緩沖液的作用和使用注意事項(xiàng)
一、緩沖液的概念緩沖液(Buffersolution)通常是由弱酸及其共軛堿或弱堿及其共軛酸緩沖對所組成的溶液,能夠在加入一定量其他物質(zhì)時減緩pH的改變。以生物實(shí)驗(yàn)中**常用的一種緩沖液PBS為例,是由Na2HPO4、KH2PO4組成的緩沖對,在PH5.8-8.0范圍內(nèi)有較強(qiáng)的緩沖能力。二、緩沖液的作用緩沖溶液的作用是在有限的范圍內(nèi)調(diào)整溶液的pH值,使待測溶液的酸度符合分析方法所規(guī)定的范圍。例如,苯酚在堿性介質(zhì)及鐵**鉀存在下,可與4-氨基安替比林反應(yīng)生成橙紅色的安替比林染料,為了防止芳香胺類的干擾以pH在10士0.2時**為適宜。為此,就需要在待測溶液中加入氨一氯化錢緩沖溶液調(diào)整和控制待測溶液的pH為10.0士0.2。 緩沖液的濃度會影響其緩沖能力。上海無酚紅緩沖液價格
PBS緩沖液密度和水接近嗎?PBS緩沖液的密度與水接近。?PBS緩沖液,主要成分為Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,這些成分的密度與水的密度相近。PBS緩沖液的作用主要是提供一個穩(wěn)定的pH環(huán)境,用于保護(hù)生物化學(xué)研究中的試劑和細(xì)胞等,同時保持實(shí)驗(yàn)條件的穩(wěn)定性。由于PBS緩沖液的主要成分與水的密度相近,它在水溶液中的行為也與水相似,這使得PBS成為生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的溶液之一。此外,PBS緩沖液可以調(diào)整其成分以適應(yīng)不同的pH值需求,從而在***的pH范圍內(nèi)提供穩(wěn)定的緩沖能力?12??偟膩碚f,PBS緩沖液的密度與水非常接近,這種特性使得PBS在生物化學(xué)研究中得到***應(yīng)用,因?yàn)樗軌蛱峁┮粋€類似于水的環(huán)境,同時保持實(shí)驗(yàn)條件的穩(wěn)定性。?PBS緩沖液的密度與水接近。?PBS緩沖液,主要成分為Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,這些成分的密度與水的密度相近。PBS緩沖液的作用主要是提供一個穩(wěn)定的pH環(huán)境,用于保護(hù)生物化學(xué)研究中的試劑和細(xì)胞等,同時保持實(shí)驗(yàn)條件的穩(wěn)定性。由于PBS緩沖液的主要成分與水的密度相近,它在水溶液中的行為也與水相似,這使得PBS成為生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的溶液之一。此外,PBS緩沖液可以調(diào)整其成分以適應(yīng)不同的pH值需求。 北京緩沖液生產(chǎn)企業(yè)使用pH計可以更準(zhǔn)確地測量pH值的變化,判斷是否為緩沖溶液。
PBS溶液又稱磷酸鹽緩沖溶液,一般選擇Na2HPO4和KH2PO4配制,因?yàn)殁c鹽溶解的較慢。根據(jù)不同pH的溶液,稱量不同質(zhì)量的磷酸鹽,也可以用pH計調(diào)溶液的pH。PBS一般用作支持電解質(zhì)。
配置方法播報編輯采用去離子水、KH2PO4和Na2HPO4·2H2O配制PBS溶液,按以下步驟進(jìn)行:(1) 配制1/15mol/L KH2PO4,即每升水中溶解9.078克KH2PO4;(2) 配制1/15mol/LNa2HPO4·2H2O,即每升水中溶解11.876克Na2HPO4·2H2O;(3) 將18.2%(體積分?jǐn)?shù))KH2PO4溶液和81.8%Na2HPO4·2H2O混合;
淀粉酶活力的測定中緩沖液有什么作用
