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空間轉(zhuǎn)錄組(Spatial Transcriptomics)就是將基因的表達(dá)情況與關(guān)注的組織切片的免疫化學(xué)染色圖像進(jìn)行整合,從而將組織內(nèi)不同細(xì)胞的基因表達(dá)信息定位到組織的原始空間位置上去,進(jìn)而直接觀測(cè)組織中不同部位功能區(qū)基因表達(dá)的差異。空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)利用了常規(guī)的原位技術(shù)和組學(xué)技術(shù)兩方面的優(yōu)勢(shì)。目前已發(fā)表的關(guān)于空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)有主要有 Spatial Transcriptomics, Slide-seq, LCM-seq, seqFISH, MERFISH, Liver single cell zonation, Geo-seq 和 Tomo-seq, 涉及物種有人、小鼠、果蠅、秀麗隱桿線(xiàn)蟲(chóng)、斑馬魚(yú)、擬南芥、楊樹(shù)和云杉等。歐易生物具有上百例空間轉(zhuǎn)錄組項(xiàng)目執(zhí)行經(jīng)驗(yàn),致力通過(guò)質(zhì)量的服務(wù),助力各位科研工作者取得新的突破。重慶空間轉(zhuǎn)錄組應(yīng)用
空間重構(gòu)的計(jì)算策略:這種計(jì)算方法可以充分利用內(nèi)在基因表達(dá)模式或共表達(dá)的趨勢(shì),從單個(gè)細(xì)胞的大量轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)中重構(gòu)細(xì)胞間的環(huán)境。然而,這些推論方法在某些情況下*呈現(xiàn)空間趨勢(shì)或特定組織的總體布局。基于LCM的方法:基于LCM的轉(zhuǎn)錄組學(xué)或基因組學(xué)成功地獲得了單個(gè)細(xì)胞的空間轉(zhuǎn)錄組,盡管其通量很低,但是在可以標(biāo)記成千上萬(wàn)個(gè)單個(gè)細(xì)胞位置的多路復(fù)用條形碼策略可行之前,將少量細(xì)胞的數(shù)據(jù)粗略地整合到構(gòu)成***的巨大背景中,可能具有一定價(jià)值?;趫D像的原位轉(zhuǎn)錄組學(xué):基于圖像的原位轉(zhuǎn)錄組學(xué)在很大程度上增加了可檢測(cè)區(qū)域,但也存在一些問(wèn)題,例如幾種smFISH方法很難從包括信號(hào)干擾、轉(zhuǎn)錄本積累等復(fù)雜背景中提取單個(gè)細(xì)胞??臻g條形碼加高通量:費(fèi)用較高且無(wú)法在單個(gè)細(xì)胞中獲得轉(zhuǎn)錄組。浙江10x空間轉(zhuǎn)錄組10X Visium空間轉(zhuǎn)錄組的實(shí)驗(yàn)主要分為兩部分:組織學(xué)板塊和組學(xué)板塊。
一些實(shí)現(xiàn)空間轉(zhuǎn)錄組學(xué)的重要技術(shù),**早可以追溯到二十世紀(jì)七十年代,長(zhǎng)期以來(lái),各種形式的原位雜交技術(shù)(ISH)已用于可視化空間中的基因表達(dá)。從技術(shù)原理中不難看出,空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)**為特殊的載玻片。ISS 方法通常通過(guò)基于連接(SBL)或者基于合成(SBS) 的原位測(cè)序, 確定靶向基因序列或非靶向的 cDNA 短片段,**終獲得空間轉(zhuǎn)錄組信息。根據(jù)測(cè)序鏈接策略的不同(SOLiD,cPAL和SEDAL),基于 SBL 的原位測(cè)序技術(shù)方法的代表性技術(shù)分別為 FISSEQ,ISS,STARmap。
歐易生物自引進(jìn)10x Visium空間轉(zhuǎn)錄組以來(lái)已經(jīng)完成了上百例樣本測(cè)序,在樣本包埋、切片、實(shí)驗(yàn)和數(shù)據(jù)分析上積累了大量寶貴的經(jīng)驗(yàn)。本次培訓(xùn)班旨在跟廣大科研工作者介紹空間轉(zhuǎn)錄組的研究熱點(diǎn)和方案設(shè)計(jì),分享歐易生物在樣本處理、實(shí)驗(yàn)和數(shù)據(jù)挖掘上的成功經(jīng)驗(yàn),助力各位科研工作者取得新的突破。招生對(duì)象:A、對(duì)空間轉(zhuǎn)錄組感興趣,期望了解空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù),或近期準(zhǔn)備開(kāi)展空間轉(zhuǎn)錄組測(cè)序項(xiàng)目B、項(xiàng)目已經(jīng)開(kāi)展,需要深入挖掘數(shù)據(jù)的科研工作者。在未來(lái)的5-10年里,空間轉(zhuǎn)錄組學(xué)妥妥的是技術(shù)熱點(diǎn)。
