Elisa試劑盒是一種常用的生物化學(xué)檢測工具,用于檢測生物體內(nèi)的蛋白質(zhì)、抗體等分子。Elisa試劑盒的原理是利用酶標(biāo)記技術(shù),將待檢測分子與特定的抗體或配體結(jié)合,再通過酶標(biāo)記的信號轉(zhuǎn)化成可見的光學(xué)信號,從而實(shí)現(xiàn)對待檢測分子的定量或定性分析。Elisa試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、操作簡便、結(jié)果可靠等優(yōu)點(diǎn)。相對于傳統(tǒng)的生物化學(xué)檢測方法,Elisa試劑盒具有更高的靈敏度和特異性,可以檢測到更低濃度的待檢測分子,并且可以排除其他干擾物質(zhì)的影響。此外,Elisa試劑盒的操作簡便,不需要復(fù)雜的儀器設(shè)備和專業(yè)的技術(shù)人員,可以在實(shí)驗(yàn)室和臨床現(xiàn)場進(jìn)行快速檢測。Elisa 試劑盒可檢測生物樣本中的多肽。麗水激肽釋放酶10(KLK10)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測定方法達(dá)到很高的敏感度。ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。鎮(zhèn)江L選擇素(SELL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Elisa試劑盒是一種常用的生物學(xué)實(shí)驗(yàn)工具,用于檢測特定蛋白質(zhì)或抗體的存在。
試劑盒用于盛放檢測化學(xué)成分、藥物殘留、病毒種類等化學(xué)試劑的盒子。一般醫(yī)院、制藥企業(yè)使用。完整的ELISA試劑盒包含以下各組分:(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);(2)酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物);(3)酶的底物;(4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測定中);(5)結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液;(6)洗滌液,在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;(7)酶反應(yīng)終止液,常用的HRP反應(yīng)終止液為硫酸,其濃度按加量及比色液的更終體積而異,在板式ELISA中一般采用3mol/L。
elisa試劑盒的影響,elisa試劑盒診斷試劑經(jīng)歷了從合成肽向基因工程抗原的過渡。由于一些歷史的原因,人們往往以反應(yīng)本底的好壞來衡量elisa試劑盒反應(yīng)試劑盒,因此有些廠家為了保持較好的本底采用了單片段基因工程抗原及合成肽包被,該類試劑盒的流行病學(xué)敏感度不夠,穩(wěn)定性也成問題。也有廠家堅(jiān)持試劑盒高的流行病學(xué)敏感度,科學(xué)地對待反應(yīng)結(jié)果?;蚬こ炭乖^合成肽抗原有無可比擬的優(yōu)越性,就HCV-elisa試劑盒試劑盒來講,專門代產(chǎn)品為合成肽抗原,主要是HCV特異性抗原決定簇的肽片段;第二代產(chǎn)品包被的抗原既有基因工程抗原又有合成肽,只是當(dāng)時的基因工程抗原不全,單包括了HCV的中間區(qū)片段;第三代產(chǎn)品基本上采用了基因工程抗原,而且這些抗原包括更多、更穩(wěn)定、純度更高的HCV特異性抗原。Elisa試劑盒的檢測結(jié)果需要進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理和解讀。
注意事項(xiàng)1.正式試驗(yàn)時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。2.在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:(1)固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。Elisa試劑盒的使用可以提高實(shí)驗(yàn)效率,節(jié)省時間和成本。昆山白介素20(IL20)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Elisa 試劑盒可檢測特定蛋白標(biāo)志物。麗水激肽釋放酶10(KLK10)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
小鼠蛋白激酶操作步驟:1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。6.每個孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。麗水激肽釋放酶10(KLK10)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)