如何選用培養(yǎng)基?選擇培養(yǎng)基沒有一定標準,有幾點建議可供參考:1.建立某種細胞株所用的培養(yǎng)基應該是培養(yǎng)這種細胞優(yōu)先的培養(yǎng)基??梢圆殚單墨I,或在購買細胞株時咨詢。2.根據(jù)細胞株的特點、實驗的需要來選擇培養(yǎng)基。如小鼠細胞株多選1640;進行細胞雜交、基因轉(zhuǎn)移實驗,可選擇IMDM。3.用多種培養(yǎng)基培養(yǎng)目的細胞,觀察其生長狀態(tài),可以用生長曲線、集落形成率等指標判斷,根據(jù)實驗結(jié)果選擇比較好培養(yǎng)基,這是客觀的方法,但比較繁瑣。(AmericanTypeCultureCollection)收集了絕大多數(shù)細胞的詳細資料。打開ATCC網(wǎng)頁的Cellsandhybridomas鏈接,輸入細胞名稱就可以搜索ATCC的細胞數(shù)據(jù)庫。數(shù)據(jù)庫中有每一種細胞的詳細描述,包括細胞的來源,培養(yǎng)和凍存條件,以及相關(guān)文獻等資料。 上皮細胞培養(yǎng)基的制作方法難嗎?上海中喬新舟告訴您。天津子宮上皮細胞培養(yǎng)基購買
細胞培養(yǎng)基的類型動物細胞的培養(yǎng)可以使用的培養(yǎng)基或人工/合成的培養(yǎng)基混合一些天然產(chǎn)物。天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基只由天然生成的生物液體組成。天然培養(yǎng)基非常有用和方便,適用于多種不同的動物細胞培養(yǎng)。但是,由于缺乏對這些天然培養(yǎng)基確切成分的認識,使用天然培養(yǎng)基的主要缺點是可重復性差。人工培養(yǎng)基通過人為地加入一些營養(yǎng)物質(zhì)(有機的和無機的)、維生素、鹽、O2和CO2氣體、血清蛋白、碳水化合物、輔因子,制備成人工或合成的培養(yǎng)基[1]。不同的人工培養(yǎng)基被分別設計用于下面的某個用途:1)及時生存(平衡的鹽溶液,有特定的pH和滲透壓)2)長時間生存(平衡鹽溶液輔以各種配方的有機化合物和/或血清)3)不確定生長4)特定功能。 天津子宮上皮細胞培養(yǎng)基購買上海中喬新舟 上皮細胞培養(yǎng)基誠信經(jīng)營。歡迎來電咨詢上海中喬新舟!
L15細胞培養(yǎng)基L-15培養(yǎng)液適用于快速增殖瘤細胞的培養(yǎng),用于在CO2缺乏的情況下培養(yǎng)腫瘤細胞株。此培養(yǎng)液采用磷酸鹽緩沖體系,氨基酸組成進一步改良,并由半乳糖替代了葡萄糖。至于選擇何種培養(yǎng)基并沒有一定的標準,有幾點建議可供參考:(1)建立某種細胞株所用的培養(yǎng)基應該是培養(yǎng)這種細胞優(yōu)先的培養(yǎng)基??梢圆殚唴⒖嘉墨I,或在購買細胞株時咨詢。也可以在一些生物公司的網(wǎng)站上搜索,如Invitrogen網(wǎng)站上有一個CellLineDatabase的工具,選擇你感興趣的細胞類型,它就會彈出推薦的培養(yǎng)基、血清和轉(zhuǎn)染試劑等,有時還有優(yōu)化好的轉(zhuǎn)染步驟,很方便。(2)其它實驗室慣用的培養(yǎng)基不妨一試,許多培養(yǎng)基可以適合多種細胞。(3)根據(jù)細胞株的特點、實驗的需要來選擇培養(yǎng)基。如小鼠細胞株多選RPMI1640。(4)用多種培養(yǎng)基培養(yǎng)目的細胞,觀察其生長狀態(tài),可以用生長曲線、集落形成率等指標判斷,根據(jù)實驗結(jié)果選擇比較好培養(yǎng)基,這是客觀的方法,但比較繁瑣。
pH氣體也是細胞生存的必需條件之一,所需氣體豐要是氧和二氧化碳。氧參與三羧酸循環(huán),產(chǎn)生能量供給細胞生長、增殖和合成各種成分。一些細胞在缺氧情況下,借糖酵解也可獲取能量,但多數(shù)細胞缺氧不能生存。在開放培養(yǎng)時,一般置細胞于95%空氣加5%二氧化碳的混合氣體環(huán)境中培養(yǎng)。二氧化碳既是細胞代謝產(chǎn)物,也是細胞所需成分,它主要與維持培養(yǎng)基的pH有直接關(guān)系。動物細胞大多數(shù)需要輕微的堿性條件,pH值約在7.2~7.4℃在細胞生長過程中,隨細胞數(shù)量的增多和代謝活動的加強,二氧化碳不斷被釋放,培養(yǎng)液變酸,PH值發(fā)生變化。由于NaHCO3容易分解為二氧化碳,很不穩(wěn)定,致使緩沖系統(tǒng)難以精確地控制。故這一緩沖系統(tǒng)適合密閉培養(yǎng)。HEPES結(jié)合碳酸氫鈉使用,可提供更有效的緩沖體系,主要是防止pH值迅速變動,但比較大缺點是在開放培養(yǎng)或觀察時難以維持正常的pH值。造成pH波動主要是代謝產(chǎn)生的CO2,在封閉式培養(yǎng)過程中CO2與水結(jié)合產(chǎn)生碳酸,培養(yǎng)基pH很快下降。為解決這一問題,合成培養(yǎng)基中使用了NaHCO3-CO2緩沖系統(tǒng),并采用開放培養(yǎng),使細胞代謝產(chǎn)生的CO2及時溢出培養(yǎng)瓶,再通過穩(wěn)定調(diào)節(jié)溫箱中CO2濃度(5%),與培養(yǎng)基中的NaHCO3處于平衡狀態(tài)。 上海中喬新舟告訴您 上皮細胞培養(yǎng)基的選擇方法。歡迎來電咨詢上海中喬新舟!
