調(diào)整pH值到6。分裝,滅菌,備用。該培養(yǎng)基用于培養(yǎng)和保存靈芝、平菇、香菇等食用菌菌種。***的培養(yǎng)基在植物組織培養(yǎng)時(shí),通過(guò)調(diào)節(jié)IAA和CTK的比值能影響愈傷組織分化出根或芽。CTK/IAA高時(shí),愈傷組織分化芽。CTK/IAA低時(shí),分化根;CTK/IAA比例適中維持愈傷組織不分化。愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基制備以MS培養(yǎng)基母液為基礎(chǔ),向潔凈鋁鍋中順序加入大量元素20×母液100mL,微量元素100×母液20mL,鐵鹽100×母液20mL,維生素100×母液20mL,肌醇200×母液10mL,甘氨酸200×母液10mL,配制得MS培養(yǎng)基后,再加入·L-1的BA8mL,·L-1的NAA8mL。然后加入實(shí)際配制培養(yǎng)基體積約2/3-3/4的蒸餾水,加入40g蔗糖后攪拌使其溶化,用·L-1的NaOH和mol·L-1的HCl調(diào)整pH值至。加入14g瓊脂,將鋁鍋置于電爐上,攪拌加熱使瓊脂完全溶化,然后用蒸餾水定容至終體積2L,繼續(xù)加熱幾分鐘使之混合均勻后分裝于三角瓶中。******葉片愈傷組織誘導(dǎo)取一無(wú)菌培養(yǎng)皿,用解剖刀切取1-2片無(wú)菌苗葉片置于無(wú)菌培養(yǎng)皿中,并用解剖刀將葉片切成2mm2左右的小片,然后將其接種于準(zhǔn)備好的培養(yǎng)基上,每瓶接種5小片,一共接種6瓶。接種后的三角平置于24條件下黑暗培養(yǎng)1周。取材過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照操作規(guī)程執(zhí)行,制備出的血清要經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量鑒定。上?,F(xiàn)代臨床微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基銷售價(jià)格
培養(yǎng)基化學(xué)分類編輯語(yǔ)音培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基是指一類利用動(dòng)物、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基。例如。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基和LB培養(yǎng)基等。常用的天然有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麩皮、牛奶、血清、椰子汁等。天然培養(yǎng)基成本較低,除在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常使用外,也適于用來(lái)進(jìn)行工業(yè)上大規(guī)模的微生物發(fā)酵生產(chǎn)。固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基組合培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分,用化學(xué)物質(zhì)模擬合成、人工設(shè)計(jì)而配制的培養(yǎng)基。例如,高氏1號(hào)培養(yǎng)基和查氏培養(yǎng)基等。合成培養(yǎng)基有一定的配方,配制合成培養(yǎng)基時(shí)重復(fù)性強(qiáng),但與天然培養(yǎng)基相比其成本較高,微生物在其中生長(zhǎng)速度較慢,一般適于在實(shí)驗(yàn)室用來(lái)進(jìn)行有關(guān)微生物營(yíng)養(yǎng)需求、代謝、分類鑒定、生物量測(cè)定、菌種選育及遺傳分析等方面的研究工作。[2]培養(yǎng)基半組合培養(yǎng)基指一類主要以化學(xué)試劑配制,同時(shí)還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基。例如,馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基。培養(yǎng)基物理分類編輯語(yǔ)音培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基。培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基一類配制成的固體狀態(tài)的基質(zhì)。根據(jù)性質(zhì)又分為固化培養(yǎng)基、非可逆性固化培養(yǎng)基、天然固態(tài)培養(yǎng)基、濾膜。楊浦區(qū)推廣臨床微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基以客為尊WHO公布的《用動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)生產(chǎn)生物制品規(guī)程》中的要求。
