原代肝細(xì)胞是藥物代謝研究領(lǐng)域非常重要的體外模型。原代肝細(xì)胞作為藥物代謝研究的經(jīng)典模型,在探討藥物在肝中的代謝途徑和藥代動力學(xué)的研究中發(fā)揮著重要作用。將苗頭化合物與懸浮原代肝細(xì)胞共孵育,不但可對化合物在肝細(xì)胞中的代謝穩(wěn)定性進行研究,而且還可得到相對多量的高純度的代謝產(chǎn)物,在研究藥物生物轉(zhuǎn)化特征,尋找藥物可能的代謝物方面具有很大的優(yōu)勢。尤其是當(dāng)有證據(jù)顯示化合物的生物轉(zhuǎn)化途徑為二相代謝、水解作用或肝微粒體中非特異性蛋白結(jié)合很高、肝微粒體中代謝不明顯的時候,原代肝細(xì)胞更為不可替代的體外模型。原代肝細(xì)胞是從新鮮的肝臟組織中分離出來的細(xì)胞。深圳牛原代肝細(xì)胞培養(yǎng)
保存溫度是影響原代肝細(xì)胞存活和功能的關(guān)鍵因素之一。一般來說,原代肝細(xì)胞的保存溫度為4℃,但是在這種溫度下,細(xì)胞的代謝活動仍然會繼續(xù)進行,導(dǎo)致細(xì)胞的壽命有限。因此,為了延長原代肝細(xì)胞的壽命,可以將其保存在低溫下,如-80℃或液氮中。這種保存方式可以有效地減緩細(xì)胞的代謝活動,延長細(xì)胞的壽命,但是在保存過程中需要注意加入凍存液,防止細(xì)胞凍結(jié)損傷。 原代肝細(xì)胞的運輸也是一個重要的問題。在運輸過程中,細(xì)胞可能會受到振動、溫度變化、氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)的缺乏等不利因素的影響,導(dǎo)致細(xì)胞失活或功能受損。為了保證細(xì)胞的完整性和功能性,可以采用液氮運輸?shù)姆绞?,即在低溫下運輸細(xì)胞。在運輸前給細(xì)胞提供充足的營養(yǎng)和氧氣,也可以增強其抵抗不利因素的能力。 江蘇兔原代肝細(xì)胞實驗人原代肝細(xì)胞的獲取和保存非常困難,且存在批次差異和有限的增殖能力,因此在實際應(yīng)用中受到了一定的限制。
貓作為原代肝細(xì)胞的常用供體,近年來在生物醫(yī)藥領(lǐng)域的研究中扮演著越來越重要的角色。相對于小鼠和大鼠等試驗用動物,貓的體型更大,便于試驗操作和觀察,因此被廣泛應(yīng)用于科研、教育和藥物研發(fā)等領(lǐng)域。據(jù)美國農(nóng)業(yè)部動植物衛(wèi)生檢疫局(APHIS)的統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示,在2017年,美國就使用了約萬只貓進行試驗研究。而在中國,試驗用貓的年使用量也在不斷增加,據(jù)文獻報道,每年浙江省的藥品質(zhì)量監(jiān)測就需要使用400-500只試驗用貓。 貓的原代肝細(xì)胞和肝微粒體是不可或缺的研究材料。通過對貓的肝細(xì)胞進行體外研究,可以更加準(zhǔn)確地評估藥物的代謝和毒性,為藥物研發(fā)提供重要的參考依據(jù)。此外,貓的原代肝細(xì)胞還可以用于疾病模型的建立和藥物療效的評估,為Clinical Treatment提供重要的支持。 然而,試驗用貓的使用也引起了一些爭議。一些動物保護組織認(rèn)為,試驗用貓的使用會對動物造成痛苦和傷害,應(yīng)該盡量減少或避免使用。因此,科研人員需要在確保研究質(zhì)量的前提下,盡可能地減少試驗用貓的使用,采用替代方法和技術(shù),以保障動物福利和人類健康。
如何提高原代肝細(xì)胞的存活率?原代肝細(xì)胞是指直接從生物體肝臟中分離出來的肝細(xì)胞,其存活率的提高可以通過以下方法實現(xiàn):1.選擇合適的分離方法:選擇合適的分離方法可以提高原代肝細(xì)胞的存活率。例如,可以使用膠原酶消化法或機械分離法等方法分離肝細(xì)胞。2.控制培養(yǎng)條件:原代肝細(xì)胞的培養(yǎng)條件對其存活率有很大影響。例如,培養(yǎng)溫度、濕度、氧氣含量、培養(yǎng)基成分等都需要嚴(yán)格控制。3.使用合適的培養(yǎng)基:選擇合適的培養(yǎng)基可以提高原代肝細(xì)胞的存活率。