幾種慢性肝病(CLD),包括慢性病毒性肝炎、酒精性肝病和非酒精性脂肪肝/非酒精性脂肪性肝炎(NAFLD/NASH),引起肝細胞損傷和壞死,進而引發(fā)炎癥和以細胞外基質(ECM)積累為特征的傷口愈合反應。如果損傷是急性的或自限性的,傷口愈合反應會迅速恢復正常組織穩(wěn)態(tài)和肝臟結構。然而,如果損傷持續(xù)存在,隨之而來的慢性炎癥和ECM積累會超過肝臟再生的能力,導致纖維化并終導致肝硬化,這是一種預后不佳的肝臟疾病,也是發(fā)展為肝細胞(HCC)的主要危險因素。原代肝細胞的服務價格更優(yōu)惠。歡迎來電咨詢上海中喬新舟!北京兔肝細胞新西蘭大白兔原代肝細胞購買
培養(yǎng)的原代肝細胞正常時是什么形狀的?大約要多久才能傳代?原代細胞對培養(yǎng)基有什么特別的要求嗎?(相對傳代細胞而言)謝謝!鼠肝臟組織塊法1,斷頭處死鼠,無菌分離肝組織,在冰浴下將肝組織用4度D-hank‘s也或不含BS的培養(yǎng)液洗凈血污,剝除薄膜及纖維,將肝組織切為約1mm3小塊。2,用上述液體盡量洗去殘留虛無,一次清洗后800rpm離心4min,棄上清,加入消化液I(含1g/l胰蛋白酶,10g/lPVP,),37度孵育12分,再用培養(yǎng)液洗3次以去除胰酶,將消化好的肝組織塊貼于25cm2培養(yǎng)瓶中,加少許漢100ml/lBS培養(yǎng)液置于37度,5%CO22-3h后再補充6ml韓100ml/lBS培養(yǎng)液,待組織周圍出現(xiàn)細胞“生長暈”是該為含50ml/lBS培養(yǎng)液。3,細胞生長之單層時加入消化液II。 北京兔肝細胞新西蘭大白兔原代肝細胞購買原代肝細胞的服務價格。歡迎來電咨詢上海中喬新舟!
隨著各型肝炎、肝硬化、肝等慢性肝病的發(fā)病率日益升高,體外培養(yǎng)的肝細胞也被普遍地用千肝病基礎研究中。盡管細胞培養(yǎng)技術不斷改進和成熟,國內外也先后建立了多株人肝細胞系,但體外分離和培養(yǎng)人正常肝細胞仍是非常有價值的研究材料。一材料與設備1.設備與器材超凈工作臺、離心機、CO2培養(yǎng)箱、-70℃冰箱、-20℃冰箱。2.無菌材料大培養(yǎng)皿、青霉素小瓶、50ml離心管、刻度吸管、彎頭吸管、T25培養(yǎng)瓶、手術剪、刀、鏤、細胞篩(100目)、消毒用乙醇棉球、流產胚胎、高糖DMEM培養(yǎng)液、胎牛血清、青/鏈霉素、D-Hanks溶液、0.25%胰蛋白酶/0.03%EDTA消化液。
原代培養(yǎng):1.取出小鼠后瀝干酒精,放入超凈臺內,固定在泡沫板上。2.用鑷子提起皮膚,用解剖剪剪開皮膚一個橫切口,將皮膚向上撕開,然后剪開肌肉等,暴露出腹腔,在左側找到脾臟,用彎頭眼科鑷取出脾臟,置于無菌培養(yǎng)皿中。3.用生理鹽水將取出的脾臟清洗多次,并剔除多余無用的組織。4.將篩網置于平皿中,脾臟置于篩網上,用彎頭鑷鑷住,輕輕在篩網上進行碾磨,同時不停滴加不含血清的培養(yǎng)液沖洗。5.將碾磨好的細胞懸液吸入至離心管中,離心(1000rpm,5min),吸去上清(去除血液等)。6.加入10ml培養(yǎng)液,吹打混勻,取樣計數(shù)。7.將稀釋好的細胞懸液分裝于培養(yǎng)瓶中,輕輕搖晃混勻,在培養(yǎng)瓶上。面做好標志,注明細胞、組別及日期。然后將培養(yǎng)瓶置于二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 原代肝細胞有什么特點?上海中喬新舟告訴您。
原代培養(yǎng)就是提取的細胞體外次培養(yǎng)。,當原代培養(yǎng)成功以后,隨著培養(yǎng)時間的延長和細胞不斷分裂,一則細胞之間相互接觸而發(fā)生接觸性抑制,生長速度減慢甚至停止;另一方面也會因營養(yǎng)物不足和代謝物積累而不利于生長或發(fā)生中毒。此時就需要將培養(yǎng)物分割成小的部分,重新接種到另外的培養(yǎng)器皿(瓶)內,再進行培養(yǎng)。這個過程就稱為傳代,網上有很多解釋,一般的實驗用的到細胞的都是直接傳代培養(yǎng),別的地方買過來細胞株細胞培養(yǎng)結束直接進行。原代肝細胞的用途?歡迎致電上海中喬新舟!北京兔肝細胞新西蘭大白兔原代肝細胞購買
原代肝細胞怎么選?上海中喬新舟告訴您。北京兔肝細胞新西蘭大白兔原代肝細胞購買
細胞復蘇:①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入(T25瓶)②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化;③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。 北京兔肝細胞新西蘭大白兔原代肝細胞購買
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1、原代細胞:ScienCell(中國區(qū)正規(guī)一級代理)人源和動物源各種原代細胞。
2、培養(yǎng)基:原代細胞**低血清、無血清、無異源蛋白無動物成分培養(yǎng)基。
3、細胞培養(yǎng)試劑:胎牛血清、原代細胞轉染試劑盒、細胞實驗檢測試劑盒、細胞生長因子、ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細胞裂解物等。
4、細胞系(株):種類豐富(1000余種),已通過STR鑒定;提供細胞株完全培養(yǎng)基。
5、自研產品:支原體檢測/qing除試劑盒、端粒酶檢測試劑盒、人源/動物源ELISA試劑盒等系列產品。
6、技術服務:綠/紅色熒光蛋白標記、熒光素酶標記、慢bing毒介導基因沉默或過表達及穩(wěn)轉株的構建,細菌基因敲除、細胞基因敲除、小鼠基因敲除、血管生成功能學實驗。