肝臟的一個明顯特征是其在受傷后具有突出的再生能力。對于失去再生能力的晚期肝病,的方法是肝移植。然而,由于短缺,肝移植的實際應用受到限制。在臨床和動物模型中,已經評估了原代肝細胞的移植作為移植的替代方案。具有有效肝臟再增殖能力的人肝細胞(HH)對肝病的需求很大。然而,肝細胞移植的實際使用受到供體肝細胞的有限可用性和體外不能擴增原代HH(PHH)的阻礙。已經做出一些努力來揭示肝再生的機制并將這些發(fā)現轉化為改善HH培養(yǎng)物。據報道,含氧或微制造的共培養(yǎng)物可使HHs保持代謝功能數周;然而,這些細胞失去了它們的增殖能力。另一項使用高通量篩選的研究發(fā)現,支持HH的小分子在一周內擴增約10倍。此外,由膽管來源的雙潛能細胞產生的人肝臟類可以在體外長期擴增。然而,來自這些可擴張的類的細胞在移植中表現出差的性能。在其他研究中,努力通過用hTERT和病毒基因(例如SV40,E6和E7)永生化來擴增HH。然而,使用這種獲得的細胞未證實體內再增殖,并且hTERT和病毒基因的過表達在移植后具有發(fā)生的風險。 上海中喬新舟 原代肝細胞誠信經營。歡迎來電咨詢上海中喬新舟!安徽兔肝細胞(家兔)原代肝細胞有哪些
原代肝細胞可以懸浮培養(yǎng)或貼壁培養(yǎng)。一些細胞自然地懸浮在懸浮液中,而不附著在表面上(例如,來源于外周血的細胞)。也有一些細胞系經過修飾可以在懸浮培養(yǎng)中存活,它們的生長密度高于粘附條件所允許的密度。對于依賴貼壁的原代細胞,貼壁細胞(例如實體組織)需要一個表面才能在體外正常生長。這些細胞大多在沒有涂層的扁平塑料容器中培養(yǎng),但有時在微載體上培養(yǎng),可以用細胞外基質蛋白(如膠原蛋白和層粘連蛋白)包被,以增加粘附特性并提供生長和分化所需的其他信號。細胞培養(yǎng)基由補充了適當的生長因子和細胞因子的基礎培養(yǎng)基組成,細胞在細胞培養(yǎng)箱中生長,并維持在適當的溫度和混合氣體中(對于哺乳動物細胞,通常為37°C,5%CO2)。培養(yǎng)條件根據細胞類型而普遍變化,生長培養(yǎng)基的pH、葡萄糖濃度、生長因子和其他營養(yǎng)物質的存在可能會有所不同,具體取決于細胞類型。 天津膠質原代肝細胞特點原代肝細胞的租賃行情,貴不貴?歡迎來電咨詢上海中喬新舟!
原代肝細胞分離試劑盒說明書實驗方案參考一、設備和試劑準備(一)儀器設備(組織塊)超凈工作臺或者生物安全柜、水浴鍋、一次性100mm培養(yǎng)皿1個、滅菌剪刀和鑷子若干、滅菌100mL搖瓶、電動移液器、一次性15/50mL離心管若干、一次性50mL注射器及μm過濾器若干、100mL無菌試劑瓶、離心機、一次性5ml巴氏吸管、75%酒精及其噴壺、、碎冰、泡沫盒。(二)儀器設備(實體消化)超凈工作臺或者生物安全柜、水浴鍋、蠕動泵(LongerPump,YZ1515X)、手推式電動廢液缸、一次性100mm培養(yǎng)皿1個、乳膠管(滅菌、長度168cm,規(guī)格充滿14ml液體)、滅菌剪刀和鑷子若干、滅菌動脈夾、滅菌止血鉗、一次性輸液針(黑色*25)、電動移液器、一次性15/50mL離心管若干、一次性50mL注射器及μm過濾器若干、100mL無菌試劑瓶、離心機、泡沫板、廢液托盤、固定針頭、一次性5ml巴氏吸管、75%酒精及其噴壺、、碎冰、泡沫盒、新鮮配置6%的戊巴比妥鈉。
實驗步驟1麻醉小鼠,酒精消毒,暴露腹腔,帶線縫合針從下腔靜脈下穿過,打一松松的假結,從假結下方的靜脈插入靜脈留置針,將假結系緊。注意:穿帶線縫合針時不要扎破血管,打的結不要包進太多肉,否則結系不緊。靜脈留置針如成功扎進血管,里面的針時會出現回血現象。2通過留置針注入肝素1ml后(快速推注),準備給予灌流液1,同時剪開肝門靜脈,灌注時間3-5min。330ml灌注液2灌流3-6min(灌注時間很重要,兩次灌注時嚴格保持針不要動,否則容易扎破血管)。翻開肝臟取出膽囊。4摘下肝臟放入置于冰上的平皿中,將肝臟轉移至細胞間內,放于400目篩網上,用4度預冷的1640無血清培養(yǎng)液反復吹打肝臟,并用滅菌的鑷子摔打(不要太用力),將肝細胞吹打下來,直至剩下肝包膜(注意肝臟不能摩擦篩網)。取20μl細胞液觀察細胞活力。加入2μl臺盼藍染色()染色涂片,混勻蓋上玻璃片,顯微鏡下觀察。5靜置5min將細胞沉淀(將皿傾斜放置),用小心吸棄部分上清。6將沉淀的肝細胞轉移到50ml離心管中,補齊無血清預冷1640至25ml。4度50g離心2分鐘,一共離心三次,離心后棄上清。7用6ml含10%血清的1640培養(yǎng)液重懸細胞,鋪細胞于培養(yǎng)皿中,因細胞沉降快,每次鋪前都要吹打混勻。 原代肝細胞的服務價格更優(yōu)惠。歡迎來電咨詢上海中喬新舟!
