ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。 ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。在用酶標(biāo)儀檢測(cè)結(jié)果的時(shí)候,為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的線性,MTT 吸光度盡量在0-0.7 范圍內(nèi)。str服務(wù)
您想要快速、準(zhǔn)確的了解不同處理、來(lái)源的組織或細(xì)胞樣品之間某一類(lèi)信號(hào)通路相關(guān)基因的表達(dá)情況嗎?為簡(jiǎn)化基因分析研究,美國(guó)sciencell公司特推出GeneQueryTM qPCR試劑盒,這款產(chǎn)品能夠快速、簡(jiǎn)單的獲得這些不同來(lái)源樣品之間您感興趣的信號(hào)通路相關(guān)基因群之間的精確表達(dá)倍數(shù)關(guān)系,并提供后續(xù)基因定量PCR 特異性引物序列信息。該試劑盒主要集中于生物學(xué)途徑、ai癥研究、遺傳性疾病和生物標(biāo)志物等方面的研究,可在一個(gè)96 孔板內(nèi)同時(shí)檢測(cè)96個(gè)相關(guān)基因的表達(dá),少至0.1ng cDNA 就可快速準(zhǔn)確的檢測(cè)和量化靶基因的表達(dá)。除了該試劑盒,還提供單獨(dú)的引物進(jìn)行基因表達(dá)分析,這些引物組能特異性地識(shí)別和高效地?cái)U(kuò)增靶基因的cDNA。
可以應(yīng)用以下等領(lǐng)域:
1、探索新型藥物靶向基因,
2、發(fā)現(xiàn)正常和病理細(xì)胞之間的信號(hào)異常,
3、確定藥物作用機(jī)制,
4、預(yù)測(cè)各種疾病的藥物療效,
5、評(píng)估藥物對(duì)基因表達(dá)和信號(hào)傳導(dǎo)的影響。
分選試劑盒為雜交瘤細(xì)胞生長(zhǎng)期間和之后定性和定量抗體類(lèi)別同種型提供了一種快速靈敏且簡(jiǎn)便的方法,用于評(píng)估免疫應(yīng)答。
免疫測(cè)定技術(shù)的基礎(chǔ)在于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應(yīng),所以任何優(yōu)zhi的診斷試劑離不開(kāi)優(yōu)zhi的原料,如抗原抗體,酶等。以前用于免疫測(cè)定的抗原通常為各種純化抗原,而抗體則為純化抗原免疫動(dòng)物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體,而抗原或抗體的標(biāo)記物如酶標(biāo)結(jié)合物則通過(guò)各種化學(xué)合成方法制備。近年來(lái),隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結(jié)合物等免疫測(cè)定試劑幾成為現(xiàn)實(shí)的新一代試劑,各種新型使用的測(cè)定方法也不斷出現(xiàn)。
MTT法又稱(chēng)MTT比色法,是一種檢測(cè)細(xì)胞存活和生長(zhǎng)的方法。其檢測(cè)原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚(Formazan)并沉積在細(xì)胞中,而死細(xì)胞無(wú)此功能。在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi),MTT結(jié)晶形成的量與細(xì)胞數(shù)成正比。與MTT相比較,cck-8法優(yōu)勢(shì)明顯。在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi),cck-8檢測(cè)OD值與活細(xì)胞數(shù)的線性關(guān)系比MTT法明顯。而且,MTT法產(chǎn)生不溶于水的藍(lán)紫色結(jié)晶,需要有機(jī)溶劑DMSO溶解,操作過(guò)程中常會(huì)出現(xiàn)溶解不完全或細(xì)胞丟失的現(xiàn)象,影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。cck-8法只是加染料的一步操作,操作簡(jiǎn)單,檢測(cè)可實(shí)時(shí),免去了去除培養(yǎng)基的操作。對(duì)環(huán)境保護(hù)更為有利,不使用有機(jī)溶劑DMSO,所需的耗材也少。慢病毒攜帶的基因組可整合到宿主基因組,使宿主細(xì)胞長(zhǎng)時(shí)間穩(wěn)定表達(dá)外源基因。
