貓作為原代肝細(xì)胞的常用供體,近年來(lái)在生物醫(yī)藥領(lǐng)域的研究中扮演著越來(lái)越重要的角色。相對(duì)于小鼠和大鼠等試驗(yàn)用動(dòng)物,貓的體型更大,便于試驗(yàn)操作和觀察,因此被廣泛應(yīng)用于科研、教育和藥物研發(fā)等領(lǐng)域。據(jù)美國(guó)農(nóng)業(yè)部動(dòng)植物衛(wèi)生檢疫局(APHIS)的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示,在2017年,美國(guó)就使用了約萬(wàn)只貓進(jìn)行試驗(yàn)研究。而在中國(guó),試驗(yàn)用貓的年使用量也在不斷增加,據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,每年浙江省的藥品質(zhì)量監(jiān)測(cè)就需要使用400-500只試驗(yàn)用貓。 貓的原代肝細(xì)胞和肝微粒體是不可或缺的研究材料。通過(guò)對(duì)貓的肝細(xì)胞進(jìn)行體外研究,可以更加準(zhǔn)確地評(píng)估藥物的代謝和毒性,為藥物研發(fā)提供重要的參考依據(jù)。此外,貓的原代肝細(xì)胞還可以用于疾病模型的建立和藥物療效的評(píng)估,為Clinical Treatment提供重要的支持。 然而,試驗(yàn)用貓的使用也引起了一些爭(zhēng)議。一些動(dòng)物保護(hù)組織認(rèn)為,試驗(yàn)用貓的使用會(huì)對(duì)動(dòng)物造成痛苦和傷害,應(yīng)該盡量減少或避免使用。因此,科研人員需要在確保研究質(zhì)量的前提下,盡可能地減少試驗(yàn)用貓的使用,采用替代方法和技術(shù),以保障動(dòng)物福利和人類(lèi)健康。原代肝細(xì)胞的研究可以幫助人們了解肝臟的功能和疾病,從而了解肝臟疾病的發(fā)生和發(fā)展,為其攻克提供可能。汕頭雞原代肝細(xì)胞懸浮
原代肝細(xì)胞的來(lái)源供體來(lái)源很多。鑒于人原代肝細(xì)胞存在數(shù)量稀缺和倫理道德等問(wèn)題,研究人員嘗試從動(dòng)物肝臟中分離原代肝細(xì)胞,用來(lái)體外培養(yǎng)并進(jìn)行研究。使用較多的是嚙齒動(dòng)物,還有一些哺乳動(dòng)物和魚(yú)類(lèi)。目前常用的供體品系有樹(shù)鼩、大小鼠、豬、新西蘭兔、比格犬、貓、牛、羊、雞、鴨、鵝、魚(yú)等。 原代肝細(xì)胞除了供體品系不同以外,也會(huì)根據(jù)細(xì)胞來(lái)源的供體數(shù),分為單供體和多供體。供體數(shù)的選擇主要取決于實(shí)驗(yàn)的研究目的。 原代肝細(xì)胞的應(yīng)用場(chǎng)景也很多。隨著技術(shù)水平的不斷提高,原代培養(yǎng)的動(dòng)物和人肝細(xì)胞已廣泛應(yīng)用于藥物研究:①探討藥物在肝中的代謝途徑和藥物藥代動(dòng)力學(xué)的研究;②預(yù)測(cè)和解釋藥物與藥物之間的相互作用;③研究藥物的細(xì)胞毒性等。汕頭兔原代肝細(xì)胞實(shí)驗(yàn)提高原代肝細(xì)胞的活率需要綜合考慮多個(gè)因素:細(xì)胞培養(yǎng)條件、細(xì)胞來(lái)源、細(xì)胞分離方法、培養(yǎng)基配方等。
原代肝細(xì)胞是藥物代謝研究的重要組成。原代肝細(xì)胞(Primaryhepatocytes)是指從動(dòng)物肝臟直接分離的肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞,具有不可替代的優(yōu)勢(shì)。原代肝細(xì)胞與體內(nèi)環(huán)境保持一致,酶量與輔助因子水平濃度與正常生理濃度貼合,滿足在接近生理狀態(tài)情況下研究藥物代謝和毒性的需求,真實(shí)反應(yīng)了體內(nèi)的代謝情況。同時(shí),利用原代肝細(xì)胞在體外進(jìn)行研究,無(wú)須擔(dān)心動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的倫理問(wèn)題,也減少了動(dòng)物實(shí)驗(yàn)所需的成本開(kāi)支。目前,原代肝細(xì)胞已廣泛應(yīng)用于藥物研究,包括探討藥物在肝中的代謝途徑和藥物藥代動(dòng)力學(xué)的研究;預(yù)測(cè)并解釋藥物—藥物間的相互作用;研究藥物的細(xì)胞毒性等。
原代肝細(xì)胞是一種從新鮮肝臟組織中分離出來(lái)的細(xì)胞,具有高度的生物學(xué)活性和生理功能。它們是肝臟的主要細(xì)胞類(lèi)型,能夠執(zhí)行多種生理功能,如合成和分泌膽汁、代謝藥物和有害物質(zhì)、合成和分泌蛋白質(zhì)等。 原代肝細(xì)胞具有以下特點(diǎn): 1. 高度的生物學(xué)活性:原代肝細(xì)胞具有高度的生物學(xué)活性,能夠執(zhí)行多種生理功能,如代謝藥物和有害物質(zhì)、合成和分泌蛋白質(zhì)等。 2. 優(yōu)異的細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖能力:原代肝細(xì)胞具有優(yōu)異的細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖能力,能夠在體外長(zhǎng)期培養(yǎng),為研究肝臟生理和病理提供了重要的工具。 