Micro Drop蛋白質(zhì)檢測功能:
Protein Lowry檢測方式:
Lowry法是蛋白與硫酸銅在堿性環(huán)境下反應(yīng)形成銅-蛋白復(fù)合物。Folin-Ciocalteu試劑可以有效的還原銅復(fù)合物,產(chǎn)生與蛋白量成比例的藍(lán)色產(chǎn)物。檢測該藍(lán)色產(chǎn)物在650nm處的吸光值,并在405nm處做基線校正,計算得出蛋白的濃度。試驗中使用的試劑可以從多個廠家購買。與其他比色法一樣,Lowry法進行蛋白定量檢測前也需要構(gòu)建一個標(biāo)準(zhǔn)曲線。
推薦使用20μl的蛋白樣品和100μl Lowry試劑來做反應(yīng)。在Micro Drop上可以檢測的樣品濃度范圍為0.20mg/ml到4mg/ml。
按照試劑盒生產(chǎn)廠家的說明來準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品和和構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。確保在所有檢測過程中,每個樣品的處理時間及環(huán)境溫度一致??梢詮脑噭┖猩a(chǎn)廠家購買用于構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線的蛋白標(biāo)準(zhǔn)品(BSA)。
分光光度計是利用分光光度法對物質(zhì)進行定量定性分析的儀器,常用于核酸,蛋白定量以及細(xì)菌生長濃度的定量。貴州高重復(fù)性超微量分光光度計核酸檢測
Micro Drop可以檢測45-48mm的10mm光程的比色皿。當(dāng)使用微量,半微量或者超微量的比色皿時,我們建議使用周邊不透明的比色皿,不透明的比色皿保證了光穿過樣本后全部到達(dá)檢測器。而透明的比色皿會讓那些沒有透過樣本的光也到達(dá)檢測器,這樣會導(dǎo)致樣品(特別是低濃度樣品)的檢測不準(zhǔn)確。
當(dāng)檢測的波長為紫外區(qū)域時(<340nm),要使用石英比色皿,這樣才能透過紫外光。雖然有一些制造商提供紫外透過的一次性塑料比色皿,但是即使質(zhì)量比較好的塑料比色皿也不能讓低于220nm以下波長的紫外光透過,而大部分玻璃和塑料比色皿是完全紫外非透過性的。
一般單光束的分光光度計都會推薦相配的比色皿,而許多比色皿生產(chǎn)廠家都有嚴(yán)格的質(zhì)控來保證比色皿的性能而不用在換比色皿時需要校準(zhǔn),這些比色皿都可以用在本產(chǎn)品上。
上海高重復(fù)性超微量分光光度計紫外檢測測試只在可見光區(qū)有吸收的樣品時使用玻璃比色皿。
A260:是核酸比較高吸收峰的吸收波長,比較好測量值的范圍為0.1至1.0。如果不在此范圍,稀釋或濃縮樣品,使之在此范圍內(nèi);如果吸光度小于0.05,檢查是否存 在操作因素(如移液不準(zhǔn)確,樣品內(nèi)有懸浮物等)影響。DNA樣品的A260 吸光度值是否>0.1。(請注意,這個值跟儀器無關(guān),核酸的吸光度必需大于0.1,其值才有效和可靠,因為樣品中的雜質(zhì)和顆粒這些不純物的干擾通常 會對光有一定吸收,其值<0.1);
A280:是蛋白比較高吸收峰的吸收波長.
