江蘇動物檢疫PCR檢測方法

來源: 發(fā)布時間:2023-08-21

PCR(PolymeraseChainReaction)是一種復制核酸片段并提高DNA產(chǎn)量的技術,即所謂的聚合酶鏈式反應,這種技術可以在數(shù)小時內(nèi)大量復制特定的基因片段。由于其高敏感性和高特異性的特點,PCR技術被應用在寵物疾病分子的診斷上,將從疑似患病寵物(血液、眼鼻分泌物、糞便,尿液或腹水)中采樣的極微量病原(細菌、病毒或寄生蟲)特定核酸片段樣本,透過PCR的方式大量被復制,再以核酸電泳的方式判讀結果,從而獲得早期、快速、穩(wěn)定和準確的診斷結果.微流控PCR技術是一種通過將PCR反應微型化來實現(xiàn)PCR反應的高通量、低成本和快速的方法。江蘇動物檢疫PCR檢測方法

江蘇動物檢疫PCR檢測方法,PCR

巧亦捷全自動薄膜微流控核酸檢測儀器擁有多種重技術,保障結果準確:其采用Taqman熒光探針和經(jīng)典PCR擴增技術,能夠?qū)⑸飿酥疚锞_定量,同時輸出Ct值和擴增曲線,結果判讀簡潔明了;質(zhì)控更全1面,結果更可靠,設備體積小巧,便于搬運和攜帶,可在多種場景下隨心使用,且薄膜微流控芯片為封閉系統(tǒng)操作,可很大程度避免人為和環(huán)境的污染,降低對檢測環(huán)境的要求,以及對檢測人員的要求。更適合寵物醫(yī)院、獸醫(yī)站、養(yǎng)殖場等多種使用場景。動物PCR擴增巧亦捷全自動核酸檢測一體已實現(xiàn)覆蓋貓、犬腸道類、呼吸道類、血液類、人畜共患類等多種病原體的診斷。

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PCR的工作原理:在TaqDNA聚合酶(熱穩(wěn)定DNA聚合酶)的作用下,由一對特異性引物經(jīng)熱變性-退火-延伸反應,三個不同溫度的循環(huán)處理使得DNA由少量擴增到多量的一種體外DNA擴增技術。在反應體系內(nèi),以一對人工合成的寡核苷酸作為擴增引物,第一步,模板DNA變性,以構成脫氧核糖核酸的四種脫氧核苷酸為底物,目的基因作為模板,在DNA聚合酶的作用下模板DNA經(jīng)過80-90℃高溫變性,使模板DNA雙鏈經(jīng)PCR擴增形成的雙鏈解離成單鏈。第二步,模板DNA與引物退火(復性),模板DNA解離成單鏈后溫度降至50-60℃,引物與模板DNA單鏈互補配對。第三步,引物的延伸,DNA模板-引物結合物在DNA聚合酶作用下,70-75℃以dNTP為反應原料半保留復制合成一條新的模板DNA鏈。這三個步驟為一個循環(huán),2-4分鐘即可完成一個循環(huán),2-3小時就能使極微量的DNA、片段、甚至單拷貝基因復制到幾百萬倍,從而實現(xiàn)對靶DNA的放大。由于擴增堿基序列按照靶DNA復制,因此PCR反應具有高度特異性。

當犬貓的一些疾病處于潛伏期時,該階段動物體內(nèi)的病原體含量過低。而目前市場上的一些檢測工具主要檢測寵物體內(nèi)是否產(chǎn)生對抗某種病原的抗體,雖然快速,但在初期傳染時,寵物免疫系統(tǒng)尚未產(chǎn)生抗體,所以檢測出現(xiàn)偽陰性,進而延誤診療。巧亦捷薄膜微流控快速核酸一體機則可以很好的解決這一問題,即便處于疾病潛伏期,巧亦捷核酸一體機也可以得到準確的檢測結果,做到早期診斷,實現(xiàn)及時診療,減少患病動物痛苦,獲得更好的療效。預后評估,監(jiān)控診療效果。傳染性疾病在寵物中比較常見,由多種病原體如寄生蟲,細菌,病毒等引起,且多具有傳染性,死亡率也較高。

江蘇動物檢疫PCR檢測方法,PCR

使用平常的抗原試紙做動物診斷常會出現(xiàn)誤診的情況,如用抗原試紙條對剛買的小狗帶到做檢測,犬瘟試紙條檢測是陰性,但回家養(yǎng)幾天后小狗開始出現(xiàn)打噴嚏、咳嗽等癥狀,此時再去做檢查,犬瘟檢測則變成陽性,這種情況在寵物臨床上并不少見。很有可能這只小狗在第、一次檢查的時候已經(jīng)傳染并且向外排毒了,但是由于抗原滴度低排毒量比較小,試紙條檢測不出來,錯失了及早診療的機會。另一方面,抗體檢測試紙并不能及時準確知道機體是否傳染這個病原,就比如現(xiàn)在常見的貓咪弓形蟲檢測,只有貓咪接觸病原一段時間后,才能產(chǎn)生足量的抗體,抗體試紙才出現(xiàn)陽性結果。當這些情況發(fā)生,結果都是令人很難過的。因為這不僅*意味著后期要花更多的Money用于診療,還會出現(xiàn)診療困難,毛孩子們受罪,甚至會出現(xiàn)我們都不愿意接受的死亡。所以我們更建議使用PCR技術進行臨床診斷。巧亦捷核酸檢測一體機可以為寵物PCR檢測提供嚴謹?shù)臏蚀_結果,為檢測人員提供信心保證。江蘇PCR擴增

傳統(tǒng)的免疫學檢測(如:熒光和膠體金)存在靈敏性和特異性的局限性。江蘇動物檢疫PCR檢測方法

巧亦捷推出的全自動薄膜微流控快速核酸檢測一體機采用PCR熒光探針技術、通過大量臨床病例驗證,準確率高達99%,可以針對犬貓等寵物、畜禽動物、水產(chǎn)養(yǎng)殖動物等常見的傳染病進行快速、準確的核酸檢測,具有檢測速度快、靈敏度高、特異性強的特點,可以在動物患病早期未表現(xiàn)出明顯癥狀時及時進行準確判斷,有效杜絕漏檢、誤診的風險,幫助獸醫(yī)師們對動物疾病診斷實現(xiàn)早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早診療、早康復,以減輕它們的痛苦,盡早恢復健康。江蘇動物檢疫PCR檢測方法

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