注意事項(xiàng)：1、酚紅和血清對(duì)CCK-8法的檢測(cè)不會(huì)造成干擾，可以通過(guò)減去空白孔中本底的吸光度而消除。2、CCK-8試劑的顏色為淡紅色，與含酚紅的培養(yǎng)基顏色接近，不注意的話容易產(chǎn)生漏加或多加。3、當(dāng)在培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)板*外一圈的孔容易干燥揮發(fā)，導(dǎo)致體積不準(zhǔn)確而增加誤差。一般情況下，*外一圈的孔只加培養(yǎng)基，不作為測(cè)定孔用。4、金屬對(duì)CCK-8顯色有影響：終濃度為1mM的氯化亞鉛、氯化鐵、硫酸銅會(huì)5%、15%、90%的抑zhi顯色反應(yīng)，使靈敏度降低。如果終濃度是10mM，將會(huì)100%抑zhi顯色反應(yīng)。5、部分懸浮細(xì)胞由于染色比較困難，一般需要增加細(xì)胞數(shù)量并延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間。CCK-8試劑盒可以用于生物活性因子的活性檢測(cè)，抗**藥物的篩選，細(xì)胞增值的測(cè)定。FLNb試劑盒
就eGFP而言，相對(duì)于GFP，其熒光強(qiáng)度更強(qiáng)、熒光性質(zhì)更穩(wěn)定。mCherry是從DsRed演化來(lái)的性能*好的一個(gè)單體紅色熒光蛋白，可以和GFP系列熒光蛋白共用，實(shí)現(xiàn)多色標(biāo)記。熒光蛋白活性和被融合的目標(biāo)蛋白功能相互沒(méi)有明顯影響。這些熒光標(biāo)簽蛋白，其融合表達(dá)目的蛋白后具有以下優(yōu)點(diǎn)：1.不用破碎組織細(xì)胞和不加任何底物，直接通過(guò)熒光顯微鏡就能在活細(xì)胞中發(fā)出綠色熒光，實(shí)時(shí)顯示目的基因的表達(dá)情況，而且熒光性質(zhì)穩(wěn)定，被譽(yù)為活細(xì)胞探針。2.其自發(fā)熒光，不需用目的基因的抗體或原位雜交技術(shù)就可推知目的基因在細(xì)胞中的定位等情況。3.同時(shí)細(xì)胞內(nèi)的其它產(chǎn)物不會(huì)干擾標(biāo)簽蛋白檢測(cè)，從而使其檢測(cè)更顯得快速、簡(jiǎn)便、靈敏度高而且重現(xiàn)性。4.其低消耗、高靈敏度檢測(cè)，十分適用于高通量的藥物篩選。因此現(xiàn)eGFP表達(dá)標(biāo)簽被廣fan地應(yīng)用于基團(tuán)表達(dá)調(diào)控、轉(zhuǎn)基因功能研究、蛋白在細(xì)胞中的功能定位、遷移變化及藥物篩選等方面。5.mCherry紅色熒光蛋白在標(biāo)記病毒顆粒，研究病毒和宿主細(xì)胞之間更有得天獨(dú)厚的優(yōu)勢(shì)。如用mRFP或mCherry標(biāo)記HIV病毒顆粒，研究HIV和宿主細(xì)胞問(wèn)的相互作用以及HIV侵染宿主細(xì)胞的過(guò)程．用mRFP標(biāo)記慢病毒顆粒，研究慢病毒在小鼠體內(nèi)的復(fù)制過(guò)程等。宿主細(xì)胞蛋白研究者可以利用光來(lái)檢測(cè)、測(cè)量和控制分子信號(hào)、細(xì)胞和細(xì)胞群，以便了解它們的活動(dòng)。
腺病毒與其他病毒工具比較，具有以下優(yōu)勢(shì)：a.是研究原代非增殖細(xì)胞基因表達(dá)的*佳系統(tǒng)：腺病毒感ran細(xì)胞后，1-2天即可表達(dá)，是研究原代非增殖細(xì)胞基因表達(dá)的*佳系統(tǒng);b.滴度高：腺病毒系統(tǒng)在轉(zhuǎn)有E1基因的HEK293細(xì)胞中可進(jìn)行自我復(fù)制，可產(chǎn)生滴度為1010到1011PFU/mL的病毒;c.載體容量大：可容納不超過(guò)5kb的片段;d.不整合到染色體中，無(wú)插入致突變性：腺病毒除卵細(xì)胞以外，幾乎在所有已知細(xì)胞中都不整合到染色體中，因此避免了因整合而引發(fā)的潛在的基因突變和隨機(jī)效應(yīng)。
AAV在基因傳遞和表達(dá)的優(yōu)勢(shì)1.宿主范圍廣：隨時(shí)可轉(zhuǎn)染的 AAV 可高效感ran分裂和非分裂細(xì)胞；2.多種血清型 ：AAV1,AAV2, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8 和 AAV9 等；3.安全性高：ITR 序列和 rep/cap 基因分別由獨(dú)li的質(zhì)粒表達(dá)；未發(fā)現(xiàn) AAV 對(duì)人體致 病，rAAV 去除了 wtAAV 基因組的96%，進(jìn)一步保證了安全性；4.免疫原性低：AAV2 的基因組jin 4681 個(gè)核苷酸，便于用常規(guī)的重組 DNA 技術(shù)進(jìn)行操作，而且進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)造成的免疫反應(yīng)小；5.擴(kuò)散性強(qiáng)：AAV可以穿透血腦屏障，是*理想的神經(jīng)元和膠質(zhì)神經(jīng)下感ran工具。
與正常細(xì)胞相比，ai細(xì)胞的代謝機(jī)制會(huì)發(fā)生變化，以滿足增殖的需求，使其成為判斷ai變的一個(gè)重要因素。ai細(xì)胞內(nèi)代謝的改變?cè)黾恿似浯蠓肿拥纳锖铣?，?chuàng)出了新的微環(huán)境以應(yīng)對(duì)活性氧 (ROS) 的增加。這種代謝改變背后的驅(qū)動(dòng)因素包括基因表達(dá)的改變以及代謝酶活性的改變。
