長寧區(qū)有什么即用型培養(yǎng)基基地

來源: 發(fā)布時間:2020-06-09

    轉用文火燉2小時。過濾,濾出的肉末干燥處理,濾液pH值調到。每支試管內加入10毫升肉湯和少量碎末狀的干牛心,滅菌,備用。根瘤菌培養(yǎng)基葡萄糖10g,磷酸氫二鉀,碳酸鈣3g,硫酸鎂,酵母粉,水1000ml,1%結晶紫溶液1ml。先把瓊脂加水煮沸溶解,然后分別加入其他組分,攪拌使溶解后,分裝,滅菌,備用。放線菌培養(yǎng)基淀粉硝酸鹽培養(yǎng)基(高氏一號培養(yǎng)基)可溶性淀粉,硝酸鉀,磷酸氫二鉀,氯化鈉,硫酸鎂,硫酸亞鐵,瓊脂2g,水100ml。先把淀粉放在燒杯里,用5ml水調成糊狀后,倒入95ml水,攪勻后加入其他藥品,使它溶解。在燒杯外做好記號,加熱到煮沸時加入瓊脂,不停攪拌,待瓊脂完全溶解后,補足失水。調整pH值到,分裝后滅菌,備用。面粉瓊脂培養(yǎng)基面粉60g,瓊脂20g,水1000ml把面粉用水調成糊狀,加水到500ml,放在文火上煮30分鐘。另取500ml水,放入瓊脂,加熱煮沸到溶解后,把兩液調勻,補充水分,調整pH值到,分裝,滅菌,備用。微藻培養(yǎng)基BG-11培養(yǎng)基NaNO3,K2HPO4·,MgSO4·,CaCl2·CitricAcid(檸檬酸),F(xiàn)erricammoniumcitrate(檸檬酸鐵銨,EDTA(dinatrium-salt),Na2CO3,A5+Cosolution*(A5溶液1000×)1mlDistilledWater。原記錄保存?zhèn)洳?,復制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。長寧區(qū)有什么即用型培養(yǎng)基基地

    兼性厭氧微生物在F值為+,在+。F值與氧分壓和pH有關,也受某些微生物代謝產(chǎn)物的影響。在pH相對穩(wěn)定的條件下,可通過增加通氣量(如振蕩培養(yǎng)、攪拌)提高培養(yǎng)基的氧分壓,或加入氧化劑,從而增加F值;在培養(yǎng)基中加入抗壞血酸、硫化氫、半胱氨酸、谷胱甘肽、二硫蘇糖醇等還原性物質可降低F值。5、原料來源的選擇在配制培養(yǎng)基時應盡量利用廉價且易于獲得的原料作為培養(yǎng)基成分,特別是在發(fā)酵工業(yè)中,培養(yǎng)基用量很大,利用低成本的原料更體現(xiàn)出其經(jīng)濟價值。例如,在微生物單細胞蛋白的工業(yè)生產(chǎn)過程中,常常利用糖蜜(制糖工業(yè)中含有蔗糖的廢液)、乳清(乳制品工業(yè)中含有乳糖的廢液)、豆制品工業(yè)廢液及黑廢液(造紙工業(yè)中含有戊糖和己糖的亞硫酸紙漿)等都可作為培養(yǎng)基的原料。再如,工業(yè)上的甲烷發(fā)酵主要利用廢水、廢渣作原料,而在我國農(nóng)村,已推廣利用人畜糞便及禾草為原料發(fā)酵生產(chǎn)甲烷作為燃料。另外,大量的農(nóng)副產(chǎn)品或制品,如鼓皮、米糠、玉米漿、酵母浸膏、酒糟、豆餅、花生餅、蛋白胨等都是常用的發(fā)酵工業(yè)原料。6、滅菌處理要獲得微生物純培養(yǎng),必須避免雜菌污染,因此對所用器材及工作場所進行消毒與滅菌。對培養(yǎng)基而言,更是要進行嚴格的滅菌。青浦區(qū)推廣即用型培養(yǎng)基建筑記錄其來源。培養(yǎng)基的制備記錄每次制備培養(yǎng)基均應有記錄。

    應重新制備。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分完全溶化。迄至煮沸。如為瓊脂培養(yǎng)基,應先用一部分水將瓊脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中,因蒸發(fā)而丟失的水分,**后必須加以補足。培養(yǎng)基pH的初步調整培養(yǎng)基各成分完全溶解后,應進行pH的初步調正,因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中、pH會有所變化,例如,牛肉浸液約可降低。而腸浸液pH卻會有***的升高。因此,對這個步驟,操作者應隨時注意探索經(jīng)驗、以期能掌握培養(yǎng)基的**終pH,保證培養(yǎng)基的質量。pH調正后,還應將培養(yǎng)基煮沸數(shù)分鐘,以利培養(yǎng)基沉淀物的析出。培養(yǎng)基注意事項編輯語音培養(yǎng)基在使用前通過高壓或過濾滅菌。防止污染應該注意以下事項:確認工作細胞庫是否被污染,確認毒種工作種子批是否被污染,確認所用培養(yǎng)基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染,均可用細菌、***及支原體無菌試驗來確認并排除。同時要對無菌試驗培養(yǎng)基的靈敏度進行驗證。實際生產(chǎn)中,可以從配制好的培養(yǎng)液中取少量加入營養(yǎng)瓊脂于恒溫培養(yǎng)箱內培養(yǎng),48小時即可觀察有無污染。其它:高壓滅菌設備、過濾除菌設備均應進行驗證,確保滅菌和除菌效果。

