大鼠疾病動物模型建模說明書

    其中可以看出手術(shù)側(cè)后爪的縮足閾值較手術(shù)前及對側(cè)后爪有***降低，且標準誤區(qū)間非常小。圖4是表1的數(shù)據(jù)通過曲線圖的方式展現(xiàn)。結(jié)果顯示：大鼠在術(shù)后***天即出現(xiàn)手術(shù)側(cè)后爪敏感，施加輕微的重量(4g左右)都會引起縮足表現(xiàn)，這說明其痛閾明顯降低，對輕微的刺激均呈現(xiàn)抬腳，舔舐后足等痛覺過敏表現(xiàn)。這種表現(xiàn)維持至術(shù)后至少28天。而對側(cè)后爪在術(shù)前和術(shù)后縮足閾值變化不大，基本保持在20-25g。實施例3、模型的應用采用實施例1中描述的方法對兩組大鼠均進行了造模，l型棒的材料選擇的是h62黃銅或聚乳酸等不受磁場干擾、置入體內(nèi)不會對神經(jīng)造成化學刺激以及具有一定可塑性的材料。在造模后第七天應用重復經(jīng)顱磁刺激(rtms)***大鼠，其中一組接受了真的磁刺激，為磁刺激組；另一組接受了假的磁刺激，為假刺激組。結(jié)果顯示，磁刺激組的大鼠縮足閾值較假刺激組明顯提高，如圖5所示。這表明磁刺激緩解了神經(jīng)壓迫造成的疼痛，該模型可以用于磁刺激***的研究。以上詳細描述了本發(fā)明的較佳具體實施例。應當理解，本領(lǐng)域的普通技術(shù)無需創(chuàng)造性勞動就可以根據(jù)本發(fā)明的構(gòu)思作出諸多修改和變化。因此。小鼠是人類疾病理想的動物模型不僅因為小鼠在生理上與人類極為相似而且小鼠的遺傳資源非常豐富。大鼠疾病動物模型建模說明書

葡聚糖硫酸鈉（DSS）致潰瘍性結(jié)腸炎小鼠模型：1、動物模型名稱：葡聚糖硫酸鈉（DSS）致潰瘍性結(jié)腸炎小鼠模型2、實驗動物種屬：BALB/c小鼠3、實驗動物性別：雄性4、實驗動物年齡：成年鼠5、實驗動物體重：18g-22g6、實驗動物環(huán)境：SPF級 1、實驗方法：實驗前小鼠禁食不禁水24h，24小時后提起鼠尾將其懸空，使掙扎以排出大腸遠端的大便。小鼠自由飲用5%葡聚糖硫酸鈉（DSS）溶液，連續(xù)14天。進行疾病活動指數(shù)(DAI)的評估、取結(jié)腸進行組織病理學檢查。2、檢測標準：DAI評分明顯升高，與對照組比較具統(tǒng)計學意義。結(jié)腸病理鏡檢可見結(jié)腸炎癥、病變深度、隱窩破壞、潰瘍病變無錫泌尿疾病動物模型建模必須真正了解研究者感興趣且需要的小鼠疾病模型。

    步驟i.將步驟h的吸附柱放入收集管，12000rpm離心2min。步驟j.吸附柱放到一個新的，在吸附柱膜**加入50～200μl滅菌水或者洗脫液，停留5min。(將無菌水或者洗脫液加熱到65℃能夠增加洗脫的得率)。步驟i.基因組dna定量，洗脫的基因組dna可以通過電泳鑒定。方法2：一種低成本基因組dna的粗提方法：步驟a.每只小鼠剪下一段尾巴(2-5mm)，放入離心管中，加入100μl尾部消化緩沖液，注意不要剪尾太長；步驟b.將離心管及其內(nèi)容物于56℃孵育過夜；步驟c.過夜后將離心管于98℃孵育13min，使蛋白酶k失活；步驟d.在微型離心機以**大轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn)15min，上清直接用于pcr體系(每50μlpcr體系加入上清2μl)。尾消化緩沖液成分：50mmkcl10mmtris-hcl()％tritonx-100(b)長鏈pcr反應：長鏈引物：pcrprimers1(℃):擴增片段：5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):擴增片段：3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’pirb基因敲除型有上述兩條擴增片段，野生型等位基因沒有擴增產(chǎn)物。

