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空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)原理是什么?當(dāng)組織冷凍切片附在空間轉(zhuǎn)錄組載片上時,條形碼引物結(jié)合并從組織中捕獲鄰近的mRNA。被捕獲的mRNA開始逆轉(zhuǎn)錄,得到的cDNA中包含了空間條形碼。分析Illumina測序結(jié)果中空間條形碼的序列,可以將每個mRNA轉(zhuǎn)錄的序列映射回組織切片中的起始位置。空間轉(zhuǎn)錄組的條形碼逆轉(zhuǎn)錄oligo(dT)引物在顯微鏡載玻片表面的有序附著,空間轉(zhuǎn)錄組使得在mRNA樣品處理和后續(xù)測序過程中位置信息的編碼和獲取成為可能。歐易生物具有上百例空間轉(zhuǎn)錄組項目執(zhí)行經(jīng)驗,致力通過質(zhì)量的服務(wù),助力各位科研工作者取得新的突破。盡管當(dāng)前空間轉(zhuǎn)錄組的數(shù)據(jù)在快速地增長,但尚未有對應(yīng)的數(shù)據(jù)庫來對這些數(shù)據(jù)進行匯總集成。湖南歐易生物空間轉(zhuǎn)錄組質(zhì)量
10x Genomics 公司提供的 Visium 空間基因表達解決方案是目前***一個高通量空間轉(zhuǎn)錄組的商業(yè)化解決方案。該解決方案巧妙的將單細(xì)胞測序技術(shù)原理和組織切片染色結(jié)合在一起,從而研究空間分辨率下整個轉(zhuǎn)錄組 mRNA 的表達情況,同時在同一組織切片中獲得組織學(xué)相關(guān)信息??臻g轉(zhuǎn)錄組相關(guān)的顯微解剖技術(shù)通常分為兩類:機械和光學(xué)。前者包括 Tomo-seq 等,通過沿感興趣軸,利用冷凍切片機進行組織切片,然后在每個切片上均進行 RNA 測序。10x 提供的載玻片分為兩種:用于摸索組織比較好透化時間的組織優(yōu)化玻片和用于正式實驗的基因表達玻片。黑龍江空間轉(zhuǎn)錄組規(guī)格通過空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)可獲取組織中具體的位置轉(zhuǎn)錄信息,為研究和診斷提供有效數(shù)據(jù)支撐。
人類細(xì)胞圖譜項目的主要目標(biāo)之一是描述所有細(xì)胞類型的空間關(guān)系。同時基于表達特征對多種細(xì)胞類型進行空間映射,有助于研究不同細(xì)胞類型之間的相互作用。已經(jīng)發(fā)展了一些策略來檢測單細(xì)胞分辨率的空間基因表達譜,如Slide-seq、seqFISH或MERFISH。為了更有效地為研究群體探索空間基因表達數(shù)據(jù),我們構(gòu)建了SpatialDB數(shù)據(jù)庫用于空間解析的轉(zhuǎn)錄組。
人類細(xì)胞圖譜項目極大地推動了單細(xì)胞水平的生命科學(xué)研究??臻g轉(zhuǎn)錄組學(xué)技術(shù)的發(fā)展和空間基因表達數(shù)據(jù)的快速積累是未來的發(fā)展趨勢。我們將繼續(xù)收集新的技術(shù)和數(shù)據(jù)集來更新SpatialDB。此外,我們將整合更多的工具和數(shù)據(jù)源來分析數(shù)據(jù).