新的化合物可能引起各類組織的毒性損傷,這些毒性可以在相應的2D或3D培養(yǎng)的細胞模型中進行早期檢測,為藥物研發(fā)提供重要參考資料。藥物代謝與過程主要發(fā)生在肝臟,因此肝臟是易受到毒物影響的受累,肝臟毒性也是藥物安全性檢測時必須要測試的項目之一。原代肝細胞作為一種體外模型,在藥學研究方面具有極大優(yōu)勢——能獲得大量性狀較為統(tǒng)一的樣本,很好的保留了與體內一致的細胞色素P450酶的水平,基本維持了肝臟在體內時的代謝功能。無論是機理性研究還是肝毒性研究都非常合適。因此在藥物研發(fā)的臨床前階段和臨床階段,在毒代動力學中,使用包括人類在內的哺乳動物的原代肝細胞,建立體外肝模型,是優(yōu)先的研究方式。原代肝細胞的選材要求是什么?上海中喬新舟告訴您。安徽兔肝細胞(家兔)原代肝細胞有哪些
原代肝細胞廠家直供優(yōu)勢。歡迎來電咨詢上海中喬新舟!安徽兔肝細胞(家兔)原代肝細胞有哪些
細胞培養(yǎng)是生物學和醫(yī)學研究常用的手段之一,可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩種。原代培養(yǎng)是直接從生物體獲取組織或的一部分進行培養(yǎng),也稱初代培養(yǎng)。嚴格地說即從體內取出組織接種培養(yǎng)到次傳代階段,但實際上,通常把代至第十代以內的培養(yǎng)細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)。一般持續(xù)1-4周。此期細胞呈活躍的移動,可見細胞分裂,但不旺盛。原代培養(yǎng)細胞與體內原組織在形態(tài)結構和功能活動上相似性大。由于培養(yǎng)的細胞剛剛從組織分離出來,故更接近于生物體內的生活狀態(tài)。這一方法可為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段。同時也為以后傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件。原代培養(yǎng)的過程指動物的組織或從機體取出后,經機械法或各種酶類(常用胰蛋白酶)和鰲合劑(常用EDTA)處理,使之分散成單個細胞,加入適量培養(yǎng)基,置于合適的培養(yǎng)容器中,在無菌、適當溫度和一定條件下,使之生存、生長和繁殖的過程。 安徽兔肝細胞(家兔)原代肝細胞有哪些
上海中喬新舟生物科技有限公司
1、原代細胞:ScienCell(中國區(qū)正規(guī)一級代理)人源和動物源各種原代細胞。
2、培養(yǎng)基:原代細胞**低血清、無血清、無異源蛋白無動物成分培養(yǎng)基。
3、細胞培養(yǎng)試劑:胎牛血清、原代細胞轉染試劑盒、細胞實驗檢測試劑盒、細胞生長因子、ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細胞裂解物等。
4、細胞系(株):種類豐富(1000余種),已通過STR鑒定;提供細胞株完全培養(yǎng)基。
5、自研產品:支原體檢測/qing除試劑盒、端粒酶檢測試劑盒、人源/動物源ELISA試劑盒等系列產品。
6、技術服務:綠/紅色熒光蛋白標記、熒光素酶標記、慢bing毒介導基因沉默或過表達及穩(wěn)轉株的構建,細菌基因敲除、細胞基因敲除、小鼠基因敲除、血管生成功能學實驗。