代謝檢測(cè)是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程，為了簡(jiǎn)化繁瑣的操作，快速獲得數(shù)據(jù)，各種檢測(cè)試劑盒應(yīng)運(yùn)而生。Abcam也提供各類代謝檢測(cè)試劑盒，科研用戶只需通過(guò)酶標(biāo)儀、顯微鏡或流式細(xì)胞儀，就可直接讀取活細(xì)胞、裂解液和生物流體樣本的數(shù)據(jù)即可。 ELISA試劑盒，抗體檢測(cè)才是趨勢(shì)。
hela細(xì)胞*早起源于20世紀(jì)50年代早期的一種高度侵襲性的宮頸ai細(xì)胞，作為第yi個(gè)不朽的人類細(xì)胞系，hela細(xì)胞是目前世界上*受研究者歡迎的細(xì)胞系之一。hela細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中很容易繁殖，如果hela細(xì)胞污染了其他細(xì)胞，它們很快就會(huì)超過(guò)原來(lái)的細(xì)胞。因此，hela細(xì)胞污染已成為科學(xué)界的一個(gè)重大課題。由于細(xì)胞系中hela細(xì)胞污染的可能性很高，建議進(jìn)行常規(guī)評(píng)估。
Sciencell的Hela細(xì)胞污染檢測(cè)試劑盒（HLCC）專為敏感、快速和pcr法檢測(cè)人培養(yǎng)細(xì)胞中hela細(xì)胞污染的簡(jiǎn)易方法。hela基因組學(xué)DNA（gdna）檢測(cè)引物集（hld）識(shí)別并放大hela細(xì)胞特異性其他人類細(xì)胞中不存在的基因組序列。人類gdna控制引物集（hgc）識(shí)別并放大所有人類細(xì)胞共有的基因組區(qū)域。包括hela細(xì)胞。精心設(shè)計(jì)的引物沒(méi)有非特異性擴(kuò)增推薦PCR條件。每一組引物都經(jīng)過(guò)了PCR和凝膠驗(yàn)證電泳擴(kuò)增特異性。這種高度敏感的試劑盒可以檢測(cè)到低至20hela細(xì)胞/百萬(wàn)細(xì)胞。 熒光素酶（luciferase）是指能催化不同底物發(fā)生氧化使其發(fā)射出熒光的一類酶的總稱?；虼貦z測(cè)試劑盒
在用酶標(biāo)儀檢測(cè)結(jié)果的時(shí)候，為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的線性，MTT 吸光度盡量在0-0.7 范圍內(nèi)。FLNb試劑盒
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：建議先做幾個(gè)孔摸索接種細(xì)胞的數(shù)量和加入CCK-8試劑后的培養(yǎng)時(shí)間。有條件的情況下建議采用多通道移液器，可以減少平行孔間的差異。加入CCK-8試劑時(shí)，建議斜貼著培養(yǎng)板壁加，不要插到培養(yǎng)基頁(yè)面下加，容易產(chǎn)生氣泡，會(huì)干擾OD值讀數(shù)。白細(xì)胞可能需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn)96孔板時(shí)，貼壁細(xì)胞的*小接種量至少為1,000 個(gè)/孔 (100 μL 培養(yǎng)基)。檢測(cè)白細(xì)胞時(shí)的靈敏度相對(duì)較低，因此推薦接種量不低于2,500 個(gè)/孔 (100 μL 培養(yǎng)基)。如果要使用24孔板或6孔板實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)先計(jì)算每孔相應(yīng)的接種量，并按照每孔培養(yǎng)基總體積的10%加入CCK-8溶液。如果沒(méi)有450nm的濾光片，可以使用吸光度在430-490 nm之間的濾光片，但是450nm濾光片的檢測(cè)靈敏度*高。如果待測(cè)物質(zhì)有氧化性或還原性的話，可在加CCK-8之前更換新鮮培養(yǎng)基，去掉藥物的影響。當(dāng)然藥物影響比較小的情況可以不更換培養(yǎng)基，直接扣除培養(yǎng)基中加入藥物后的空白吸收即可。FLNb試劑盒
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1、原代細(xì)胞：ScienCell（中國(guó)區(qū)正規(guī)一級(jí)代理）人源和動(dòng)物源各種原代細(xì)胞。
2、培養(yǎng)基：原代細(xì)胞**低血清、無(wú)血清、無(wú)異源蛋白無(wú)動(dòng)物成分培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞培養(yǎng)試劑：胎牛血清、原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞生長(zhǎng)因子、ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細(xì)胞裂解物等。
4、細(xì)胞系（株）：種類豐富（1000余種），已通過(guò)STR鑒定；提供細(xì)胞株完全培養(yǎng)基。
5、自研產(chǎn)品：支原體檢測(cè)/qing除試劑盒、端粒酶檢測(cè)試劑盒、人源/動(dòng)物源ELISA試劑盒等系列產(chǎn)品。
6、技術(shù)服務(wù)：綠/紅色熒光蛋白標(biāo)記、熒光素酶標(biāo)記、慢bing毒介導(dǎo)基因沉默或過(guò)表達(dá)及穩(wěn)轉(zhuǎn)株的構(gòu)建，細(xì)菌基因敲除、細(xì)胞基因敲除、小鼠基因敲除、血管生成功能學(xué)實(shí)驗(yàn)。