用于培養(yǎng)霉菌的加入蔗糖，用于培養(yǎng)酵母菌的加入葡萄糖），補(bǔ)足水分，分裝，滅菌，備用。把這培養(yǎng)基的pH值調(diào)到，配方中的糖，如用葡萄糖還可用來培養(yǎng)放線菌和芽孢桿菌。豆芽汁培養(yǎng)基黃豆芽100g，瓊脂15g，葡萄糖20g，水1000ml洗凈黃豆芽，加水煮沸30分鐘。用紗布過濾，濾液中加入瓊脂，加熱溶解后放入糖，攪拌使它溶解，補(bǔ)足水分到1000ml，分裝，滅菌，備用。把這培養(yǎng)基的pH值調(diào)到，可用來培養(yǎng)細(xì)菌和放線菌。豌豆瓊脂培養(yǎng)基豌豆80粒，瓊脂5g，水200ml瓊脂取80粒干豌豆加水，煮沸1小時(shí)，用紗布過濾后，在濾液中加入瓊脂，煮沸到溶解，分裝，滅菌，備用。食用菌菌種培養(yǎng)基馬鈴薯-蔗糖-瓊脂培養(yǎng)基20%馬鈴薯煮汁1000ml，蔗糖20g，瓊脂18g把馬鈴薯洗凈去皮后，切成小塊。稱取馬鈴薯小塊200g，加水1000ml，煮沸20分鐘后，過濾。在濾汁中補(bǔ)足水分到1000ml，即成20%馬鈴薯煮汁。在馬鈴薯煮汁中加入瓊脂和蔗糖，煮沸，使它溶解后，補(bǔ)足水分，分裝，滅菌，備用。使用該培養(yǎng)基對pH值要求不嚴(yán)格，可以不測定。綜合馬鈴薯培養(yǎng)基20%馬鈴薯煮汁1000ml，磷酸二氫鉀3g，硫酸鎂，葡萄糖20g，維生素10mg，瓊脂18g先配制20%馬鈴薯煮汁，方法同上。在煮汁中加入上述各種組分，加熱溶解后補(bǔ)足水分。血清的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)血清質(zhì)量高低取決于兩方面因素：一是取材對象，二是取材過程。嘉定區(qū)個(gè)人臨床微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基質(zhì)量保證
二、培養(yǎng)基培養(yǎng)基有天然、人工兩種。一般實(shí)驗(yàn)室使用的是RPMI-1640粉末培養(yǎng)基，以雙蒸或三蒸水配制。NaHCO3（或HCl）調(diào)pH至，若pH值超過，則大多數(shù)細(xì)胞不能生長。RPMI-1640不耐高壓滅菌，使用前需經(jīng)滅菌μm孔徑濾膜濾過處理。三、血清培養(yǎng)中常使用小牛血清（或胎牛血清）。血清亦不能高壓滅菌，無菌的小牛血清需在56℃水浴30分鐘滅活補(bǔ)體，置4℃冰箱存放待用。配制時(shí)含量視培養(yǎng)細(xì)胞種類、時(shí)間而定，一般用10—15%。由于血清成分復(fù)雜、條件不易控制，可選用無血清培養(yǎng)基。四、***素為防止培養(yǎng)時(shí)期細(xì)菌的污染，可在培養(yǎng)基中添加適當(dāng)***素，一般用量與組織細(xì)胞培養(yǎng)相同：卡那霉素100單位/毫升，或雙抗--青霉素100單位/毫升，鏈霉素100微克/毫升。五、植物血凝素（PHA）非增殖期的細(xì)胞不能制備染色體，如人外周血淋巴細(xì)胞，但在離體培養(yǎng)過程中，在PHA的作用下，可被刺激轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞而進(jìn)入有絲分裂。經(jīng)實(shí)驗(yàn)測定其分裂高峰分別于培養(yǎng)后44-48小時(shí)和68-72小時(shí)。PHA有粘多糖，蛋白質(zhì)兩種重要成分。粘多糖促使有絲分裂，蛋白質(zhì)起凝集作用。PHA***的細(xì)胞數(shù)隨其濃度而增加，直至全部免疫活性細(xì)胞均被***為止，但PHA濃度過高會引起凝集，一般采用4%濃度為好。長寧區(qū)介紹臨床微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基服務(wù)保障無細(xì)菌、霉菌、支原體和病毒的污染，有些國家要求無細(xì)菌噬菌體污染。