A230:是碳水化合物比較高吸收峰的吸收波長:
A260/A280:是核酸純度的指示值。純度好的DNA或RNA,在pH7-8.5 下A260 / A280的比值應(yīng)該在2.0 或2.5。 純凈的樣品比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8 或者2.0,表示存在蛋白質(zhì)或者酚類物質(zhì)的影響。
A260/A230:純DNA和 RNA的A260/A230比值為2.5。若比值小于2.0標(biāo)明樣品被碳水化合物(糖類)、鹽類或有機溶劑污染,需要純化樣品。
Micro Drop紫外可見檢測功能:
1. 在功能鍵中選擇紫外-可見。
2. 輸入樣品編號。
3. 增加需要檢測的波長值。
4. 可以選擇基線校正,默認(rèn)的校準(zhǔn)波長為750nm,也可以重新輸入一個校準(zhǔn)波長。
5. 選擇疊加顯示可以在采樣曲線框中顯示多個檢測樣品的實驗結(jié)果。
6. 用干凈的無塵紙擦干凈上下基座,使用合適的液體建立空白對照,空白對照液體能夠溶解目標(biāo)溶液???/span>
白對照液體的pH值和離子濃度應(yīng)和檢測樣品一樣。
基座模式:取1-2μl空白溶液加到基座上,放下檢測臂并點擊空白檢測。
比色皿模式:插入比色皿時注意儀器上箭頭指示方向。光束(2mm寬)位置在比色皿底部以上8.5mm的位置,請按照比色皿生產(chǎn)廠家的建議加入液體。
7. 按做空白檢測一樣加入樣品,點擊檢測按鈕開始檢測。
消光系數(shù)是被測溶液對光的吸收大小值。
分光光度計就是利用分光光度法對物質(zhì)進行定量定性分析的儀器。
分光光度計的結(jié)構(gòu):
各種型號的分光光度計基本結(jié)構(gòu)都相同,由如下五種部分組成:
1)光源(鎢燈、鹵鎢燈,氫弧燈,氘燈、氙燈或激光光源);
2)單色器(濾光片、棱鏡、光柵、全息柵);
3)樣品吸收池;
4)檢測系統(tǒng)(光電池、光電管、光電倍增管);
5)信號指示系統(tǒng)(檢流計、微安表、數(shù)字電壓表、示波器、微處理機顯像管)。
光源-單色器-樣品吸收池-檢測系統(tǒng)-信號指示系統(tǒng)。
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Micro Drop超微量采用新一代的2048線性CCD檢測單元,擁有更高的靈敏度和精確度。貴州高重復(fù)性超微量分光光度計核酸檢測
Micro Drop可以檢測45-48mm的10mm光程的比色皿。貴州高重復(fù)性超微量分光光度計核酸檢測
超微量分光光度計不僅涵蓋了可見光分光光度計的功能而且也可以進行紫外分光光度計的應(yīng)用:
(二)UV-VIS常規(guī)可見-紫外檢測:
全波長超微量分光光度計可以像普通的紫外-可見分光光度計一樣行使功能。如BIO-DL MicroDrop可以顯示從185到910nm的光波下樣品的吸光值。**多可以同時指定檢測40個波長下的吸光值并把數(shù)據(jù)顯示在報告中。
(三)蛋白質(zhì)的直接定量(UV法):
這種方法是在280nm波長,直接測試蛋白。蛋白質(zhì)測定過程非常簡單,先測試空白液,然后直接測試蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)直接定量方法,適合測試較純凈、成分相對單一的蛋白質(zhì)。紫外直接定量法相對于比色法來說,速度快,操作簡單;但是容易受到平行物質(zhì)的干擾,如DNA的干擾;另外敏感度低,要求蛋白的濃度較高。
貴州高重復(fù)性超微量分光光度計核酸檢測
上海寶予德科學(xué)儀器有限公司主要經(jīng)營范圍是醫(yī)藥健康,擁有一支專業(yè)技術(shù)團隊和良好的市場口碑。公司業(yè)務(wù)涵蓋移液器,吸頭,酶標(biāo)儀,分光光度計等,價格合理,品質(zhì)有保證。公司將不斷增強企業(yè)重點競爭力,努力學(xué)習(xí)行業(yè)知識,遵守行業(yè)規(guī)范,植根于醫(yī)藥健康行業(yè)的發(fā)展。寶予德憑借創(chuàng)新的產(chǎn)品、專業(yè)的服務(wù)、眾多的成功案例積累起來的聲譽和口碑,讓企業(yè)發(fā)展再上新高。