種子培養(yǎng)基種子培養(yǎng)基是供孢子發(fā)芽、生長和大量繁殖菌絲體,并使菌體長得粗壯,成為活力強(qiáng)的“種子”。所以種子瓊脂培養(yǎng)基</a>的營養(yǎng)成分要求比較豐富和完全,氮源和維生素的含量也要高些,但總濃度以略稀薄為好,這樣可達(dá)到較高的溶解氧,供大量菌體生長繁殖。種子培養(yǎng)基的成分要考慮在微生物代謝過程中能維持穩(wěn)定的pH,其組成還要根據(jù)不同菌種的生理特征而定。一般種子培養(yǎng)基都用營養(yǎng)豐富而完全的天然有機(jī)氮源,因?yàn)橛行┌被崮艽碳ゆ咦影l(fā)芽。但無機(jī)氮源容易利用,有利于菌體迅速生長,所以在種子培養(yǎng)基中常包括有機(jī)及無機(jī)氮源。一級的種子培養(yǎng)基的成分好能較接近發(fā)酵培養(yǎng)基,這樣可使種子進(jìn)入發(fā)酵培養(yǎng)基后能迅速適應(yīng),快速生長。 減血清培養(yǎng)基是Eagle *小必需培養(yǎng)基的改良版,以HEPES和碳酸氫鈉為緩沖液。SK-OV-3完全培養(yǎng)基
細(xì)胞在生長階段和表達(dá)階段對于營養(yǎng)成分的種類、比例的需求具有很大差別,基礎(chǔ)培養(yǎng)基通常先要保證細(xì)胞接種后能夠順利生長,而有些更利于細(xì)胞產(chǎn)物表達(dá)的成分可能會對細(xì)胞生長具有抑制作用,基礎(chǔ)培養(yǎng)基和補(bǔ)料的有機(jī)搭配,才能獲得細(xì)胞生長和表達(dá)效果。因此,先篩選出基礎(chǔ)培養(yǎng)基,再進(jìn)行搭配補(bǔ)料的篩選,往往會漏掉非常具有潛力的基礎(chǔ)培養(yǎng)基。用于建立培養(yǎng)工藝的細(xì)胞株通常是培養(yǎng)并凍存于某種特定培養(yǎng)基中的,細(xì)胞可能會對該培養(yǎng)基中的某些特定成分,或者該培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分配比產(chǎn)生依賴,更換至另外的培養(yǎng)基中細(xì)胞可能會因?yàn)椴贿m應(yīng)而不能給出客觀真實(shí)的結(jié)果。 小膠質(zhì)細(xì)胞生長因子中喬新舟可大量供應(yīng)各類公司培養(yǎng)基 歡迎來電了解。
天然培養(yǎng)基指來自動(dòng)物體液或利用組織分離提取的一類培養(yǎng)基,如血漿、血清、淋ba液、雞胚浸出液等。其優(yōu)點(diǎn)是營養(yǎng)成分豐富,培養(yǎng)效果良好,但缺點(diǎn)是成分復(fù)雜,來源受限且制作過程復(fù)雜、批間差異大。目前廣fan使用的天然培養(yǎng)基是血清,另外各種組織提取液、促進(jìn)細(xì)胞貼壁的膠原類物質(zhì)在培養(yǎng)某些特殊細(xì)胞也是必不可少。
目前用于細(xì)胞培養(yǎng)的血清主要是牛血清,培養(yǎng)某些特殊細(xì)胞也用人血清、馬血清等。牛血清對絕大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞都是適合的,但并不排除在培養(yǎng)某種細(xì)胞時(shí)使用其他動(dòng)物血清更合適。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激su、無機(jī)物等,這些物質(zhì)對促進(jìn)細(xì)胞生長或抑止生長活性是達(dá)到生理平衡的。此外,血清含一些對細(xì)胞產(chǎn)生毒性的物質(zhì),如多胺氧化酶,能與來自高度繁殖細(xì)胞的多胺反應(yīng)(如精胺、亞精胺)形成有細(xì)胞毒性作用的聚精胺。補(bǔ)體、抗體、細(xì)菌du素等都會影響細(xì)胞生長,甚至造成細(xì)胞死亡。目前,血清多作為一種添加成分與合成培養(yǎng)基混合使用,使用濃度一般為5 ~ 20 %,*常用是10 %。