廣義上來(lái)說(shuō),目前一共有4種解析“空間性轉(zhuǎn)錄組”的策略:2.第一種是利用計(jì)算機(jī)算法,根據(jù)單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)來(lái)模擬重構(gòu)組織的空間形態(tài)。例如Seurat,這是一個(gè)在單細(xì)胞數(shù)據(jù)分析中***用到的R包,我們可以利用scRNA-seq數(shù)據(jù),加上對(duì)markegene進(jìn)行原位測(cè)序的結(jié)果來(lái)重構(gòu)組織的空間信息。3.第二種,激光顯微切割+二代測(cè)序(LCM+NGS)。這種技術(shù)對(duì)儀器和實(shí)驗(yàn)人員的操作要求較高,而且獲取的通量也比較低,如果組織非常珍貴或者研究的內(nèi)容十分精細(xì),可以考慮這個(gè)。但是這種策略比較難被官方干運(yùn)用。4.第三種策略,就是基于高分辨圖像的原位測(cè)序。**經(jīng)典的是smFISH當(dāng)然,這種方法的通量比較低。當(dāng)然隨著技術(shù)的發(fā)現(xiàn),剛發(fā)布的FISH-seq技術(shù)通過(guò)多輪雜交的方式,已經(jīng)把測(cè)序通量提高到了10000+個(gè)轉(zhuǎn)錄本。5.***就是“基于空間條形碼(spatialbarcodes)的空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)。本文主要討論的也就是這種技術(shù)。后面主要討論的都是基于這種策略。 10x? Genomics空間轉(zhuǎn)錄組用于文庫(kù)構(gòu)建的每張載玻片上有四個(gè)捕獲區(qū)域,每個(gè)捕獲區(qū)域的大小為6.5x6.5mm。黑龍江歐易生物空間轉(zhuǎn)錄組是什么
通過(guò)培訓(xùn)系統(tǒng)掌握空間轉(zhuǎn)錄組測(cè)序原理和方案設(shè)計(jì)思路,助力科學(xué)研究。重慶空間轉(zhuǎn)錄組應(yīng)用
空間轉(zhuǎn)錄組的應(yīng)用有哪些?一、發(fā)現(xiàn)疾病的空間異質(zhì)性:同時(shí)了解患病組織中的細(xì)胞類(lèi)型及其定位有助于解決空間分辨的轉(zhuǎn)錄組學(xué)問(wèn)題。在不同的環(huán)境下,明智地選擇這些方法在生物學(xué)研究中也是至關(guān)重要的,例如在神經(jīng)科學(xué)中,基于FISH的方法很普遍;基于LCM的方法適用于小樣本(例如臨床樣本)以及整個(gè)轉(zhuǎn)錄組或基因組分析。二、構(gòu)建空間轉(zhuǎn)錄組圖譜:借助于空間分辨的單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組學(xué),建立圖譜可能是在分子水平上研究生物體結(jié)構(gòu)的重要步驟。目前的多項(xiàng)研究通過(guò)單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組技術(shù)結(jié)合空間轉(zhuǎn)錄技術(shù),得到多個(gè)***的時(shí)空轉(zhuǎn)錄組圖譜(相關(guān)研究后續(xù)會(huì)在如下專(zhuān)輯更新)。重慶空間轉(zhuǎn)錄組應(yīng)用
上海歐易生物醫(yī)學(xué)科技有限公司是一家檢驗(yàn)檢測(cè)服務(wù)。(依法須經(jīng)批準(zhǔn)的項(xiàng)目,經(jīng)相關(guān)部門(mén)批準(zhǔn)后方可開(kāi)展經(jīng)營(yíng)活動(dòng),具體經(jīng)營(yíng)項(xiàng)目以相關(guān)部門(mén)批準(zhǔn)文件或許可證件為準(zhǔn))一般項(xiàng)目:生物醫(yī)藥產(chǎn)品、生化產(chǎn)品的研發(fā),醫(yī)藥中間體、化工原料及產(chǎn)品(除危險(xiǎn)品化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、易制毒化學(xué)品)的研發(fā)、銷(xiāo)售,儀器儀表的銷(xiāo)售,并提供相關(guān)技術(shù)咨詢(xún)、技術(shù)服務(wù),會(huì)務(wù)服務(wù),企業(yè)管理咨詢(xún)。的公司,致力于發(fā)展為創(chuàng)新務(wù)實(shí)、誠(chéng)實(shí)可信的企業(yè)。歐易生物擁有一支經(jīng)驗(yàn)豐富、技術(shù)創(chuàng)新的專(zhuān)業(yè)研發(fā)團(tuán)隊(duì),以高度的專(zhuān)注和執(zhí)著為客戶(hù)提供科研服務(wù),科研檢測(cè),學(xué)術(shù)研究,技術(shù)咨詢(xún)。歐易生物致力于把技術(shù)上的創(chuàng)新展現(xiàn)成對(duì)用戶(hù)產(chǎn)品上的貼心,為用戶(hù)帶來(lái)良好體驗(yàn)。歐易生物創(chuàng)始人張怡,始終關(guān)注客戶(hù),創(chuàng)新科技,竭誠(chéng)為客戶(hù)提供良好的服務(wù)。