例如,可以使用含有肝細(xì)胞生長因子、胰島素等成分的培養(yǎng)基。4.控制細(xì)胞密度:原代肝細(xì)胞的密度對其存活率也有很大影響。如果細(xì)胞密度過高,會導(dǎo)致細(xì)胞缺氧和營養(yǎng)不足,從而降低存活率。因此,需要控制細(xì)胞密度,使其保持在適當(dāng)?shù)姆秶鷥?nèi)。5.添加細(xì)胞保護劑:添加細(xì)胞保護劑可以提高原代肝細(xì)胞的存活率。例如,可以添加谷胱甘肽、維生素E等抗氧化劑,以減少細(xì)胞氧化損傷。6.定期更換培養(yǎng)基:定期更換培養(yǎng)基可以防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累和營養(yǎng)不足,從而提高原代肝細(xì)胞的存活率??傊?,提高原代肝細(xì)胞的存活率需要綜合考慮多種因素,包括分離方法、培養(yǎng)條件、培養(yǎng)基、細(xì)胞密度、細(xì)胞保護劑等。 立沃生物的原代肝細(xì)胞配套有多種細(xì)胞培養(yǎng)試劑,包括細(xì)胞培養(yǎng)基、細(xì)胞因子等,為后續(xù)研究保駕護航。
細(xì)胞密度差異會影響原代肝細(xì)胞的形態(tài)。通常情況下,肝細(xì)胞在高密度狀態(tài)下會呈現(xiàn)出多邊形的形狀,但是在低密度狀態(tài)下,它們的形態(tài)就會變得多樣化。有些肝細(xì)胞會呈現(xiàn)出梭形的形狀,有些則會呈現(xiàn)出五花八門的形態(tài),甚至可能會出現(xiàn)其他奇怪的形狀。這是因為在低密度狀態(tài)下,肝細(xì)胞之間的距離較遠,它們之間的相互作用力也會減弱,從而導(dǎo)致它們的形態(tài)發(fā)生變化。這種變化不只是形態(tài)上的變化,還可能會影響到肝細(xì)胞的功能和代謝活性。因此,在進行肝細(xì)胞培養(yǎng)時,密度的控制是非常重要的,需要根據(jù)實驗的需要進行調(diào)整,以保證肝細(xì)胞的正常生長和發(fā)育。作為一種重要的細(xì)胞模型,原代肝細(xì)胞在藥物篩選、毒性測試和疾病研究等領(lǐng)域具有重要的作用。珠海豬原代肝細(xì)胞貼壁
立沃生物的原代肝細(xì)胞可提供不同狀態(tài)的細(xì)胞,如貼壁細(xì)胞、懸浮細(xì)胞等,滿足客戶基于使用場景的個性化需求。深圳牛原代肝細(xì)胞培養(yǎng)
原代肝細(xì)胞由于其敏感性和易受外界環(huán)境影響,細(xì)胞活率較低,成為制約其應(yīng)用的瓶頸之一。 適當(dāng)?shù)姆椒梢蕴岣咴渭?xì)胞培養(yǎng)活率。首先,選擇合適的動物或人體來源是提高原代肝細(xì)胞細(xì)胞活率的關(guān)鍵。一般來說,年齡較小、健康狀態(tài)良好的動物或人體組織中的原代肝細(xì)胞活性較高,因此應(yīng)盡可能選擇這些來源。 其次,分離和培養(yǎng)過程中的細(xì)胞處理方法也會影響原代肝細(xì)胞的細(xì)胞活率。在分離過程中,應(yīng)盡可能減少機械或化學(xué)損傷,避免對細(xì)胞造成不可逆的傷害。在培養(yǎng)過程中,應(yīng)注意細(xì)胞的營養(yǎng)和生長環(huán)境,包括培養(yǎng)基的配方、溫度、濕度、氧氣濃度等因素,以保證細(xì)胞的正常生長和代謝。 此外,添加適當(dāng)?shù)纳L因子和細(xì)胞因子也可以提高原代肝細(xì)胞的細(xì)胞活率。例如,添加肝細(xì)胞生長因子、肝細(xì)胞生長抑制因子等可以促進細(xì)胞的增殖和生長,提高細(xì)胞的存活率。 綜上所述,提高原代肝細(xì)胞的細(xì)胞活率需要從多個方面入手,包括選擇合適的動物或人體來源、優(yōu)化細(xì)胞處理方法、調(diào)節(jié)培養(yǎng)環(huán)境和添加適當(dāng)?shù)纳L因子等。這些措施可以有效提高原代肝細(xì)胞的細(xì)胞活率,為其在肝臟生理和病理研究中的應(yīng)用提供了更好的條件。深圳牛原代肝細(xì)胞培養(yǎng)