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如果只是通過空間轉(zhuǎn)錄組或者單細胞轉(zhuǎn)錄組,研究人員在兩個樣本中均可以發(fā)現(xiàn)淋巴細胞相關(guān)基因或者淋巴細胞群,無法解釋兩個樣本預后之間的差異。但是通過空間轉(zhuǎn)錄組,就能很清晰看到兩個樣本之間的差異。作者借助空間轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)探究人類心臟在發(fā)育過程中的基因表達特征和細胞圖譜變化,發(fā)現(xiàn)對于每個發(fā)育階段的不同解剖區(qū)域,都有獨特的基因表達特征。結(jié)合單細胞轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù),作者進一步確定和豐富了胚胎心臟基因表達的空間注釋信息。 早期空間轉(zhuǎn)錄組學的另一條發(fā)展路線是基因捕獲和增強子捕獲篩選。實力空間轉(zhuǎn)錄組使用
空間轉(zhuǎn)錄組研究的的必要性。研究單細胞我們想要探究細胞間的異質(zhì)性,但是常規(guī)的單細胞是將細胞解離成單細胞懸液,然后利用單細胞分離技術(shù)(微孔,微板,液滴)等方法實現(xiàn)單細胞建庫,這里比較大的問題是是細胞失去了原本在組織的空間信息。然而這個空間信息在實際研究中有很重要。特別是在研究細胞命運機制及細胞譜系發(fā)生空間位置的信息顯得尤為重要,因此發(fā)展空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)實現(xiàn)細胞的位置信息的保留,對研究此類細胞狀態(tài)尤為必要。黑龍江空間轉(zhuǎn)錄組除了皮膚、胰腺和骨頭組織外,其余樣本類型均可開展10x Genomics空間轉(zhuǎn)錄組研究。
10x Genomics 公司提供的 Visium 空間基因表達解決方案是目前***一個高通量空間轉(zhuǎn)錄組的商業(yè)化解決方案。該解決方案巧妙的將單細胞測序技術(shù)原理和組織切片染色結(jié)合在一起,從而研究空間分辨率下整個轉(zhuǎn)錄組 mRNA 的表達情況,同時在同一組織切片中獲得組織學相關(guān)信息??臻g轉(zhuǎn)錄組相關(guān)的顯微解剖技術(shù)通常分為兩類:機械和光學。前者包括 Tomo-seq 等,通過沿感興趣軸,利用冷凍切片機進行組織切片,然后在每個切片上均進行 RNA 測序。10x 提供的載玻片分為兩種:用于摸索組織比較好透化時間的組織優(yōu)化玻片和用于正式實驗的基因表達玻片。
10x Genomics空間轉(zhuǎn)錄組的實現(xiàn)原理是什么?10x Genomics空間轉(zhuǎn)錄組用于文庫構(gòu)建的每張載玻片上有四個捕獲區(qū)域,每個捕獲區(qū)域的大小為6.5x6.5mm,包含5000個被條形碼標記的點(barcoded spots),每個點的直徑為55 μm,點和點之間中心的距離為100 μm,并且每個點都有一個barcode序列。組織切片的細胞中會釋放出mRNA,遷移到每個spot的mRNA會被標記上相應(yīng)的barcode序列,然后進行文庫構(gòu)建并進行測序。根據(jù)數(shù)據(jù)的條形碼信息對數(shù)據(jù)進行分析,以確定哪些數(shù)據(jù)來自哪個位置,從而實現(xiàn)空間基因表達的可視化。 空間轉(zhuǎn)錄組組織學板塊包括樣品的包埋、切片、固定、染色及成像,記錄切片的形態(tài)學信息。
