了良好的基礎(chǔ)。本發(fā)明使用的各種術(shù)語和短語具有本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的一般含義。提及的術(shù)語和短語如有與公知含義不一致的,以本發(fā)明所表述的含義為準(zhǔn)。附圖說明圖1:e2水平檢測結(jié)果示意圖。圖2:fsh水平檢測結(jié)果示意圖。圖3:lh水平檢測結(jié)果示意圖。圖4:大鼠體重檢測結(jié)果示意圖。圖5:大鼠卵巢重量統(tǒng)計示意圖。圖6:動情周期檢測(光鏡下10倍)示意圖,其中,a、b、c、d依次為:動情前期,動情期,動情后期,動情間期。圖7:he染色觀察不同方法造模對卵泡形態(tài)的影響(光鏡下10倍)示意圖,其中,a、b、c、d依次為:空白組,2mg組,4mg組,6mg組。具體實施方式下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。然而,本發(fā)明的范圍并不限于下述實施例。本領(lǐng)域的專業(yè)人員能夠理解,在不背離本發(fā)明的精神和范圍的前提下。開展小鼠疾病模型初步研究分析小鼠疾病模型研究初步結(jié)果與生物學(xué)信息資料等相關(guān)知識間的差距!淮安哪一家疾病動物模型建模

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1、動物模型名稱:橄欖油聯(lián)合酒精致肝硬化門脈高壓大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雄性4、實驗動物年齡:5周 5、實驗動物體重:150g-180g6、實驗動物環(huán)境:SPF級 1、實驗方法:橄欖油聯(lián)合酒精誘導(dǎo)。按0.3mL/100g體重,背頸部皮下注射50%CCl4的橄欖油溶液,***注射量加倍(6mL/kg體重),2次/周,皮下注射共13周;造模前4周為10%酒精溶液喂養(yǎng)代替飲水,4周后改為30%酒精溶液灌胃(30%酒精溶液灌胃1mL/100g體重,3次/周)。繼續(xù)正常飼養(yǎng)1個月。實驗結(jié)束測量門靜脈血流量(PBF)和腸系膜上動脈血流量(SMABF)。處死,取肝臟進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。2、檢測標(biāo)準(zhǔn):門靜脈及腸系膜上動脈血流量情況與正常對照組比較均增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義肝組織病理可見肝硬化病理改變。泰州裸鼠疾病動物模型建模便于研究者按實驗?zāi)康男枰S時采取各種樣品。

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    新華社上海4月9日電(記者張建松)利用先進(jìn)的基因編輯技術(shù),我國科學(xué)家在***神經(jīng)性疾病的基礎(chǔ)研究方面,取得重要進(jìn)展。***在小鼠模型上,成功恢復(fù)長久性視力損傷小鼠的視力,同時還基本消除了帕金森模型小鼠的疾病癥狀。在科技部、國家自然科學(xué)基金委、中國科學(xué)院、上海市的相關(guān)項目資助下,由中國科學(xué)院腦科學(xué)與智能技術(shù)***創(chuàng)新中心(神經(jīng)科學(xué)研究所)、上海腦科學(xué)與類腦研究中心、神經(jīng)科學(xué)國家重點實驗室楊輝研究組完成的這項研究,通過基因編輯技術(shù),成功誘導(dǎo)膠質(zhì)細(xì)胞“變身”為神經(jīng)元。這為阿爾茲海默癥、帕金森癥、青光眼等眾多神經(jīng)退行性疾病的***,探索了一個新的途徑。國際**學(xué)術(shù)期刊《細(xì)胞》8日在線發(fā)表了相關(guān)研究論文。人類的神經(jīng)系統(tǒng)包含成百上千種不同類型的神經(jīng)元。在成熟的神經(jīng)系統(tǒng)中,神經(jīng)元一般不會再生,一旦死亡,就是長久性的。而神經(jīng)元的死亡,則會導(dǎo)致不同的神經(jīng)退行性疾病。在常見的神經(jīng)性疾病中,視神經(jīng)節(jié)細(xì)胞死亡導(dǎo)致的長久性失明和多巴胺神經(jīng)元死亡導(dǎo)致的帕金森癥尤為特殊,它們都是由于特殊類型的神經(jīng)元死亡所導(dǎo)致的。如何在成體中讓視神經(jīng)節(jié)細(xì)胞和多巴胺神經(jīng)元獲得再生?研究人員對小鼠模型的膠質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行了基因編輯。