    步驟3、pmsg處理c57bl/6雌性小鼠(6周齡，平均體重20g)，46h后注射hcg，與雄性小鼠合籠交配，次日取受精卵進行顯微注射，將步驟1的grna1、grna2、cas9蛋白以及線性化后的打靶載體一起注射到受精卵中，取注射后存活的受精卵移植到假孕母鼠體內(nèi)，產(chǎn)出小鼠，即f0代小鼠。上述步驟中g(shù)rna1、grna2的濃度均為2～10pmol/ul，cas9蛋白的注射濃度為30～100ng/μl，cas9蛋白購自newenglandbiolabs，貨號為m0386m。步驟4、提取f0代小鼠尾部dna，pcr擴增產(chǎn)物測序，鑒定是否為嵌合體。本發(fā)明用于f0代小鼠pirb基因pcr鑒定的特異性引物如下：pcrprimers1(℃):5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’。primers1對應的擴增產(chǎn)物大小為，primers2對應的擴增產(chǎn)物為。用于f0代小鼠測序的引物如下：sequencingprimerforpcrproduct1:5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer。開展小鼠疾病模型初步研究分析小鼠疾病模型研究初步結(jié)果與生物學信息資料等相關(guān)知識間的差距！

1、動物模型名稱：環(huán)磷酰胺致白細胞減少癥小鼠模型2、實驗動物種屬：KM小鼠或NIH小鼠3、實驗動物性別：雄性4、實驗動物年齡：約4周齡5、實驗動物體重：18~22g6、實驗動物環(huán)境：SPF級，1、實驗方法：環(huán)磷酰胺誘導。小鼠按30mg/kg體重劑量腹腔注射環(huán)磷酰胺，連續(xù)注射5d。所有小鼠在注射前、注射第3、5日，以及停止注射第2、5、8、11、15日時分別**作外周血象檢測，觀察外周血白細胞總數(shù)。***1次檢測觀察后麻醉處死小鼠，取其股骨，用Hanks液沖洗骨髓細胞，顯微鏡下觀察骨髓有核細胞數(shù)。2、檢測標準：模型組小鼠的外周血白細胞總數(shù)明顯降低，鏡下觀察模型組小鼠的骨髓有核細胞數(shù)較正常對照組小鼠明顯降低?？筛鶕?jù)要求提供構(gòu)建成功的模型動物或相關(guān)組織材料。南通品質(zhì)好的疾病動物模型建模

人類疾病的動物模型是指各種醫(yī)學科學研究中建立的具有人類疾病模擬表現(xiàn)的動物。大鼠疾病動物模型建模說明書

1、動物模型名稱：卵清蛋白聯(lián)合氫氧化鋁致支氣管***豚鼠模型2、實驗動物種屬：豚鼠3、實驗動物性別：雌雄不限4、實驗動物年齡：7~8周齡5、實驗動物體重：250~350g6、實驗動物環(huán)境：SPF級。1、實驗方法：卵清蛋白聯(lián)合氫氧化鋁誘導。每只豚鼠腹腔注射100μg卵清蛋白（OVA）+30mg氫氧化鋁（Al(OH)3）致敏。***次致敏后第5天再致敏1次，共2次。***一次致敏后第21d開始采用超聲霧化器噴霧10μgOVA/只，豚鼠置于一直徑約50cm的有蓋大圓盆中，給藥過程中對盆內(nèi)通O2。2、檢測標準：使用OVA噴霧激發(fā)后癥狀觀察，豚鼠出現(xiàn)不同程度的呼吸急促、咳嗽、抓癢、甚至抽搐等支氣管***癥狀，表明成功構(gòu)建了豚鼠***模型。大鼠疾病動物模型建模說明書

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