    血清還含有一些微量元素和離子,他們在代謝***中起重要作用,如SeO3、硒等。血清培養(yǎng)基主要問題1.血清的成份可能有幾百種之多,對其準確的成份、含量及其作用機制不清楚,尤其是對其中一些多肽類生長因子、***和脂類等尚未充分認識,這給研究工作帶來許多困難。2.血清都是批量生產(chǎn),各批量之間差異很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保證每批血清的相似性極為困難,從而使實驗的標準化和連續(xù)性受到限制。3.對大多數(shù)細胞,在體內狀態(tài),血清不是它們接觸的生理學液體,只是在損傷愈合以及血液凝固過程中才接觸血清,因此使用血清有可能改變某種細胞在體內的正常狀態(tài),血清可能促進某些細胞的生長(成纖維細胞)同時***另一類細胞生長(表皮細胞)。4.血清含一些對細胞產(chǎn)生毒性的物質,如多胺氧化酶,能與來自高度繁殖細胞的多胺反應(如精胺、亞精胺)形成有細胞毒性作用的聚精胺。補體、抗體、細菌***等都會影響細胞生長,甚至造成細胞死亡。5.動物個體不同,血清產(chǎn)地、批號不同,每批質量差異甚大,其成分不能保持一致。6.取材中可能帶入支原體、病毒,對細胞產(chǎn)生潛在影響,可能導致實驗失敗或實驗結果不可靠性。7.大規(guī)模生產(chǎn)中,血清來源越來越困難。一般均應盡量收集有關資料,加以比較核對,再依據(jù)自己的使用目的加以選用。

    價格昂貴,是構成動物細胞培養(yǎng)對生產(chǎn)成本的主要部分之一。血清的質量標準血清質量高低取決于兩方面因素:一是取材對象,二是取材過程。用于取材的動物應健康無病并且在指定的出生天數(shù)之內,取材過程應嚴格按照操作規(guī)程執(zhí)行,制備出的血清要經(jīng)過嚴格的質量鑒定。WHO公布的《用動物細胞體外培養(yǎng)生產(chǎn)生物制品規(guī)程》中的要求:1.牛血清必須來自有文件證明無牛海綿狀腦病的牛群或國家。并應具備適當?shù)谋O(jiān)測系統(tǒng)。2.有些國家還要求牛血清來自未用過反芻動物蛋白飼料的牛群。3.證明所用牛血清中不含對所生產(chǎn)疫苗病毒的***物。4.血清要通過濾膜過濾除菌,保證無菌。5.無細菌、霉菌、支原體和病毒的污染,有些國家要求無細菌噬菌體污染。6.對細胞有良好的支持繁殖作用。我國在對牛血清的質量2000年版《中國生物制品主要原輔料質控標準》中提出比較嚴格的標準要求。包括蛋白質含量,細菌、***、支原體、牛病毒、大腸桿菌噬菌體、細菌內***,支持細胞增殖檢查。培養(yǎng)基培養(yǎng)基配制編輯語音一、配制用水培養(yǎng)基的大部分是水,所以水的質量直接影響培養(yǎng)基的質量。按Waymouth標準,水的電阻應為200萬歐姆,一般實驗室里以玻璃蒸餾器制備的雙蒸水或三蒸水可以符合使用條件。不要中斷??蓪⑴浞街糜诎鴤?,每稱完一種成分即在配方上做出記號。虹口區(qū)現(xiàn)代即用型培養(yǎng)基以客為尊

包括培養(yǎng)基名稱,配方及其來源,和各種成份的牌號。長寧區(qū)有什么即用型培養(yǎng)基基地

    用于培養(yǎng)霉菌的加入蔗糖,用于培養(yǎng)酵母菌的加入葡萄糖),補足水分,分裝,滅菌,備用。把這培養(yǎng)基的pH值調到,配方中的糖,如用葡萄糖還可用來培養(yǎng)放線菌和芽孢桿菌。豆芽汁培養(yǎng)基黃豆芽100g,瓊脂15g,葡萄糖20g,水1000ml洗凈黃豆芽,加水煮沸30分鐘。用紗布過濾,濾液中加入瓊脂,加熱溶解后放入糖,攪拌使它溶解,補足水分到1000ml,分裝,滅菌,備用。把這培養(yǎng)基的pH值調到,可用來培養(yǎng)細菌和放線菌。豌豆瓊脂培養(yǎng)基豌豆80粒,瓊脂5g,水200ml瓊脂取80粒干豌豆加水,煮沸1小時,用紗布過濾后,在濾液中加入瓊脂,煮沸到溶解,分裝,滅菌,備用。食用菌菌種培養(yǎng)基馬鈴薯-蔗糖-瓊脂培養(yǎng)基20%馬鈴薯煮汁1000ml,蔗糖20g,瓊脂18g把馬鈴薯洗凈去皮后,切成小塊。稱取馬鈴薯小塊200g,加水1000ml,煮沸20分鐘后,過濾。在濾汁中補足水分到1000ml,即成20%馬鈴薯煮汁。在馬鈴薯煮汁中加入瓊脂和蔗糖,煮沸,使它溶解后,補足水分,分裝,滅菌,備用。使用該培養(yǎng)基對pH值要求不嚴格,可以不測定。綜合馬鈴薯培養(yǎng)基20%馬鈴薯煮汁1000ml,磷酸二氫鉀3g,硫酸鎂,葡萄糖20g,維生素10mg,瓊脂18g先配制20%馬鈴薯煮汁,方法同上。在煮汁中加入上述各種組分,加熱溶解后補足水分。長寧區(qū)有什么即用型培養(yǎng)基基地

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