蒸餾水）919mlSE培養(yǎng)基·6H2OFe—EDTA1mlA5solution1000×1mldistilledwater958mlSoilExtract（土壤提取液）配置方法取花園土未施過肥，加入蒸餾水1000毫升，瓶口用透氣塞封口，在水浴中沸水加熱2小時，冷卻數(shù)小時，在無菌條件下過濾，取上清液，將滅菌蒸餾水加入上清液至總體積1000毫升。土壤提取液保存在4℃?zhèn)溆?。CompositionoftheA5solutionAddto100mlofdistilledwater:（加入100ml的蒸餾水）（NH4）：將EDTA和FeCl3·6H2O分別溶于水和HCl（），混勻即可。Na2EDTA1gdistilledwater50mlFeCl3·6H2O81mgHCl（）50mlPr培養(yǎng)基Preparation:to997mLofglass-distilledwater,addgproteosepeptone,gagar,andthefollowingstocksolutions:workingsolutiong/()1mlA5溶液和EDTA-Fe溶液配制方法同上。***培養(yǎng)基薩市（Sabouraud’s）培養(yǎng)基蛋白胨10g，瓊脂20g，麥芽糖40g，水1000ml先把蛋白胨、瓊脂加水后，加熱，不斷攪拌，待瓊脂溶解后，加入40g麥芽糖（或葡萄糖），攪拌，使它溶解，然后分裝，滅菌，備用。本培養(yǎng)菌是培養(yǎng)許多種類***所常用的。馬鈴薯糖瓊脂培養(yǎng)基把馬鈴薯洗凈去皮，取200g切成小塊，加水1000ml，煮沸半小時后，補足水分。在濾液中加入10g瓊脂，煮沸溶解后加糖20g。常常利用糖蜜（制糖工業(yè)中含有蔗糖的廢液）、乳清（乳制品工業(yè)中含有乳糖的廢液）。奉賢區(qū)有什么干粉培養(yǎng)基及配套試劑服務保障
二、培養(yǎng)基培養(yǎng)基有天然、人工兩種。一般實驗室使用的是RPMI-1640粉末培養(yǎng)基，以雙蒸或三蒸水配制。NaHCO3（或HCl）調(diào)pH至，若pH值超過，則大多數(shù)細胞不能生長。RPMI-1640不耐高壓滅菌，使用前需經(jīng)滅菌μm孔徑濾膜濾過處理。三、血清培養(yǎng)中常使用小牛血清（或胎牛血清）。血清亦不能高壓滅菌，無菌的小牛血清需在56℃水浴30分鐘滅活補體，置4℃冰箱存放待用。配制時含量視培養(yǎng)細胞種類、時間而定，一般用10—15%。由于血清成分復雜、條件不易控制，可選用無血清培養(yǎng)基。四、***素為防止培養(yǎng)時期細菌的污染，可在培養(yǎng)基中添加適當***素，一般用量與組織細胞培養(yǎng)相同：卡那霉素100單位/毫升，或雙抗--青霉素100單位/毫升，鏈霉素100微克/毫升。五、植物血凝素（PHA）非增殖期的細胞不能制備染色體，如人外周血淋巴細胞，但在離體培養(yǎng)過程中，在PHA的作用下，可被刺激轉化為淋巴母細胞而進入有絲分裂。經(jīng)實驗測定其分裂高峰分別于培養(yǎng)后44-48小時和68-72小時。PHA有粘多糖，蛋白質兩種重要成分。粘多糖促使有絲分裂，蛋白質起凝集作用。PHA***的細胞數(shù)隨其濃度而增加，直至全部免疫活性細胞均被***為止，但PHA濃度過高會引起凝集，一般采用4%濃度為好。黃浦區(qū)介紹干粉培養(yǎng)基及配套試劑銷售價格特別是在發(fā)酵工業(yè)中，培養(yǎng)基用量很大，利用低成本的原料更體現(xiàn)出其經(jīng)濟價值。
培養(yǎng)基化學分類編輯語音培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基是指一類利用動物、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基。例如。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基和LB培養(yǎng)基等。常用的天然有機營養(yǎng)物質包括豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麩皮、牛奶、血清、椰子汁等。天然培養(yǎng)基成本較低，除在實驗室經(jīng)常使用外，也適于用來進行工業(yè)上大規(guī)模的微生物發(fā)酵生產(chǎn)。固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基組合培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分，用化學物質模擬合成、人工設計而配制的培養(yǎng)基。例如，高氏1號培養(yǎng)基和查氏培養(yǎng)基等。合成培養(yǎng)基有一定的配方，配制合成培養(yǎng)基時重復性強，但與天然培養(yǎng)基相比其成本較高，微生物在其中生長速度較慢，一般適于在實驗室用來進行有關微生物營養(yǎng)需求、代謝、分類鑒定、生物量測定、菌種選育及遺傳分析等方面的研究工作。[2]培養(yǎng)基半組合培養(yǎng)基指一類主要以化學試劑配制，同時還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基。例如，馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基。培養(yǎng)基物理分類編輯語音培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基80%～90%是水，其中配有可溶性的或不溶性的營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基。培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基一類配制成的固體狀態(tài)的基質。根據(jù)性質又分為固化培養(yǎng)基、非可逆性固化培養(yǎng)基、天然固態(tài)培養(yǎng)基、濾膜。