    即為本發(fā)明構(gòu)建的一種pirb基因敲入的小鼠動物模型。本發(fā)明所采用第二種技術(shù)方案的特點還在于,步驟1中得到grna1和grna2后分別與trancrrna在25℃孵育10min形成二級結(jié)構(gòu)。步驟3中g(shù)rna1、grna2的濃度均為2~10pmol/ul,cas9蛋白的注射濃度為30~100ng/μl。步驟4中southern雜交采用bamhi和avrii核酸內(nèi)切酶切割f1代雜合子小鼠的dna。本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明提供了pirb基因敲入的小鼠動物模型及其構(gòu)建方法,本發(fā)明的小鼠動物模型對于pirb基因功能的研究和在體驗證提供了良好的基礎(chǔ)。分離自pirb基因敲入小鼠的細(xì)胞還可以用于研究pirb發(fā)揮調(diào)節(jié)作用的下游機制。通過pirb敲入動物模型與不同類型cre小鼠的雜交,可以用于研究ad不同***或不同細(xì)胞類型pirb的調(diào)節(jié)作用。附圖說明圖1為本發(fā)明pirb基因敲入的小鼠插入pirb基因cds和loxp位點的打靶質(zhì)粒載體的構(gòu)建圖;圖2為本發(fā)明pirb基因敲入的小鼠模型的構(gòu)建方法的流程圖;圖3為本發(fā)明f1代pirb敲入的小鼠的基因型pcr結(jié)果鑒定電泳圖;圖4為本發(fā)明f1代pirb敲入的小鼠驗證pirb基因敲入效果的測序峰圖;圖5為本發(fā)明f1代pirb基因敲入的小鼠進(jìn)行southern鑒定的方法示意圖;圖6為本發(fā)明f1代pirb基因敲入的小鼠進(jìn)行southern鑒定的結(jié)果圖。這類動物疾病模型是指各種疾病共同性的一些病理變化過程的模型。

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誘發(fā)性**模型的原理是利用外源性致*因素引起細(xì)胞遺傳特性異常而呈現(xiàn)出異常生長和高增殖活性,形成**。致*因素主要有化學(xué)性、物理性及生物性致*物,而化學(xué)性致*物(chemicalcarcinogens)**常見,已確知的多達(dá)一千余種,用于誘發(fā)實驗性**的種類亦很多,如苯并薩,申基膽菌、聯(lián)苯胺、亞硝胺類、黃曲霉***類。各種致癢物的致*強度、致*譜等特性相差較大,同一種致*物經(jīng)不同途徑給藥所致**部位或類型可有很大差異。有些化學(xué)性致*物具有明顯的親***或組織特性。因此,實驗工作中應(yīng)根據(jù)需要選用適當(dāng)致*物和致*途徑,并確定其他影響因素或?qū)嶒灄l件?;驹?利用外源性致*物引起細(xì)胞遺傳特性改變,從而出現(xiàn)異常生長和高增殖活性細(xì)胞形成**。外源性致*物主要有化學(xué)性、物理性(如放射性物質(zhì))及生物性(如誘發(fā)動物**的病毒),其中以化學(xué)性致*物**為常用可以簡化實驗操作和樣品收集。崇明區(qū)心血管疾病疾病動物模型建模

大量的遺傳變異可作為研究人類疾病的借鑒。淮安哪一家疾病動物模型建模

    步驟i.將步驟h的吸附柱放入收集管,12000rpm離心2min。步驟j.吸附柱放到一個新的,在吸附柱膜**加入50~200μl滅菌水或者洗脫液,停留5min。(將無菌水或者洗脫液加熱到65℃能夠增加洗脫的得率)。步驟i.基因組dna定量,洗脫的基因組dna可以通過電泳鑒定。方法2:一種低成本基因組dna的粗提方法:步驟a.每只小鼠剪下一段尾巴(2-5mm),放入離心管中,加入100μl尾部消化緩沖液,注意不要剪尾太長;步驟b.將離心管及其內(nèi)容物于56℃孵育過夜;步驟c.過夜后將離心管于98℃孵育13min,使蛋白酶k失活;步驟d.在微型離心機以**大轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn)15min,上清直接用于pcr體系(每50μlpcr體系加入上清2μl)。尾消化緩沖液成分:50mmkcl10mmtris-hcl()%tritonx-100(b)長鏈pcr反應(yīng):長鏈引物:pcrprimers1(℃):擴增片段:5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):擴增片段:3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’pirb基因敲除型有上述兩條擴增片段,野生型等位基因沒有擴增產(chǎn)物?;窗材囊患壹膊游锬P徒?/p>

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