同樣,制備的培養(yǎng)基在加熱滅菌處理(如高壓滅菌)時(shí),也可能會產(chǎn)生PH的變化。對于脫水培養(yǎng)基,生產(chǎn)廠商已考慮到這一點(diǎn),通常不需要再調(diào)整其PH但應(yīng)認(rèn)真核對待用培養(yǎng)基的PH。如果脫水的瓊脂培養(yǎng)基在再次溶解或制備的過程中必須調(diào)整PH,那么好在滅菌操作步驟之后用過濾滅菌的鹽酸和氫氧化鈉溶液進(jìn)行調(diào)整,以避免造成因再次滅菌而形成的培養(yǎng)基的過度加熱。當(dāng)用不同的原料或藥品制備培養(yǎng)基時(shí),必須在高壓滅菌后檢測培養(yǎng)基的PH。此外,如果發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基的PH在每次高壓滅菌后都發(fā)生相同變化,可在配制培養(yǎng)基時(shí)對PH進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。但仍需測定培養(yǎng)基滅菌后的終PH。 Ham's F-10 復(fù)合營養(yǎng)培養(yǎng)基為基礎(chǔ)設(shè)計(jì)而成的,*初用于 CHO 細(xì)胞的無血清培養(yǎng)。
具體操作步驟是接種不大于100CFU的試驗(yàn)菌于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基上,液體培養(yǎng)基促生長能力檢查,預(yù)期結(jié)果是與對照培養(yǎng)基管做比較,被檢培養(yǎng)基管應(yīng)生長良好;固體培養(yǎng)基促生長能力檢查,預(yù)期結(jié)果是被檢培養(yǎng)基與對照培養(yǎng)基上生長的菌落大小、形態(tài)特征應(yīng)一致;培養(yǎng)基抑制能力檢查,被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基中,試驗(yàn)菌應(yīng)不得生長;培養(yǎng)基指示特性檢查,被檢培養(yǎng)基與對照培養(yǎng)基上生長的菌落大小、形態(tài)特征、指示劑反應(yīng)情況等等應(yīng)該一致。 DMEM/F12培養(yǎng)基用于哺乳細(xì)胞培養(yǎng)物具有更優(yōu)的可靠性、一致性和改良型對照。NCI-H1563完全培養(yǎng)基
細(xì)胞培養(yǎng)基系列產(chǎn)品包含設(shè)計(jì)用來支持和維持細(xì)胞系生長的產(chǎn)品,適用于各種哺乳動(dòng)物細(xì)胞和細(xì)胞系。SK-OV-3完全培養(yǎng)基
歷史性的突破在90年代,1991年GIBCO推出CHO-S-SFM系列無血清培養(yǎng)基實(shí)現(xiàn)了CHO細(xì)胞完全無血清培養(yǎng)。白蛋白的主要功能是作為微量元素的載體,進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)微量元素等可以替代白蛋白的添加;類胰島素生長因子IGF-1可以替代胰島素;改進(jìn)鐵離子往細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)可以替代轉(zhuǎn)鐵蛋白。90年代中期出現(xiàn)了早的無蛋白培養(yǎng)基(Protein-free Medium,PFM),PFM 往往還含有蛋白水解物,而通過用植物來源的水解物代替動(dòng)物蛋白胨進(jìn)一步降低了動(dòng)物來源成分的風(fēng)險(xiǎn)。 SK-OV-3完全培養(yǎng)基
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1、原代細(xì)胞:ScienCell(中國區(qū)正規(guī)一級代理)人源和動(dòng)物源各種原代細(xì)胞。
2、培養(yǎng)基:原代細(xì)胞**低血清、無血清、無異源蛋白無動(dòng)物成分培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞培養(yǎng)試劑:胎牛血清、原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)檢測試劑盒、細(xì)胞生長因子、ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細(xì)胞裂解物等。
4、細(xì)胞系(株):種類豐富(1000余種),已通過STR鑒定;提供細(xì)胞株完全培養(yǎng)基。
5、自研產(chǎn)品:支原體檢測/qing除試劑盒、端粒酶檢測試劑盒、人源/動(dòng)物源ELISA試劑盒等系列產(chǎn)品。
6、技術(shù)服務(wù):綠/紅色熒光蛋白標(biāo)記、熒光素酶標(biāo)記、慢bing毒介導(dǎo)基因沉默或過表達(dá)及穩(wěn)轉(zhuǎn)株的構(gòu)建,細(xì)菌基因敲除、細(xì)胞基因敲除、小鼠基因敲除、血管生成功能學(xué)實(shí)驗(yàn)。