貓作為原代肝細(xì)胞的常用供體，近年來(lái)在生物醫(yī)藥領(lǐng)域的研究中扮演著越來(lái)越重要的角色。相對(duì)于小鼠和大鼠等試驗(yàn)用動(dòng)物，貓的體型更大，便于試驗(yàn)操作和觀察，因此被廣泛應(yīng)用于科研、教育和藥物研發(fā)等領(lǐng)域。據(jù)美國(guó)農(nóng)業(yè)部動(dòng)植物衛(wèi)生檢疫局（APHIS）的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，在2017年，美國(guó)就使用了約萬(wàn)只貓進(jìn)行試驗(yàn)研究。而在中國(guó)，試驗(yàn)用貓的年使用量也在不斷增加，據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，每年浙江省的藥品質(zhì)量監(jiān)測(cè)就需要使用400-500只試驗(yàn)用貓。 貓的原代肝細(xì)胞和肝微粒體是不可或缺的研究材料。通過(guò)對(duì)貓的肝細(xì)胞進(jìn)行體外研究，可以更加準(zhǔn)確地評(píng)估藥物的代謝和毒性，為藥物研發(fā)提供重要的參考依據(jù)。此外，貓的原代肝細(xì)胞還可以用于疾病模型的建立和藥物療效的評(píng)估，為Clinical Treatment提供重要的支持。 然而，試驗(yàn)用貓的使用也引起了一些爭(zhēng)議。一些動(dòng)物保護(hù)組織認(rèn)為，試驗(yàn)用貓的使用會(huì)對(duì)動(dòng)物造成痛苦和傷害，應(yīng)該盡量減少或避免使用。因此，科研人員需要在確保研究質(zhì)量的前提下，盡可能地減少試驗(yàn)用貓的使用，采用替代方法和技術(shù)，以保障動(dòng)物福利和人類健康。肝原代細(xì)胞執(zhí)行著許多重要的功能,如毒物的分解、尿素的合成、制造血漿中的的大多數(shù)血漿蛋白質(zhì)等。雞原代肝細(xì)胞分離
在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，是否需要添加血清？在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常需要添加血清。血清是一種含有多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生長(zhǎng)因子的液體，可以提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)和生長(zhǎng)因子，促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖。血清中含有多種蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素、礦物質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，可以為細(xì)胞提供能量和營(yíng)養(yǎng)，促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖。此外，血清中還含有多種生長(zhǎng)因子，如胰島素、表皮生長(zhǎng)因子等，可以促進(jìn)肝細(xì)胞的分化和增殖。然而，血清中也含有一些雜質(zhì)和微生物，可能會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)和功能產(chǎn)生不利影響。因此，在使用血清時(shí)，需要選擇高質(zhì)量的血清，并對(duì)血清進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制和檢測(cè)，以確保血清的質(zhì)量和安全性。此外，在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，也可以使用無(wú)血清培養(yǎng)基或低血清培養(yǎng)基。無(wú)血清培養(yǎng)基或低血清培養(yǎng)基中不含有或含有較少的血清成分，可以減少血清對(duì)細(xì)胞的影響，提高細(xì)胞的純度和穩(wěn)定性。但是，無(wú)血清培養(yǎng)基或低血清培養(yǎng)基的成本較高，需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮徒?jīng)濟(jì)條件來(lái)選擇?？傊?，在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常需要添加血清。在選擇血清時(shí)，需要選擇高質(zhì)量的血清，并對(duì)血清進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制和檢測(cè)。此外，也可以選擇無(wú)血清培養(yǎng)基或低血清培養(yǎng)基，以減少血清對(duì)細(xì)胞的影響。 中山大鼠原代肝細(xì)胞培養(yǎng)技巧原代肝細(xì)胞可以用于藥物代謝和毒性測(cè)試、肝細(xì)胞疾病研究、肝細(xì)胞移植等，為人類健康做出了重要的貢獻(xiàn)。
原代肝細(xì)胞可以用于乙肝病毒的對(duì)照試驗(yàn)。為探究不同類型肝細(xì)胞對(duì)乙型肝炎病毒（HBV）的影響，以及不同藥物和生物學(xué)處理對(duì)HBV的影響，可以選擇了人原代肝細(xì)胞（PHH）樹(shù)鼩原代肝細(xì)胞（PTH）、hNTCP穩(wěn)定表達(dá)豬肝細(xì)胞（PPH-hNTCP）和hNTCP穩(wěn)定表達(dá)liver cancer細(xì)胞系（Huh7D-hNTCP）作為研究對(duì)象。 采用HBV模型，將不同類型肝細(xì)胞融合HBV，并進(jìn)行藥物處理和生物學(xué)處理。藥物處理包括小分子化合物和中藥提取物等，生物學(xué)處理包括過(guò)表達(dá)、敲除siRNA和shRNA等。通過(guò)對(duì)處理后的細(xì)胞進(jìn)行評(píng)價(jià)，可以了解不同藥物和生物學(xué)處理對(duì)HBV的影響。 這種研究方法的意義在于探究不同類型肝細(xì)胞對(duì)HBV的影響，為研究HBV的機(jī)制提供重要的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。同時(shí)，本研究還可以為開(kāi)發(fā)新型抗HBV藥物提供參考，為臨床克服乙型肝炎提供新的思路和方法。