價(jià)格昂貴，是構(gòu)成動物細(xì)胞培養(yǎng)對生產(chǎn)成本的主要部分之一。血清的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)血清質(zhì)量高低取決于兩方面因素：一是取材對象，二是取材過程。用于取材的動物應(yīng)健康無病并且在指定的出生天數(shù)之內(nèi)，取材過程應(yīng)嚴(yán)格按照操作規(guī)程執(zhí)行，制備出的血清要經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量鑒定。WHO公布的《用動物細(xì)胞體外培養(yǎng)生產(chǎn)生物制品規(guī)程》中的要求：1．牛血清必須來自有文件證明無牛海綿狀腦病的牛群或國家。并應(yīng)具備適當(dāng)?shù)谋O(jiān)測系統(tǒng)。2．有些國家還要求牛血清來自未用過反芻動物蛋白飼料的牛群。3．證明所用牛血清中不含對所生產(chǎn)疫苗病毒的***物。4．血清要通過濾膜過濾除菌，保證無菌。5．無細(xì)菌、霉菌、支原體和病毒的污染，有些國家要求無細(xì)菌噬菌體污染。6．對細(xì)胞有良好的支持繁殖作用。我國在對牛血清的質(zhì)量2000年版《中國生物制品主要原輔料質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)》中提出比較嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)要求。包括蛋白質(zhì)含量，細(xì)菌、***、支原體、牛病毒、大腸桿菌噬菌體、細(xì)菌內(nèi)***，支持細(xì)胞增殖檢查。培養(yǎng)基培養(yǎng)基配制編輯語音一、配制用水培養(yǎng)基的大部分是水，所以水的質(zhì)量直接影響培養(yǎng)基的質(zhì)量。按Waymouth標(biāo)準(zhǔn)，水的電阻應(yīng)為200萬歐姆，一般實(shí)驗(yàn)室里以玻璃蒸餾器制備的雙蒸水或三蒸水可以符合使用條件。
血清還含有一些微量元素和離子，他們在代謝***中起重要作用，如SeO3、硒等。血清培養(yǎng)基主要問題1．血清的成份可能有幾百種之多，對其準(zhǔn)確的成份、含量及其作用機(jī)制不清楚，尤其是對其中一些多肽類生長因子、***和脂類等尚未充分認(rèn)識，這給研究工作帶來許多困難。2．血清都是批量生產(chǎn)，各批量之間差異很大，而且血清保存期至多一年，因此，要保證每批血清的相似性極為困難，從而使實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化和連續(xù)性受到限制。3．對大多數(shù)細(xì)胞，在體內(nèi)狀態(tài)，血清不是它們接觸的生理學(xué)液體，只是在損傷愈合以及血液凝固過程中才接觸血清，因此使用血清有可能改變某種細(xì)胞在體內(nèi)的正常狀態(tài)，血清可能促進(jìn)某些細(xì)胞的生長（成纖維細(xì)胞）同時(shí)***另一類細(xì)胞生長（表皮細(xì)胞）。4．血清含一些對細(xì)胞產(chǎn)生毒性的物質(zhì)，如多胺氧化酶，能與來自高度繁殖細(xì)胞的多胺反應(yīng)（如精胺、亞精胺）形成有細(xì)胞毒性作用的聚精胺。補(bǔ)體、抗體、細(xì)菌***等都會影響細(xì)胞生長，甚至造成細(xì)胞死亡。5．動物個(gè)體不同，血清產(chǎn)地、批號不同，每批質(zhì)量差異甚大，其成分不能保持一致。6．取材中可能帶入支原體、病毒，對細(xì)胞產(chǎn)生潛在影響，可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗或?qū)嶒?yàn)結(jié)果不可靠性。7．大規(guī)模生產(chǎn)中，血清來源越來越困難。有些國家還要求牛血清來自未用過反芻動物蛋白飼料的牛群。
調(diào)整pH值到6。分裝，滅菌，備用。該培養(yǎng)基用于培養(yǎng)和保存靈芝、平菇、香菇等食用菌菌種。***的培養(yǎng)基在植物組織培養(yǎng)時(shí)，通過調(diào)節(jié)IAA和CTK的比值能影響愈傷組織分化出根或芽。CTK/IAA高時(shí)，愈傷組織分化芽。CTK/IAA低時(shí)，分化根；CTK/IAA比例適中維持愈傷組織不分化。愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基制備以MS培養(yǎng)基母液為基礎(chǔ)，向潔凈鋁鍋中順序加入大量元素20×母液100mL，微量元素100×母液20mL，鐵鹽100×母液20mL，維生素100×母液20mL，肌醇200×母液10mL，甘氨酸200×母液10mL，配制得MS培養(yǎng)基后，再加入·L-1的BA8mL，·L-1的NAA8mL。