許多當(dāng)前時代空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)的基礎(chǔ)都是在自七十年代以來的幾十年間建立的。例如,于1976 年首先使用紫外線激光來切割組織。當(dāng)前流行的技術(shù),例如空間轉(zhuǎn)錄組學(xué)(ST)和 10X Visium 依靠這種微陣列技術(shù),區(qū)別就在于是從放置在微陣列載玻片上的組織上而不是從溶液中來捕獲轉(zhuǎn)錄本信息。當(dāng)前時代的空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)大致分為五類方向:激光顯微切割(LCM),單分子熒光原位雜交(smFISH),靶向原位測序(ISS),原位陣列捕獲和 其他非成像技術(shù)??臻g轉(zhuǎn)錄組避免了組織中細(xì)胞位置信息的丟失。
空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)包含兩種芯片,分別為組織優(yōu)化芯片(Tissue Optimization)和基因表達芯片(Library Preparation)。組織優(yōu)化芯片用來摸索組織透化的比較好時間,基因表達芯片用來進行正式樣本的空間轉(zhuǎn)錄組實驗。其中基因表達芯片上有 4 個捕獲區(qū)域,每個區(qū)域大小為 6.5mm×6.5mm,每個捕獲區(qū)域中有 5000 個帶有特異地址序列的探針簇,稱為 barcoded spots,每個 spot 直徑為 55um,包含數(shù)百萬個用于捕獲的 oligo 探針序列,相鄰兩個 spot 的中心距離為 100um。探針序列的結(jié)構(gòu)為:測序引物結(jié)合序列,16nt 的位置序列,12nt 的 UMI 序列以及 30nt 的 oligo-dT 序列??臻g轉(zhuǎn)錄組的組學(xué)板塊包括cDNA的合成、擴增、接頭連接和測序,記錄切片的轉(zhuǎn)錄本信息和空間位置信息 。江西空間轉(zhuǎn)錄組有什么用
本次培訓(xùn)班旨在跟廣大科研工作者介紹空間轉(zhuǎn)錄組的研究熱點和方案設(shè)計。湖南歐易生物空間轉(zhuǎn)錄組質(zhì)量
當(dāng)前的技術(shù)主要有四種策略:1、基于組學(xué)實驗結(jié)合空間重建的計算策略。這種計算方法可以充分利用內(nèi)在基因表達模式或共表達的趨勢,從單個細(xì)胞的大量轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)中重構(gòu)細(xì)胞間的環(huán)境。然而,這些推論方法在某些情況下*呈現(xiàn)空間趨勢或特定組織的總體布局。2、激光切割與NGS測序結(jié)合的策略?;贚CM的轉(zhuǎn)錄組學(xué)或基因組學(xué)成功地獲得了單個細(xì)胞的空間轉(zhuǎn)錄組,盡管其通量很低,但是在可以標(biāo)記成千上萬個單個細(xì)胞位置的多路復(fù)用條形碼策略可行之前,將少量細(xì)胞的數(shù)據(jù)粗略地整合到構(gòu)成***的巨大背景中,可能具有一定價值。3、基于熒光物質(zhì)原位的轉(zhuǎn)錄組學(xué)。基于圖像的原位轉(zhuǎn)錄組學(xué)在很大程度上增加了可檢測區(qū)域,但也存在一些問題,例如幾種smFISH方法很難從包括信號干擾、轉(zhuǎn)錄本積累等復(fù)雜背景中提取單個細(xì)胞。4、基于寡核苷酸的空間條碼加上NGS測序。費用較高且無法在單個細(xì)胞中獲得轉(zhuǎn)錄組。湖南歐易生物空間轉(zhuǎn)錄組質(zhì)量
上海歐易生物醫(yī)學(xué)科技有限公司是一家檢驗檢測服務(wù)。(依法須經(jīng)批準(zhǔn)的項目,經(jīng)相關(guān)部門批準(zhǔn)后方可開展經(jīng)營活動,具體經(jīng)營項目以相關(guān)部門批準(zhǔn)文件或許可證件為準(zhǔn))一般項目:生物醫(yī)藥產(chǎn)品、生化產(chǎn)品的研發(fā),醫(yī)藥中間體、化工原料及產(chǎn)品(除危險品化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、易制毒化學(xué)品)的研發(fā)、銷售,儀器儀表的銷售,并提供相關(guān)技術(shù)咨詢、技術(shù)服務(wù),會務(wù)服務(wù),企業(yè)管理咨詢。的公司,致力于發(fā)展為創(chuàng)新務(wù)實、誠實可信的企業(yè)。歐易生物擁有一支經(jīng)驗豐富、技術(shù)創(chuàng)新的專業(yè)研發(fā)團隊,以高度的專注和執(zhí)著為客戶提供科研服務(wù),科研檢測,學(xué)術(shù)研究,技術(shù)咨詢。歐易生物致力于把技術(shù)上的創(chuàng)新展現(xiàn)成對用戶產(chǎn)品上的貼心,為用戶帶來良好體驗。歐易生物始終關(guān)注自身,在風(fēng)云變化的時代,對自身的建設(shè)毫不懈怠,高度的專注與執(zhí)著使歐易生物在行業(yè)的從容而自信。