酵母文庫:細菌鞭毛蛋白是一種重要的細菌毒力因子,可刺激動植物細胞中的分子免疫信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。脊椎動物識別鞭毛蛋白和建立有效免疫反應(yīng)的詳細機制已經(jīng)被揭示;然而,無脊椎動物是否能夠識別鞭毛蛋白仍未可知。2022年1月24日,山東大學(xué)王顯偉團隊在PLOSPATHOGENS(IF:6.823)上發(fā)表了題為“Shoc2regnizesbacterialflagellinandmediatesantibacterialErk/Statsignalinginaninvertebrate”的研究論文,揭示了MjShoc2可以與鞭毛蛋白FlaA互作,引發(fā)一系列炎癥反應(yīng),促使對蝦抵抗細菌***,為無脊椎動物對鞭毛蛋白的感知機制提供了見解。該項目中所用的對蝦酵母文庫由歐易生物構(gòu)建。歐易生物結(jié)合多年的文庫構(gòu)建經(jīng)驗。江蘇實力酵母文庫做什么
通過酵母雙雜篩選實驗,進一步研究AaWRKY9蛋白功能,結(jié)果篩選到了與AaWRKY9互作的AaJAZ9蛋白,并通過Y2H、BiFC、CoIP等進行了驗證確認。JAZs是JA介導(dǎo)的植物相應(yīng)中的負向調(diào)控因子,在毛狀體和老葉中高表達,在芽尖和嫩葉中表達量低。為確認AaJAZ9是否抑制了AaWRKY9在促進青蒿素積累過程中的轉(zhuǎn)錄***功能,通過雙熒光素酶報告基因檢測實驗發(fā)現(xiàn),當AaWRKY9與AaJAZ9共表達時,其轉(zhuǎn)錄活性被抑制,而使用MeJA處理后,這種抑制作用被抵消,且AaWRKY9轉(zhuǎn)錄活性增強,反向驗證實驗結(jié)果一致。說明JA可以通過降解JAZ9,提高AaWRKY9轉(zhuǎn)錄活性,促進青蒿素生物合成。北京發(fā)展酵母文庫報價酵母文庫篩選研究多年建庫與篩選經(jīng)驗驗證。
酵母雙雜交實驗表明,PtMADS11 與 PtDAL1 之間存在直接的相互作用(圖 C),并通過 BiFC、GST pull-down 得以證實(圖 D-E)。為進一步研究在年齡信號調(diào)控中的作用機制,分別構(gòu)建了過表達PtDAL1和PtMADS11的擬南芥。與對照相比,過表達PtDAL1***提前了擬南芥的營養(yǎng)-生殖時相轉(zhuǎn)換(圖A),證實PtDAL1在生殖起始和控制花***建立起到了關(guān)鍵作用。過表達PtMADS11植株在短日照下表現(xiàn)出早開花和花序結(jié)構(gòu)過早終止,表明PtMADS11在開花調(diào)節(jié)和花序內(nèi)分生組織命運起到調(diào)控作用。在擬南芥中利用年齡調(diào)控通路不同節(jié)點關(guān)鍵基因突變體進行功能互補實驗,結(jié)果顯示過表達PtDAL1可以恢復(fù)由于過表達miR156導(dǎo)致的開花延遲,但ft缺失會導(dǎo)致PtDAL1失活,PtDAL1過表達也不能恢復(fù)soc1-1-2突變體的表型,表明PtDAL1依賴或處于FT/SOC1的上游。而過表達PtMADS11可以恢復(fù)由過表達miR156或ft缺失導(dǎo)致的開花延遲,表明PtMADS11對開花的調(diào)控不依賴于miR156或FT。
酵母雙雜交篩選實驗:為進一步了解LEA3蛋白在干旱脅迫下調(diào)控植物生長和增強抗旱性的分子機制,本研究以干旱脅迫條件下的棉花根莖葉為材料,構(gòu)建了棉花干旱脅迫酵母文庫。并以GhLEA3為誘餌,采用酵母雙雜交篩選實驗,從棉花酵母文庫中篩選獲得了GhLEA3互作蛋白,并對互作蛋白進行了GO和KEGG分析,發(fā)現(xiàn)其中的互作蛋白GhVDAC1主要參與鈣信號通路和cGMP-PKG信號通路,互作蛋白Gh***A參與多種生物途徑,如糖原生成和代謝途徑。此外,GhVDAC1和Gh***A受干旱脅迫誘導(dǎo)表達***,且在GhLEA3敲除的棉株中表達量低于野生型棉株歐易生物持續(xù)為眾多植物學(xué)方向的研究學(xué)者提供持久可靠的科研助力。
