酵母文庫(kù)實(shí)驗(yàn)由歐易生物完成。6.902)在線發(fā)表了題為“MKK4-MPK3-WRKY17-mediated salicylic acid degradation increases susceptibility to Glomerella leaf spot in apple”的研究論文,報(bào)道了一個(gè)蘋果炭疽葉枯病易感相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子 MdWRKY17,并對(duì)其作用機(jī)制進(jìn)行了詳細(xì)探討。蘋果是世界上頗受歡迎的水果。蘋果炭疽葉枯病(Glomerellaleafspot,GLS)在我國(guó)多次爆發(fā),是蘋果相當(dāng)有毀滅性的***病害之一,嚴(yán)重影響蘋果質(zhì)量和產(chǎn)量。但目前在蘋果中尚未鑒定出GLS的抗性基因。專業(yè)化的篩庫(kù)流程,多重質(zhì)檢保證質(zhì)量。初篩+復(fù)篩提高目標(biāo)陽(yáng)性克隆質(zhì)粒精確度。湖北什么是酵母文庫(kù)做什么
酵母雙雜交、pulldown和BiFC實(shí)驗(yàn)均顯示,MdTRB1可以通過(guò)其C末端與JAZ1蛋白互作。在蘋果葉片和愈傷組織中過(guò)表達(dá)MdJAZ1,花青素和原花青素的累積受到明顯抑制。在蘋果葉片和愈傷組織***表達(dá)MdJAZ1/MdJAZ1,結(jié)果顯示過(guò)表達(dá)MdJAZ1抑制了MdTRB1對(duì)花青素和原花青素累積的促進(jìn)作用。Pull down 實(shí)驗(yàn)和熒光素酶互補(bǔ)成像實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,在 MdJAZ1 存在下,MdTRB1 與 MdMYB9 的結(jié)合減弱(圖 a-c);外源施加 JA 可以部分恢復(fù) MdTRB1 與 MdMYB9 的結(jié)合。對(duì)于 MdTRB1 在 JA 介導(dǎo)的花青素和原花青素積累中的作用機(jī)制,本研究建立了一個(gè)新的模型:MdTRB1 通過(guò)與 MdMYB9 互作,增強(qiáng)了 MdMYB9 對(duì)下游基因的轉(zhuǎn)錄***活性,進(jìn)而正向調(diào)節(jié)了 JA 介導(dǎo)的花青素和原花青素累積。在 JA 缺乏的條件下,MdJAZ1 與 MdTRB1 互作,干擾了 MdTRB1 與 MdMYB9 之間的結(jié)合;在 JA 存在的條件下,MdJAZ1 被降解,MdTRB1 被釋放出來(lái)以參與后續(xù)過(guò)程。湖北什么是酵母文庫(kù)做什么酵母雜交技術(shù)是很巧妙且很好用的蛋白/蛋白,蛋白/DNA等分子互作檢測(cè)的技術(shù)。
酵母文庫(kù):近日,上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物育種栽培研究所儲(chǔ)黃偉副研究員、曹黎明研究員為共同通訊作者,在Plant,Cell&Environment雜志(IF:7.228)在線發(fā)表了題為“Aconservedclathrin-coatedvesiclecomponent,OsSCYL2,regulatesplantinnateimmunityinrice”的研究論文,報(bào)道了水稻中一個(gè)被網(wǎng)格蛋白包被囊泡的一個(gè)重要組分OsSCYL2調(diào)控稻水先天免疫的分子機(jī)制。上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物所碩士研究生姚瑤和周繼華助理研究員為該論文的共同***作者。文章中酵母雙雜交實(shí)驗(yàn)由歐易生物完成。