3. 高度的細(xì)胞純度:原代肝細(xì)胞可以通過(guò)多種方法從新鮮肝臟組織中分離出來(lái),具有高度的細(xì)胞純度,可以用于多種實(shí)驗(yàn)和應(yīng)用。 4. 易于操作和應(yīng)用:原代肝細(xì)胞可以在體外進(jìn)行多種實(shí)驗(yàn)和應(yīng)用,如藥物代謝和毒性測(cè)試、病毒研究和基因轉(zhuǎn)染等。 5. 廣泛的應(yīng)用領(lǐng)域:原代肝細(xì)胞在藥物研發(fā)、毒性測(cè)試、疾病研究等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值,是肝臟生理和病理研究的重要工具。 原代肝細(xì)胞是一種具有高度生物學(xué)活性和生理功能的細(xì)胞類(lèi)型,具有優(yōu)異的細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖能力,易于操作和應(yīng)用,多方面應(yīng)用于藥物研發(fā)、毒性測(cè)試、疾病研究等領(lǐng)域。立沃生物的原代肝細(xì)胞可以提供多種檢測(cè)服務(wù),包括細(xì)胞活率、細(xì)胞數(shù)、endotoxin檢測(cè)等。
原代肝細(xì)胞的分離技術(shù)是一項(xiàng)非常復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)技術(shù),需要特定的實(shí)驗(yàn)室條件和高超的技術(shù)。在實(shí)驗(yàn)室中,必須嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室管理和質(zhì)量控制的要求,確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。同時(shí),由于涉及到人體組織的使用,還需要遵守倫理和法律規(guī)定,確保實(shí)驗(yàn)的合法性和道德性。 在實(shí)驗(yàn)室中,分離原代肝細(xì)胞需要使用一系列的試劑和設(shè)備,如胰蛋白酶、膽汁酸、離心機(jī)等。這些試劑和設(shè)備必須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量控制,確保其純度和有效性。同時(shí),實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境條件也必須符合要求,如溫度、濕度、潔凈度等,以保證實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定性和可重復(fù)性。 在分離原代肝細(xì)胞的過(guò)程中,還需要進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞鑒定等步驟。這些步驟需要高超的技術(shù)和經(jīng)驗(yàn),以確保細(xì)胞正常的生長(zhǎng)和增殖。同時(shí),還需要進(jìn)行細(xì)胞的鑒定和檢測(cè),以確認(rèn)細(xì)胞的純度和活性。 分離原代肝細(xì)胞是一項(xiàng)非常復(fù)雜和高難度的實(shí)驗(yàn)技術(shù),只有在符合這些要求的前提下,才能夠獲得高質(zhì)量的原代肝細(xì)胞,為肝臟疾病的研究和treatment提供有力的支持。貼壁原代肝細(xì)胞主要用于肝臟再生研究、肝臟3D打印、肝臟疾病研究、HBV、HCV病毒研究等。浙江牛原代肝細(xì)胞
原代肝細(xì)胞不能傳代和長(zhǎng)期培養(yǎng),會(huì)丟失肝細(xì)胞分化特性與功能,通過(guò)誘導(dǎo)去分化做成肝祖細(xì)胞可以傳代培養(yǎng)。汕頭雞原代肝細(xì)胞懸浮
貼壁培養(yǎng)是一種常用的細(xì)胞培養(yǎng)方法,可以使原代肝細(xì)胞在培養(yǎng)皿表面附著生長(zhǎng),形成單層細(xì)胞群落。原代肝細(xì)胞的貼壁培養(yǎng)需要注意以下幾點(diǎn): 1. 分離和準(zhǔn)備細(xì)胞:從新鮮的動(dòng)物肝臟中分離出原代肝細(xì)胞后,需要進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)和質(zhì)量檢測(cè),確保細(xì)胞數(shù)量和質(zhì)量符合要求。 2. 培養(yǎng)基的選擇:原代肝細(xì)胞的培養(yǎng)基需要選擇適合其生長(zhǎng)和代謝的培養(yǎng)基,常用的培養(yǎng)基包括DMEM、RPMI-1640等。 3. 培養(yǎng)皿的涂層:為了使原代肝細(xì)胞能夠附著生長(zhǎng),需要在培養(yǎng)皿表面涂層一定濃度的膠原蛋白、明膠或者其他細(xì)胞黏附因子。 4. 細(xì)胞接種和培養(yǎng):將準(zhǔn)備好的原代肝細(xì)胞接種到涂層好的培養(yǎng)皿中,加入適量的培養(yǎng)基,放入恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。需要注意的是,原代肝細(xì)胞的培養(yǎng)時(shí)間較短,一般在3-5天左右,因此需要及時(shí)更換培養(yǎng)基和進(jìn)行細(xì)胞觀察。 原代肝細(xì)胞的貼壁培養(yǎng)可以通過(guò)在培養(yǎng)皿上加一定的的吸附涂層來(lái)達(dá)到讓原代肝細(xì)胞快速貼壁的效果。汕頭雞原代肝細(xì)胞懸浮