然后加入實(shí)際配制培養(yǎng)基體積約2/3-3/4的蒸餾水，加入40g蔗糖后攪拌使其溶化，用·L-1的NaOH和mol·L-1的HCl調(diào)整pH值至。加入14g瓊脂，將鋁鍋置于電爐上，攪拌加熱使瓊脂完全溶化，然后用蒸餾水定容至終體積2L，繼續(xù)加熱幾分鐘使之混合均勻后分裝于三角瓶中。******葉片愈傷組織誘導(dǎo)取一無菌培養(yǎng)皿，用解剖刀切取1-2片無菌苗葉片置于無菌培養(yǎng)皿中，并用解剖刀將葉片切成2mm2左右的小片，然后將其接種于準(zhǔn)備好的培養(yǎng)基上，每瓶接種5小片，一共接種6瓶。接種后的三角平置于24條件下黑暗培養(yǎng)1周。證明所用牛血清中不含對所生產(chǎn)疫苗病毒的***物。青浦區(qū)專注臨床微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基服務(wù)費(fèi)
1．牛血清必須來自有文件證明無牛海綿狀腦病的牛群或國家。嘉定區(qū)個(gè)人臨床微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基質(zhì)量保證
培養(yǎng)基制備基本方法編輯語音培養(yǎng)基配方的選定同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此，除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法，應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進(jìn)行配制外，一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料，加以比較核對，再依據(jù)自己的使用目的加以選用，記錄其來源。培養(yǎng)基的制備記錄每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄，包括培養(yǎng)基名稱，配方及其來源，和各種成份的牌號。**終pH值、消毒的溫度和時(shí)間制各的日期和制備者等，記錄應(yīng)復(fù)制一份，原記錄保存?zhèn)洳?，?fù)制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。培養(yǎng)基成分的稱取培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯(cuò)亂，**好一次完成，不要中斷?？蓪⑴浞街糜诎鴤?cè)，每稱完一種成分即在配方上做出記號，并將所需稱取的藥品一次取齊，置于左側(cè)，每種稱取完畢后，即移放于右側(cè)。完全稱取完畢后，還應(yīng)進(jìn)行一次檢查。培養(yǎng)基各成份的混合和溶化培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋，以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中，使細(xì)菌不易生長。**好使用不銹鋼鍋加熱溶化，也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時(shí)、可先用溫水加熱并隨時(shí)擾動，以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用。嘉定區(qū)個(gè)人臨床微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基質(zhì)量保證
上海申啟生物科技有限公司主要經(jīng)營范圍是醫(yī)藥健康，擁有一支專業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì)和良好的市場口碑。公司業(yè)務(wù)涵蓋技術(shù)開發(fā)，技術(shù)研發(fā)，技術(shù)轉(zhuǎn)讓，醫(yī)療器材等，價(jià)格合理，品質(zhì)有保證。公司從事醫(yī)藥健康多年，有著創(chuàng)新的設(shè)計(jì)、強(qiáng)大的技術(shù)，還有一批**的專業(yè)化的隊(duì)伍，確保為客戶提供良好的產(chǎn)品及服務(wù)。在社會各界的鼎力支持下，持續(xù)創(chuàng)新，不斷鑄造***服務(wù)體驗(yàn)，為客戶成功提供堅(jiān)實(shí)有力的支持。