酵母單雜交結(jié)果顯示,磷酸鹽饑餓響應(yīng)因子OsPHR1/2/3可以***51個目標啟動子中的25個,包括OsRAM1、OsRAD1、OsWRI5A等。OsRAM1、OsRAD1、OsWRI5A自身又可以調(diào)控許多菌根共生相關(guān)基因的表達(圖A)。對叢枝菌根共生響應(yīng)基因啟動子序列預(yù)測分析顯示,有78個轉(zhuǎn)錄因子被富集,87%的菌根共生響應(yīng)基因受到OsPHR1/2/3的調(diào)控,其中42%受到OsPHR1/2/3的直接調(diào)控。因此推測OsPHR1/2/3可能是菌根共生調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中的一個關(guān)鍵調(diào)控樞紐(圖A-B)。EMSA和熒光素酶報告實驗證實,OsPHR12可以直接結(jié)合并***OsRAM1、OsWRI5A、OsPT11、OsAMT3啟動子序列(圖C-F),并且這種結(jié)合依賴于啟動子中的P1BS元件(圖G)。酵母結(jié)構(gòu)及功能介紹酵母的應(yīng)用。黑龍江什么是酵母文庫報價
文庫篩選經(jīng)驗 與上千所高校及科研院所合作 完成年均400多個物種的文庫構(gòu)建及篩選 。江蘇實力酵母文庫做什么
利用酵母文庫進行雙雜交篩選,結(jié)果顯示 MdBT2 可以與 MdRGL3a 結(jié)合。MdRGL3a 編碼 GA 信號阻遏物 DELLA 蛋白,主要分布于細胞核中。MdRGL3a 對于 GA 處理非常敏感,可以引起其發(fā)生降解,PAC 處理可以提高其穩(wěn)定性。進一步的酵母一對一雜交驗證實驗表明,兩者的結(jié)合依賴于 MdBT2 的 BTB 和 BACK 結(jié)構(gòu)域、MdRGL3a 的 LHRI 和 SAW motif(圖 A-B)。并通過 GST pull-down、BiFC 實驗也證實了 MdBT2與 MdRGL3a 的結(jié)合(圖 C-D)。細胞外降解實驗顯示,與對照相比,MdRGL3a 與過表達 MdBT2 的愈傷組織的總蛋白共同孵育,會導(dǎo)致 MdRGL3a 的降解加快;而與抑制 MdBT2 表達的愈傷組織的總蛋白共同孵育,會導(dǎo)致 MdRGL3a 的降解減緩(圖 A)。并且蛋白酶體抑制劑 MG132 可以***抑制 MdRGL3a 的降解(圖 B)。改變 MdRGL3a 表達量并不影響 MdBT2 的降解。以上結(jié)果表明,MdRGL3a 可能通過 26S 蛋白酶體途徑發(fā)生降解,而 MdBT2 可以抑制 MdRGL3a 的降解。江蘇實力酵母文庫做什么
上海歐易生物醫(yī)學(xué)科技有限公司目前已成為一家集產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、銷售相結(jié)合的服務(wù)型企業(yè)。公司成立于2009-03-10,自成立以來一直秉承自我研發(fā)與技術(shù)引進相結(jié)合的科技發(fā)展戰(zhàn)略。本公司主要從事科研服務(wù),科研檢測,學(xué)術(shù)研究,技術(shù)咨詢領(lǐng)域內(nèi)的科研服務(wù),科研檢測,學(xué)術(shù)研究,技術(shù)咨詢等產(chǎn)品的研究開發(fā)。擁有一支研發(fā)能力強、成果豐碩的技術(shù)隊伍。公司先后與行業(yè)上游與下游企業(yè)建立了長期合作的關(guān)系。歐易生物致力于開拓國內(nèi)市場,與醫(yī)藥健康行業(yè)內(nèi)企業(yè)建立長期穩(wěn)定的伙伴關(guān)系,公司以產(chǎn)品質(zhì)量及良好的售后服務(wù),獲得客戶及業(yè)內(nèi)的一致好評。上海歐易生物醫(yī)學(xué)科技有限公司以先進工藝為基礎(chǔ)、以產(chǎn)品質(zhì)量為根本、以技術(shù)創(chuàng)新為動力,開發(fā)并推出多項具有競爭力的科研服務(wù),科研檢測,學(xué)術(shù)研究,技術(shù)咨詢產(chǎn)品,確保了在科研服務(wù),科研檢測,學(xué)術(shù)研究,技術(shù)咨詢市場的優(yōu)勢。