原代肝細(xì)胞的3D培養(yǎng)是一種新興的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，它可以更好地模擬人體內(nèi)肝臟的生理環(huán)境，從而更準(zhǔn)確地研究肝臟疾病的發(fā)生機(jī)制。相比傳統(tǒng)的2D培養(yǎng)方式，3D培養(yǎng)可以提供更多的細(xì)胞-細(xì)胞和細(xì)胞-基質(zhì)相互作用，使細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中更加穩(wěn)定和健康。 在3D培養(yǎng)中，原代肝細(xì)胞被培養(yǎng)在一種類似于人體內(nèi)肝臟的三維結(jié)構(gòu)中，可以更好地模擬人體內(nèi)肝臟的生理環(huán)境。此外，3D培養(yǎng)還可以提供更多的氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，使原代肝細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中更加穩(wěn)定和健康。 原代肝細(xì)胞的3D培養(yǎng)模型可以用于研究肝臟疾病的發(fā)生機(jī)制和治療方法，例如liver cancer、肝纖維化、肝硬化等。此外，它還可以用于藥物篩選和毒性測(cè)試，從而更好地評(píng)估藥物的安全性和有效性。 原代肝細(xì)胞的3D培養(yǎng)是一種具有廣闊應(yīng)用前景的新興細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，它可以更準(zhǔn)確地模擬人體內(nèi)肝臟的生理環(huán)境，為肝臟疾病的研究提供更加可靠的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?。立沃生物原代肝?xì)胞配套提供多種細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)定制服務(wù)，包括細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)定制、細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)等。
細(xì)胞密度差異會(huì)影響原代肝細(xì)胞的形態(tài)。通常情況下，肝細(xì)胞在高密度狀態(tài)下會(huì)呈現(xiàn)出多邊形的形狀，但是在低密度狀態(tài)下，它們的形態(tài)就會(huì)變得多樣化。有些肝細(xì)胞會(huì)呈現(xiàn)出梭形的形狀，有些則會(huì)呈現(xiàn)出五花八門的形態(tài)，甚至可能會(huì)出現(xiàn)其他奇怪的形狀。這是因?yàn)樵诘兔芏葼顟B(tài)下，肝細(xì)胞之間的距離較遠(yuǎn)，它們之間的相互作用力也會(huì)減弱，從而導(dǎo)致它們的形態(tài)發(fā)生變化。這種變化不只是形態(tài)上的變化，還可能會(huì)影響到肝細(xì)胞的功能和代謝活性。因此，在進(jìn)行肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，密度的控制是非常重要的，需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)的需要進(jìn)行調(diào)整，以保證肝細(xì)胞的正常生長(zhǎng)和發(fā)育。立沃生物原代肝細(xì)胞配套提供多種細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)合作服務(wù)，包括細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)合作、細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目合作等。東莞大鼠原代肝細(xì)胞分離培養(yǎng)
立沃生物的原代肝細(xì)胞可以提供多種檢測(cè)服務(wù)，包括細(xì)胞活率、細(xì)胞數(shù)、endotoxin檢測(cè)等。雞原代肝細(xì)胞分離
原代肝細(xì)胞培養(yǎng)中去除endotoxin是十分重要的。原代肝細(xì)胞培養(yǎng)是一種常用的實(shí)驗(yàn)方法，但在培養(yǎng)過(guò)程中，細(xì)胞可能會(huì)受到endotoxin的污染，這會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。 endotoxin是一種由細(xì)菌產(chǎn)生的有毒物質(zhì)，可以引起炎癥反應(yīng)和細(xì)胞損傷。在原代肝細(xì)胞培養(yǎng)中，endotoxin可能來(lái)自于培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)器具或細(xì)胞本身。因此，需要采取一些措施來(lái)去除endotoxin。 一種常用的方法是使用endotoxin去除劑，例如聚陽(yáng)離子樹(shù)脂（Polyclonal Cationic Resin，PCR）或聚乙烯醇（Polyvinyl Alcohol，PVA）。這些去除劑可以吸附endotoxin，從而減少其對(duì)細(xì)胞的影響。使用endotoxin去除劑的方法比較簡(jiǎn)單，只需要將其加入培養(yǎng)基中，然后將細(xì)胞培養(yǎng)在其中即可。 可以使用endotoxin檢測(cè)試劑盒來(lái)檢測(cè)培養(yǎng)基中的endotoxin含量。如果檢測(cè)結(jié)果顯示endotoxin含量較高，可以考慮更換培養(yǎng)基或使用endotoxin去除劑。 除了使用去除劑和檢測(cè)試劑盒外，還可以采取一些預(yù)防措施來(lái)減少endotoxin的污染。例如，使用無(wú)菌技術(shù)操作、定期更換培養(yǎng)器具和培養(yǎng)基、避免過(guò)度攪拌和振蕩等。 去除endotoxin是原代肝細(xì)胞培養(yǎng)中必須注意的問(wèn)題。采取適當(dāng)?shù)拇胧┛梢詼p少endotoxin的污染，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。雞原代肝細(xì)胞分離