二、培養(yǎng)基培養(yǎng)基有天然、人工兩種。一般實(shí)驗(yàn)室使用的是RPMI-1640粉末培養(yǎng)基,以雙蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HCl)調(diào)pH至,若pH值超過(guò),則大多數(shù)細(xì)胞不能生長(zhǎng)。RPMI-1640不耐高壓滅菌,使用前需經(jīng)滅菌μm孔徑濾膜濾過(guò)處理。三、血清培養(yǎng)中常使用小牛血清(或胎牛血清)。血清亦不能高壓滅菌,無(wú)菌的小牛血清需在56℃水浴30分鐘滅活補(bǔ)體,置4℃冰箱存放待用。配制時(shí)含量視培養(yǎng)細(xì)胞種類、時(shí)間而定,一般用10—15%。由于血清成分復(fù)雜、條件不易控制,可選用無(wú)血清培養(yǎng)基。四、***素為防止培養(yǎng)時(shí)期細(xì)菌的污染,可在培養(yǎng)基中添加適當(dāng)***素,一般用量與組織細(xì)胞培養(yǎng)相同:卡那霉素100單位/毫升,或雙抗--青霉素100單位/毫升,鏈霉素100微克/毫升。五、植物血凝素(PHA)非增殖期的細(xì)胞不能制備染色體,如人外周血淋巴細(xì)胞,但在離體培養(yǎng)過(guò)程中,在PHA的作用下,可被刺激轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞而進(jìn)入有絲分裂。經(jīng)實(shí)驗(yàn)測(cè)定其分裂高峰分別于培養(yǎng)后44-48小時(shí)和68-72小時(shí)。PHA有粘多糖,蛋白質(zhì)兩種重要成分。粘多糖促使有絲分裂,蛋白質(zhì)起凝集作用。PHA***的細(xì)胞數(shù)隨其濃度而增加,直至全部免疫活性細(xì)胞均被***為止,但PHA濃度過(guò)高會(huì)引起凝集,一般采用4%濃度為好。
且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、***、無(wú)機(jī)物等,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或***生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。血清主要作用1.提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等,是細(xì)胞生長(zhǎng)必須的物質(zhì)。2.提供***和各種生長(zhǎng)因子:胰島素、腎上腺皮質(zhì)***(氫化可的松、**)、類固醇***(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長(zhǎng)因子如成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子、血小板生長(zhǎng)因子等。3.提供結(jié)合蛋白:結(jié)合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質(zhì),如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及***等,轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵。結(jié)合蛋白在細(xì)胞代謝過(guò)程中起重要作用。4.提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷。5.對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用:有一些細(xì)胞,如內(nèi)皮細(xì)胞、骨髓樣細(xì)胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的,則有目的的使用血清來(lái)終止胰蛋白酶的消化作用。因?yàn)橐鹊鞍酌敢呀?jīng)被***用于貼壁細(xì)胞的消化傳代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷,特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時(shí),粘度起到重要作用。血清的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)血清質(zhì)量高低取決于兩方面因素:一是取材對(duì)象,二是取材過(guò)程。
