浙江EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒

細(xì)胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細(xì)胞固定液，室溫培養(yǎng)30分鐘，棄固定液；(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸，搖床孵育5分鐘，以中和過量的多聚甲醛；(c)棄甘氨酸溶液，每孔加入300ulPBS洗液，室溫清洗5分鐘；(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100細(xì)胞通透液，室溫通透10分鐘，棄細(xì)胞通透溶液；(e)每孔加入300ulPBS洗液，室溫清洗5分鐘；該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對貼壁細(xì)胞進行檢測，適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進行細(xì)胞涂片處理，固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進行檢測。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的特點是什么？上海東寰告訴您。浙江EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒

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EdU標(biāo)記(a)將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液，制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基；(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱，然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中，獲得lxEdU溶液，其中EdU的終濃度為10uM；注：1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基，因為這樣可能會影響細(xì)胞增殖的速度；2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配，用量以沒過細(xì)胞為宜；(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時，棄培養(yǎng)基；注：1)培養(yǎng)時間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長狀態(tài)；2)大多數(shù)**細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細(xì)胞兩次，毎次5分鐘，以除去未摻入DNA的EdU殘留。注：貼壁不牢的細(xì)胞可降低清洗強度

EdU是一種胸腺嘧啶核苷類似物，分子量很小，在動物體內(nèi)能夠迅速擴散到各種組織和中，并滲入正在復(fù)制的DNA分子，通過基于Apollo®熒光染料與EdU的特異性反應(yīng)即可簡單、快速、準(zhǔn)確地檢測出細(xì)胞增殖情況。與BrdU檢測方法相比，EdU檢測方法用量小得多，十分之一的用量即可獲得與BrdU檢測試劑盒相同甚至更好的檢測結(jié)果，而且小分子化學(xué)反應(yīng)檢測方法反應(yīng)快，效率高，反應(yīng)時間需幾分鐘，不需要DNA變性、蛋白酶處理、抗原抗體過夜孵育，能夠更好地保護細(xì)胞形態(tài)，更簡單、更靈敏、更快速、更準(zhǔn)確。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒應(yīng)用再哪些地方？

EdU細(xì)胞增殖分析試劑采用click化學(xué)技術(shù)，可為新合成的DNA檢測與定量提供比傳統(tǒng)BrdU方法更的替代物。當(dāng)在DNA合成過程中摻入修飾的核苷EdU（5-乙炔基-2-脫氧尿苷）時，可以通過快速的“click化學(xué)”反應(yīng)檢測到它，并且對細(xì)胞的破壞作用小。點擊化學(xué)相比于BrdU具有更簡便、更快速、更易操作的優(yōu)點。與使用溴脫氧尿苷(BrdU)檢測法不同，Click-iTEdU檢測法不是基于抗體，因此并不需要DNA變性以檢測摻入的核苷。此外，Click-iTEdU可以與R-PE、R-PEtandems和GFP等熒光蛋白復(fù)用提高效力。當(dāng)您平行比較這些方法時，Click-iTEdU和InvitrogenClick-iTPlusEdU在測定細(xì)胞增殖方面的優(yōu)勢是顯而易見的。上海EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的發(fā)展趨勢。天津哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒說明書

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