化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)的優(yōu)勢(shì)1.靈敏度高:靈敏度高是化學(xué)發(fā)光免疫分析關(guān)鍵的優(yōu)越性?;瘜W(xué)發(fā)光免疫分析能夠檢出放射性免疫分析和酶聯(lián)免疫分析等方法無(wú)法檢出的物質(zhì),對(duì)疾病的早期診斷具有十分重要的意義。2.寬的線性動(dòng)力學(xué)范圍:發(fā)光強(qiáng)度在4-6個(gè)量級(jí)之間,與測(cè)定物質(zhì)濃度間呈線性關(guān)系。這與顯色酶聯(lián)免疫分析吸光度(OD值)2.0的范圍相比,優(yōu)勢(shì)明顯。雖然同位素放射免疫也有較寬的線性動(dòng)力學(xué)范圍,但是放射性限制其應(yīng)用。3.光信號(hào)持續(xù)時(shí)間長(zhǎng):化學(xué)發(fā)光免疫分析的光信號(hào)持續(xù)時(shí)間可達(dá)數(shù)小時(shí)甚至一tian,簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作及測(cè)量。4.分析方法簡(jiǎn)便快速:絕大多數(shù)分析測(cè)定jin需加入一種試劑(或符合制劑)的一步模式。5.結(jié)果穩(wěn)定、誤差?。簶颖颈旧戆l(fā)光,不需要額外光源,避免了外來(lái)因素的干擾(光源穩(wěn)定性、光散射、光波選擇器),分析結(jié)果穩(wěn)定可靠。6.安全性好及使用期長(zhǎng):到目前為止還未發(fā)現(xiàn)化學(xué)發(fā)光免疫分析試劑的危害性;另外這些試劑穩(wěn)定,保存期可達(dá)一年之久。WST-1在代謝活性細(xì)胞上產(chǎn)生高度水溶性的福爾馬贊,允許直接和用戶友好的細(xì)胞活力和增殖的比色測(cè)量。人前顆粒體蛋白ELISA試劑盒
良好光穩(wěn)定性:克服了FITC易淬滅的缺點(diǎn),細(xì)胞分群更明顯。str服務(wù)
與正常細(xì)胞相比,ai細(xì)胞的代謝機(jī)制會(huì)發(fā)生變化,以滿足增殖的需求,使其成為判斷ai變的一個(gè)重要因素。ai細(xì)胞內(nèi)代謝的改變?cè)黾恿似浯蠓肿拥纳锖铣?,?chuàng)出了新的微環(huán)境以應(yīng)對(duì)活性氧 (ROS) 的增加。這種代謝改變背后的驅(qū)動(dòng)因素包括基因表達(dá)的改變以及代謝酶活性的改變。
代謝檢測(cè)是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程,為了簡(jiǎn)化繁瑣的操作,快速獲得數(shù)據(jù),各種檢測(cè)試劑盒應(yīng)運(yùn)而生。Abcam也提供各類(lèi)代謝檢測(cè)試劑盒,科研用戶只需通過(guò)酶標(biāo)儀、顯微鏡或流式細(xì)胞儀,就可直接讀取活細(xì)胞、裂解液和生物流體樣本的數(shù)據(jù)即可。 str服務(wù)
上海中喬新舟生物科技有限公司
1、原代細(xì)胞:ScienCell(中國(guó)區(qū)正規(guī)一級(jí)代理)人源和動(dòng)物源各種原代細(xì)胞。
2、培養(yǎng)基:原代細(xì)胞**低血清、無(wú)血清、無(wú)異源蛋白無(wú)動(dòng)物成分培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞培養(yǎng)試劑:胎牛血清、原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞生長(zhǎng)因子、ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細(xì)胞裂解物等。
4、細(xì)胞系(株):種類(lèi)豐富(1000余種),已通過(guò)STR鑒定;提供細(xì)胞株完全培養(yǎng)基。
5、自研產(chǎn)品:支原體檢測(cè)/qing除試劑盒、端粒酶檢測(cè)試劑盒、人源/動(dòng)物源ELISA試劑盒等系列產(chǎn)品。
6、技術(shù)服務(wù):綠/紅色熒光蛋白標(biāo)記、熒光素酶標(biāo)記、慢bing毒介導(dǎo)基因沉默或過(guò)表達(dá)及穩(wěn)轉(zhuǎn)株的構(gòu)建,細(xì)菌基因敲除、細(xì)胞基因敲除、小鼠基因敲除、血管生成功能學(xué)實(shí)驗(yàn)。