體外培養(yǎng)的上皮細胞直接生活在培養(yǎng)基中,因此培養(yǎng)基應能滿足細胞對營養(yǎng)成分、促生長因子、、滲透壓、pH等諸多方面的要求。一、營養(yǎng)成分維持細胞生長的營養(yǎng)條件一般包括以下幾個方面:1、氨基酸:是細胞合成蛋白質(zhì)的原料。所有細胞都需要12種必須氨基酸:纈氨酸、亮、異亮、蘇、賴、色、苯丙、蛋、組、酪、精氨酸、胱氨酸。此外還需要谷氨酰胺,它在細胞代謝過程中有重要作用,所含的氮是核酸中嘌令和嘧啶合成的來源,同樣也是合成三、二、一磷酸酰苷所需要的基本物質(zhì)。體外培養(yǎng)的各種培養(yǎng)基內(nèi)都含有必需氨基酸。2、單糖:培養(yǎng)中的細胞可以進行有氧與無氧酵解,六碳糖是主要能源。此外六碳糖也是合成某些氨基酸、脂肪、核酸的原料。細胞對葡萄糖的吸收能力比較高,半乳糖比較低。體外培養(yǎng)動物細胞時,幾乎所有的培養(yǎng)基或培養(yǎng)液中都以葡萄糖作為必含的能源物質(zhì)。3、維生素:主要扮演輔酶、輔基的角色,必不可少。生物素、葉酸、煙酰胺、泛酸、吡哆醇、核黃素、硫胺素、維生素B12都是培養(yǎng)基常有的成分。4、無機離子與微量元素:細胞生長除需要鈉、鉀、鈣、鎂、氮和磷等基本元素,還需要微量元素,如鐵、鋅、硒、銅、錳、鉬、釩等。 上皮細胞培養(yǎng)基如何選擇?上海中喬新舟告訴您。歡迎來電咨詢上海中喬新舟!天津子宮上皮細胞培養(yǎng)基購買
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含血清細胞培養(yǎng)液的粘滯性主要是由血清引起的,在轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)貼壁細胞時,培養(yǎng)液的粘滯性對細胞生長沒有多大影響;但在生物反應器懸浮培養(yǎng)細胞時,細胞培養(yǎng)液的粘滯性則直接影響攪拌轉(zhuǎn)速控制及攪拌剪切力對細胞造成的損傷程度。表面張力對細胞培養(yǎng)有較大的作用,尤其在利用生物反應器進行懸浮培養(yǎng)時,攪拌和通氣都會引起泡沫的產(chǎn)生。對于含血清培養(yǎng)液,由于血清中多種蛋白的存在,攪拌時產(chǎn)生的氣泡較多,氣泡的上升運動對細胞的損傷程度還有爭議,但氣泡的破裂對細胞有明顯的損傷作用。為降低這種損傷,可通過在細胞培養(yǎng)基中添加一些保護劑,降低細胞-氣體和細胞-液體的表面張力,減少氣泡的形成。天津子宮上皮細胞培養(yǎng)基購買
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1、原代細胞:ScienCell(中國區(qū)正規(guī)一級代理)人源和動物源各種原代細胞。
2、培養(yǎng)基:原代細胞**低血清、無血清、無異源蛋白無動物成分培養(yǎng)基。
3、細胞培養(yǎng)試劑:胎牛血清、原代細胞轉(zhuǎn)染試劑盒、細胞實驗檢測試劑盒、細胞生長因子、ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細胞裂解物等。
4、細胞系(株):種類豐富(1000余種),已通過STR鑒定;提供細胞株完全培養(yǎng)基。
5、自研產(chǎn)品:支原體檢測/qing除試劑盒、端粒酶檢測試劑盒、人源/動物源ELISA試劑盒等系列產(chǎn)品。
6、技術(shù)服務:綠/紅色熒光蛋白標記、熒光素酶標記、慢bing毒介導基因沉默或過表達及穩(wěn)轉(zhuǎn)株的構(gòu)建,細菌基因敲除、細胞基因敲除、小鼠基因敲除、血管生成功能學實驗。