緩沖液1)緩沖溶液作用原理和pH值當(dāng)往某些溶液中加入一定量的酸和堿時,有阻礙溶液pH變化的作用,稱為緩沖作用,這樣的溶液叫做緩沖溶液.弱酸及其鹽的混合溶液(如HAc與NaAc),弱堿及其鹽的混合溶液(如NH3·H2O與NH4Cl)等都是緩沖溶液.由弱酸HA及其鹽NaA所組成的緩沖溶液對酸的緩沖作用,是由于溶液中存在足夠量的堿A-的緣故.當(dāng)向這種溶液中加入一定量的強(qiáng)酸時,H離子基本上被A-離子消耗:所以溶液的pH值幾乎不變;當(dāng)加入一定量強(qiáng)堿時,溶液中存在的弱酸HA消耗OH-離子而阻礙pH的變化.2)緩沖溶液的緩沖能力在緩沖溶液中加入少量強(qiáng)酸或強(qiáng)堿,其溶液pH值變化不大,但若加入酸,堿的量多時,緩沖溶液就失去了它的緩沖作用.這說明它的緩沖能力是有一定限度的. PBS緩沖液的離子濃度與人體血液相似。
該酶標(biāo)IsC的工作濃度應(yīng)為1/1?600。?????棋盤滴定法選擇包被抗原工作濃度:①用包被液將抗原由1:50開始作比倍稀釋后進(jìn)行包被,洗滌。②將強(qiáng)陽性參考血清、弱陽性參考血清和陰性參考血清用稀釋液作1:100稀釋,加樣,保溫、洗滌。③加按工作濃度稀釋的酶標(biāo)IsC抗體,保溫、洗滌。④加底物顯色。加酸終止反應(yīng)后讀取A值。⑤選擇強(qiáng)陽性參考血清的A值為0.8左右、陰性參考血清的A值小于0.1的包被抗的稀釋度作為工作濃度,從中選取**適工作濃度。?1.2夾心法測抗原?????在夾心ELISA法中,可用棋盤滴定法同時選擇包被抗體和酶標(biāo)抗體的工作濃度。①抗體免*球蛋白用包被緩沖液稀釋至蛋白濃度為10.0、1.0和0.1微克/毫升,分別在ELISA板上進(jìn)行包被,每一濃度包括3個縱行,洗滌。②在1個橫行各包被孔中加入強(qiáng)陽性抗原液,另1橫行加入弱陽性抗原液,第3橫行加入陰性對照液,保溫、洗滌。③將酶標(biāo)抗體用稀釋液稀釋成3個濃度,例如1:1?000、1:5?000和1:25000。分別加入每個包被濃度的1個縱行中,保溫、洗滌。④加底物顯色。加酸終止反應(yīng)后,讀取A值。⑤以強(qiáng)陽性抗原的A值在0.8左右、陰性參考的A值小于0.1的條件作**適條件,據(jù)此選擇包被抗體和酶抗體的工作濃度。緩沖溶液在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中有著重要的意義。安徽有酚紅緩沖液價格查詢
緩沖溶液的作用是在有限的范圍內(nèi)調(diào)整溶液的pH值,使待測溶液的酸度符合分析方法所規(guī)定的范圍。上海無酚紅緩沖液價格
Buffer組份濃度:137mMNaCl,mMKCl,10mMNa2HPO4,2mMKH2PO4配制量:1L配制方法:1.稱量下列試劑,置于1L燒杯中。2.向燒杯中加入約800ml的去離子水,充分?jǐn)嚢枞芙狻?.滴加濃鹽酸將pH值調(diào)節(jié)至,然后加入去離子水將溶液定容至1L。4.高溫高壓**后,室溫保存。注意:上述Buffer中無二價陽離子,如需要,可在配方中補(bǔ)充1mMCaCl2和mMMgCl2。10M醋酸銨組份濃度:10M醋酸銨配制量:100ml配制方法:1.稱量g醋酸銨置于100~200ml燒杯中,加入約30ml的去離子水?dāng)嚢枞芙狻?.加去離子水將溶液定容至100ml。3.使用mm濾膜過濾**。4.密封瓶口于室溫保存。注意:醋酸銨受熱易分解,所以不能高溫高壓**。Tris-HCl平衡苯酚配制方法:1.使用原料:大多數(shù)市售液化苯酚是清亮無色的,無需重蒸餾便可用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。但有些液化苯酚呈粉紅色或黃色,應(yīng)避免使用。同時也應(yīng)避免使用結(jié)晶苯酚,結(jié)晶苯酚必須在160℃對其進(jìn)行重蒸餾除去諸如醌等氧化產(chǎn)物,這些氧化產(chǎn)物可引起磷酸二酯鍵的斷裂或?qū)е翿NA和DNA的交聯(lián)等。因此,苯酚的質(zhì)量對DNA、RNA的提取極為重要,我們推薦使用高質(zhì)量的苯酚進(jìn)行分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。2.操作注意:苯酚腐蝕性極強(qiáng),并可引起嚴(yán)重灼傷,操作時應(yīng)戴手套及防護(hù)鏡等。上海無酚紅緩沖液價格