應(yīng)重新制備。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分完全溶化。迄至煮沸。如為瓊脂培養(yǎng)基,應(yīng)先用一部分水將瓊脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過(guò)程中,因蒸發(fā)而丟失的水分,**后必須加以補(bǔ)足。培養(yǎng)基pH的初步調(diào)整培養(yǎng)基各成分完全溶解后,應(yīng)進(jìn)行pH的初步調(diào)正,因培養(yǎng)基在加熱消毒過(guò)程中、pH會(huì)有所變化,例如,牛肉浸液約可降低。而腸浸液pH卻會(huì)有***的升高。因此,對(duì)這個(gè)步驟,操作者應(yīng)隨時(shí)注意探索經(jīng)驗(yàn)、以期能掌握培養(yǎng)基的**終pH,保證培養(yǎng)基的質(zhì)量。pH調(diào)正后,還應(yīng)將培養(yǎng)基煮沸數(shù)分鐘,以利培養(yǎng)基沉淀物的析出。培養(yǎng)基注意事項(xiàng)編輯語(yǔ)音培養(yǎng)基在使用前通過(guò)高壓或過(guò)濾滅菌。防止污染應(yīng)該注意以下事項(xiàng):確認(rèn)工作細(xì)胞庫(kù)是否被污染,確認(rèn)毒種工作種子批是否被污染,確認(rèn)所用培養(yǎng)基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染,均可用細(xì)菌、***及支原體無(wú)菌試驗(yàn)來(lái)確認(rèn)并排除。同時(shí)要對(duì)無(wú)菌試驗(yàn)培養(yǎng)基的靈敏度進(jìn)行驗(yàn)證。實(shí)際生產(chǎn)中,可以從配制好的培養(yǎng)液中取少量加入營(yíng)養(yǎng)瓊脂于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),48小時(shí)即可觀察有無(wú)污染。其它:高壓滅菌設(shè)備、過(guò)濾除菌設(shè)備均應(yīng)進(jìn)行驗(yàn)證,確保滅菌和除菌效果。一般實(shí)驗(yàn)室里以玻璃蒸餾器制備的雙蒸水或三蒸水可以符合使用條件。青浦區(qū)是什么臨床微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基創(chuàng)新服務(wù)
無(wú)細(xì)菌、霉菌、支原體和病毒的污染,有些國(guó)家要求無(wú)細(xì)菌噬菌體污染。上?,F(xiàn)代臨床微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基銷售價(jià)格
用于培養(yǎng)霉菌的加入蔗糖,用于培養(yǎng)酵母菌的加入葡萄糖),補(bǔ)足水分,分裝,滅菌,備用。把這培養(yǎng)基的pH值調(diào)到,配方中的糖,如用葡萄糖還可用來(lái)培養(yǎng)放線菌和芽孢桿菌。豆芽汁培養(yǎng)基黃豆芽100g,瓊脂15g,葡萄糖20g,水1000ml洗凈黃豆芽,加水煮沸30分鐘。用紗布過(guò)濾,濾液中加入瓊脂,加熱溶解后放入糖,攪拌使它溶解,補(bǔ)足水分到1000ml,分裝,滅菌,備用。把這培養(yǎng)基的pH值調(diào)到,可用來(lái)培養(yǎng)細(xì)菌和放線菌。豌豆瓊脂培養(yǎng)基豌豆80粒,瓊脂5g,水200ml瓊脂取80粒干豌豆加水,煮沸1小時(shí),用紗布過(guò)濾后,在濾液中加入瓊脂,煮沸到溶解,分裝,滅菌,備用。食用菌菌種培養(yǎng)基馬鈴薯-蔗糖-瓊脂培養(yǎng)基20%馬鈴薯煮汁1000ml,蔗糖20g,瓊脂18g把馬鈴薯洗凈去皮后,切成小塊。稱取馬鈴薯小塊200g,加水1000ml,煮沸20分鐘后,過(guò)濾。在濾汁中補(bǔ)足水分到1000ml,即成20%馬鈴薯煮汁。在馬鈴薯煮汁中加入瓊脂和蔗糖,煮沸,使它溶解后,補(bǔ)足水分,分裝,滅菌,備用。使用該培養(yǎng)基對(duì)pH值要求不嚴(yán)格,可以不測(cè)定。綜合馬鈴薯培養(yǎng)基20%馬鈴薯煮汁1000ml,磷酸二氫鉀3g,硫酸鎂,葡萄糖20g,維生素10mg,瓊脂18g先配制20%馬鈴薯煮汁,方法同上。在煮汁中加入上述各種組分,加熱溶解后補(bǔ)足水分。上?,F(xiàn)代臨床微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基銷售價(jià)格
上海申啟生物科技有限公司是一家貿(mào)易型類企業(yè),積極探索行業(yè)發(fā)展,努力實(shí)現(xiàn)產(chǎn)品創(chuàng)新。公司致力于為客戶提供安全、質(zhì)量有保證的良好產(chǎn)品及服務(wù),是一家其他有限責(zé)任公司企業(yè)。公司始終堅(jiān)持客戶需求優(yōu)先的原則,致力于提供高質(zhì)量的技術(shù)開發(fā),技術(shù)研發(fā),技術(shù)轉(zhuǎn)讓,醫(yī)療器材。上海申啟以創(chuàng)造***產(chǎn)品及服務(wù)的理念,打造高指標(biāo)的服務(wù),引導(dǎo)行業(yè)的發(fā)展。