空間轉(zhuǎn)錄組是在組織原位檢測基因表達的一種技術(shù),與bulk RNA-seq或單細胞轉(zhuǎn)錄組測序相比,空間轉(zhuǎn)錄組避免了組織中細胞位置信息的丟失,使得我們在檢測基因表達的同時獲得基因在組織內(nèi)部的空間位置信息。正是由于空間轉(zhuǎn)錄組可以從多維度解析生物學過程的特點,近年來關(guān)于空間轉(zhuǎn)錄組無論是在技術(shù)開發(fā),還是大規(guī)模應(yīng)用或商業(yè)化,都得到蓬勃發(fā)展。例如2019年4月,Science發(fā)文通過空間轉(zhuǎn)錄組揭示ALS(肌萎縮側(cè)索硬化癥,又稱漸凍癥)分子病理的時空動態(tài);2019年8月,Nature在線發(fā)表了景乃禾團隊解析小鼠早期胚胎細胞的時空表達數(shù)據(jù);2020年9月,Cell上發(fā)表了一篇利用空間轉(zhuǎn)錄組解析人鱗狀細胞*的文章;2021年1月,Science發(fā)表了將組織擴展和原位RNA測序結(jié)合起來的新型空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)ExSeq;2021年4月,10x Genomics公司宣布了新一代FFPE空間轉(zhuǎn)錄組商業(yè)化解決方案。通過空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)可獲取組織中具體的位置轉(zhuǎn)錄信息,為研究和診斷提供有效數(shù)據(jù)支撐。遼寧應(yīng)用空間轉(zhuǎn)錄組
除大腦以外的其他***的技術(shù)現(xiàn)代化,將為開發(fā)有用的空間轉(zhuǎn)錄組學地圖集提供廣闊的前景。實力空間轉(zhuǎn)錄組使用
空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)原理是什么?當組織冷凍切片附在空間轉(zhuǎn)錄組載片上時,條形碼引物結(jié)合并從組織中捕獲鄰近的mRNA。被捕獲的mRNA開始逆轉(zhuǎn)錄,得到的cDNA中包含了空間條形碼。分析Illumina測序結(jié)果中空間條形碼的序列,可以將每個mRNA轉(zhuǎn)錄的序列映射回組織切片中的起始位置。空間轉(zhuǎn)錄組的條形碼逆轉(zhuǎn)錄oligo(dT)引物在顯微鏡載玻片表面的有序附著,空間轉(zhuǎn)錄組使得在mRNA樣品處理和后續(xù)測序過程中位置信息的編碼和獲取成為可能。歐易生物具有上百例空間轉(zhuǎn)錄組項目執(zhí)行經(jīng)驗,致力通過質(zhì)量的服務(wù),助力各位科研工作者取得新的突破。實力空間轉(zhuǎn)錄組使用
上海歐易生物醫(yī)學科技有限公司發(fā)展規(guī)模團隊不斷壯大,現(xiàn)有一支專業(yè)技術(shù)團隊,各種專業(yè)設(shè)備齊全。致力于創(chuàng)造***的產(chǎn)品與服務(wù),以誠信、敬業(yè)、進取為宗旨,以建歐易生物產(chǎn)品為目標,努力打造成為同行業(yè)中具有影響力的企業(yè)。公司不僅*提供專業(yè)的檢驗檢測服務(wù)。(依法須經(jīng)批準的項目,經(jīng)相關(guān)部門批準后方可開展經(jīng)營活動,具體經(jīng)營項目以相關(guān)部門批準文件或許可證件為準)一般項目:生物醫(yī)藥產(chǎn)品、生化產(chǎn)品的研發(fā),醫(yī)藥中間體、化工原料及產(chǎn)品(除危險品化學品、監(jiān)控化學品、易制毒化學品)的研發(fā)、銷售,儀器儀表的銷售,并提供相關(guān)技術(shù)咨詢、技術(shù)服務(wù),會務(wù)服務(wù),企業(yè)管理咨詢。,同時還建立了完善的售后服務(wù)體系,為客戶提供良好的產(chǎn)品和服務(wù)。上海歐易生物醫(yī)學科技有限公司主營業(yè)務(wù)涵蓋科研服務(wù),科研檢測,學術(shù)研究,技術(shù)咨詢,堅持“質(zhì)量保證、良好服務(wù)、顧客滿意”的質(zhì)量方針,贏得廣大客戶的支持和信賴。