酵母單雜交測(cè)試:為驗(yàn)證該文庫(kù)在Y2H和Y1H體系中的有效性,作者以O(shè)sMADS1為誘餌篩選水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫(kù),進(jìn)行了酵母雙雜交測(cè)試。以Ghd7的啟動(dòng)子片段為誘餌,進(jìn)行了酵母單雜交測(cè)試。結(jié)果顯示我們的水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫(kù)可以有效且高通量的檢測(cè)蛋白-水稻TF、DNA-水稻TF間的相互作用。另外,該研究中指出,使用該文庫(kù)篩選鑒定蛋白-TF互作,采用mating法較為方便,即Y2HGold-Bait誘餌菌液與Y187-TF文庫(kù)菌液一對(duì)一雜交。而篩選鑒定DNA-TF互作,采用Y1HGold系統(tǒng),即Y1HGold-pomoter篩選TF文庫(kù)質(zhì)粒更簡(jiǎn)單高效。此外,可通過(guò)降低篩選壓力處理,進(jìn)行弱相互作用的檢測(cè)。酵母有那些結(jié)構(gòu)及各部分的功能是什么。
通過(guò)傳統(tǒng)的酵母雙雜交系統(tǒng),以PtDAL1為誘餌,篩選樣本來(lái)源于不同年齡段的油松cDNA文庫(kù)。將獲得的陽(yáng)性克隆,10個(gè)一組,挑選到1個(gè)96孔板的PCR板孔中,獲得10*96個(gè)陽(yáng)性克隆的96孔板。以其中陽(yáng)性克隆mix為模板,進(jìn)行PCR擴(kuò)增,并將所有的PCR產(chǎn)物進(jìn)行純化。使用純化后的PCR產(chǎn)物,進(jìn)行打斷后構(gòu)建二代測(cè)序文庫(kù),通過(guò)NGS測(cè)序,獲得6G的陽(yáng)性克隆數(shù)據(jù)。通過(guò)分析二代測(cè)序數(shù)據(jù),獲得陽(yáng)性克隆基因信息(去冗余后獲得135個(gè)互作子,包含21個(gè)TFs,2個(gè)TRs及酶類、熱激蛋白、RNA結(jié)合等蛋白,部分見表1)。挑選重要的候選基因進(jìn)行一對(duì)一驗(yàn)證(圖2)。與擬南芥中同源基因AGL6的蛋白互作網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行比對(duì)分析。對(duì)DAL1互作蛋白(DIPs)的基因表達(dá)譜、啟動(dòng)子中的順勢(shì)作用元件功能進(jìn)行分析,并對(duì)DIPs進(jìn)行GO注釋(圖3)。綜合生信分析結(jié)果,構(gòu)建針葉樹老化途徑的調(diào)控模型(圖4)。關(guān)于酵母雜交文庫(kù)構(gòu)建及篩選你需要知道這些。海南發(fā)展酵母文庫(kù)報(bào)價(jià)
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酵母文庫(kù)實(shí)驗(yàn)由歐易生物協(xié)助完成。2021年3月,上海師范大學(xué)楊洪全教授為通訊作者,在ThePlantCell(IF:9.618)雜志發(fā)表了題為“ArabidopsisCryptochrome1ControlsPhotomorphogenesisthroughRegulationofH2A.ZDeposition”的研究論文,報(bào)道了擬南芥光形態(tài)建成調(diào)控的分子機(jī)制。上海師范大學(xué)茅志磊博士為***作者,文章中酵母文庫(kù)實(shí)驗(yàn)由歐易生物協(xié)助完成。太陽(yáng)光不僅為植物的光合作用提供能量來(lái)源,也是調(diào)節(jié)許多植物發(fā)育過(guò)程的關(guān)鍵環(huán)境信號(hào)。植物可以通過(guò)多種光受體監(jiān)測(cè)和響應(yīng)不同波長(zhǎng)、方向和強(qiáng)度的光,其中**早發(fā)現(xiàn)的是藍(lán)光受體隱花素 CRYs。擬南芥中 CRYs 有 2 個(gè),其中 CRY1 主要參與調(diào)控光形態(tài)建成,CRY2 主要參與光周期開花調(diào)控。湖北什么是酵母文庫(kù)做什么
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