血清還含有一些微量元素和離子，他們在代謝***中起重要作用，如SeO3、硒等。血清培養(yǎng)基主要問題1．血清的成份可能有幾百種之多，對其準確的成份、含量及其作用機制不清楚，尤其是對其中一些多肽類生長因子、***和脂類等尚未充分認識，這給研究工作帶來許多困難。2．血清都是批量生產(chǎn)，各批量之間差異很大，而且血清保存期至多一年，因此，要保證每批血清的相似性極為困難，從而使實驗的標準化和連續(xù)性受到限制。3．對大多數(shù)細胞，在體內(nèi)狀態(tài)，血清不是它們接觸的生理學液體，只是在損傷愈合以及血液凝固過程中才接觸血清，因此使用血清有可能改變某種細胞在體內(nèi)的正常狀態(tài)，血清可能促進某些細胞的生長（成纖維細胞）同時***另一類細胞生長（表皮細胞）。4．血清含一些對細胞產(chǎn)生毒性的物質，如多胺氧化酶，能與來自高度繁殖細胞的多胺反應（如精胺、亞精胺）形成有細胞毒性作用的聚精胺。補體、抗體、細菌***等都會影響細胞生長，甚至造成細胞死亡。5．動物個體不同，血清產(chǎn)地、批號不同，每批質量差異甚大，其成分不能保持一致。6．取材中可能帶入支原體、病毒，對細胞產(chǎn)生潛在影響，可能導致實驗失敗或實驗結果不可靠性。7．大規(guī)模生產(chǎn)中，血清來源越來越困難。例如，在微生物單細胞蛋白的工業(yè)生產(chǎn)過程中。
兼性厭氧微生物在F值為+，在+。F值與氧分壓和pH有關，也受某些微生物代謝產(chǎn)物的影響。在pH相對穩(wěn)定的條件下，可通過增加通氣量（如振蕩培養(yǎng)、攪拌）提高培養(yǎng)基的氧分壓，或加入氧化劑，從而增加F值；在培養(yǎng)基中加入抗壞血酸、硫化氫、半胱氨酸、谷胱甘肽、二硫蘇糖醇等還原性物質可降低F值。5、原料來源的選擇在配制培養(yǎng)基時應盡量利用廉價且易于獲得的原料作為培養(yǎng)基成分，特別是在發(fā)酵工業(yè)中，培養(yǎng)基用量很大，利用低成本的原料更體現(xiàn)出其經(jīng)濟價值。例如，在微生物單細胞蛋白的工業(yè)生產(chǎn)過程中，常常利用糖蜜（制糖工業(yè)中含有蔗糖的廢液）、乳清（乳制品工業(yè)中含有乳糖的廢液）、豆制品工業(yè)廢液及黑廢液（造紙工業(yè)中含有戊糖和己糖的亞硫酸紙漿）等都可作為培養(yǎng)基的原料。再如，工業(yè)上的甲烷發(fā)酵主要利用廢水、廢渣作原料，而在我國農(nóng)村，已推廣利用人畜糞便及禾草為原料發(fā)酵生產(chǎn)甲烷作為燃料。另外，大量的農(nóng)副產(chǎn)品或制品，如鼓皮、米糠、玉米漿、酵母浸膏、酒糟、豆餅、花生餅、蛋白胨等都是常用的發(fā)酵工業(yè)原料。6、滅菌處理要獲得微生物純培養(yǎng)，必須避免雜菌污染，因此對所用器材及工作場所進行消毒與滅菌。對培養(yǎng)基而言，更是要進行嚴格的滅菌。兼性厭氧微生物在F值為+，在+。F值與氧分壓和pH有關。奉賢區(qū)推廣干粉培養(yǎng)基及配套試劑服務費
也受某些微生物代謝產(chǎn)物的影響。奉賢區(qū)有什么干粉培養(yǎng)基及配套試劑服務保障
應重新制備。待大部分固體成分溶化后，再用較小火力使所有成分完全溶化。迄至煮沸。如為瓊脂培養(yǎng)基，應先用一部分水將瓊脂溶化，用另一部分水溶化其它成分，然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中，因蒸發(fā)而丟失的水分，**后必須加以補足。培養(yǎng)基pH的初步調(diào)整培養(yǎng)基各成分完全溶解后，應進行pH的初步調(diào)正，因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中、pH會有所變化，例如，牛肉浸液約可降低。而腸浸液pH卻會有***的升高。因此，對這個步驟，操作者應隨時注意探索經(jīng)驗、以期能掌握培養(yǎng)基的**終pH，保證培養(yǎng)基的質量。pH調(diào)正后，還應將培養(yǎng)基煮沸數(shù)分鐘，以利培養(yǎng)基沉淀物的析出。培養(yǎng)基注意事項編輯語音培養(yǎng)基在使用前通過高壓或過濾滅菌。防止污染應該注意以下事項：確認工作細胞庫是否被污染，確認毒種工作種子批是否被污染，確認所用培養(yǎng)基及其添加成分（如小牛血清、NaHCO3等）是否被污染，均可用細菌、***及支原體無菌試驗來確認并排除。同時要對無菌試驗培養(yǎng)基的靈敏度進行驗證。實際生產(chǎn)中，可以從配制好的培養(yǎng)液中取少量加入營養(yǎng)瓊脂于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，48小時即可觀察有無污染。其它：高壓滅菌設備、過濾除菌設備均應進行驗證，確保滅菌和除菌效果。奉賢區(qū)有什么干粉培養(yǎng)基及配套試劑服務保障
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