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酵母文庫實(shí)驗(yàn)由歐易生物完成。6.902）在線發(fā)表了題為“MKK4-MPK3-WRKY17-mediated salicylic acid degradation increases susceptibility to Glomerella leaf spot in apple”的研究論文，報(bào)道了一個(gè)蘋果炭疽葉枯病易感相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子 MdWRKY17，并對(duì)其作用機(jī)制進(jìn)行了詳細(xì)探討。蘋果是世界上頗受歡迎的水果。蘋果炭疽葉枯病(Glomerellaleafspot,GLS)在我國(guó)多次爆發(fā)，是蘋果相當(dāng)有毀滅性的***病害之一，嚴(yán)重影響蘋果質(zhì)量和產(chǎn)量。但目前在蘋果中尚未鑒定出GLS的抗性基因。傳統(tǒng)酵母雜交技術(shù)應(yīng)用已經(jīng)30多年，技術(shù)已經(jīng)成熟穩(wěn)定。河北建庫酵母文庫報(bào)價(jià)

進(jìn)行了酵母雙雜交篩選實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示 MdMPK3 可以與 MdWRKY17 相互作用（圖 C），并且通過 BiFC、Co-IP 得以證實(shí)（圖 D-E）。MdMPK3 的激酶活性水平在炭疽菌***后也***上升（圖 B）。進(jìn)一步的 BiFC 和 Co-IP 表明，MdMEK4 可以與 MdMPK3 相互作用（圖 F-G）。體外激酶試驗(yàn)表明，MdWRKY17 能夠被MdMEK4- MdMPK3 級(jí)聯(lián)磷酸化（圖 H）。綜上，MdMEK4-MdMPK3 級(jí)聯(lián)磷酸化 MdWRKY17。與對(duì)照相比，MdWRKY17過表達(dá)植株中水楊酸含量降低，而RNAiMdWRKY17植株中水楊酸含量升高（圖A）。河北建庫酵母文庫報(bào)價(jià)專業(yè)酵母文庫構(gòu)建和篩選公司多年經(jīng)驗(yàn)。

利用酵母雙雜交技術(shù)進(jìn)行篩選，結(jié)果顯示SP8可以與水稻OsMYC3蛋白相互作用，并且二者互作關(guān)系通過酵母一對(duì)一互作、BiFC、Co-IP、LCI實(shí)驗(yàn)得以驗(yàn)證（圖A-C）。利用截短的SP8進(jìn)行酵母一對(duì)一互作和Co-IP檢測(cè)表明，與OsMYC3的結(jié)合依賴于SP8的NTP結(jié)構(gòu)域（圖D-E）；同樣，OsMYC3的TAD結(jié)構(gòu)域也是二者互作所必不可少的（圖F）。酵母雙雜交、BiFC實(shí)驗(yàn)表明，OsMYC3可以與OsJAZ相互作用。經(jīng)茉莉酸處理，野生對(duì)照株根的長(zhǎng)度明顯被抑制、一系列JA生物合成和信號(hào)傳導(dǎo)相關(guān)基因表達(dá)量上升，但Osmyc3突變體中抑制程度減輕、JA相關(guān)基因表達(dá)量上升減少。

歐易酵母文庫助力小麥根研究,本研究克隆了小麥的 ERFs 轉(zhuǎn)錄因子家族 1 個(gè)成員 TaSRL1，它可以調(diào)控生長(zhǎng)素生物合成、轉(zhuǎn)運(yùn)和信號(hào)轉(zhuǎn)到相關(guān)基因的表達(dá)，并與生長(zhǎng)素轉(zhuǎn)運(yùn)基因 TaPIN2 啟動(dòng)子序列結(jié)合促進(jìn)其表達(dá)，進(jìn)而抑制根的生長(zhǎng)。此外，TaSRL1 可以與 JAZ 蛋白 TaTIFY9 相互作用，破壞 TaSRL1 對(duì) TaPIN2 表達(dá)的促進(jìn)作用。因此 TaSRL1 可整合根生長(zhǎng)過程中生長(zhǎng)素和 JA 信號(hào)，負(fù)調(diào)控根的伸長(zhǎng)。TaSRL1-4A 標(biāo)記對(duì)小麥育種過程中根系、株形和產(chǎn)量的改良具有重要研究意義。酵母及其應(yīng)用ppt課件 酵母及其應(yīng)用 。

小歐從2018年即開始關(guān)注酵母雜交與高通量測(cè)序相結(jié)合的技術(shù)發(fā)展，如2017年CaoGang老師等發(fā)表的RLL-Y2H技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了文庫篩文庫可能，該技術(shù)通過對(duì)酵母雙雜常用載體的改造，并結(jié)合高通量測(cè)序，可直接獲得AD-BD互作蛋白對(duì)。所用方法相當(dāng)巧妙，感興趣的同學(xué)請(qǐng)點(diǎn)擊《當(dāng)酵母雙雜交遇到高通量測(cè)序》。鈕老師團(tuán)隊(duì)之前的研究已經(jīng)鑒定了DAL1作為一種保守的針葉樹年齡生物標(biāo)記基因，在油松從營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)到生殖生長(zhǎng)的時(shí)相轉(zhuǎn)變過程中起重要作用。為了進(jìn)一步理解年齡效應(yīng)如何驅(qū)動(dòng)針葉樹的發(fā)育，闡明與DAL1相關(guān)的蛋白互作網(wǎng)絡(luò)很關(guān)鍵。鈕老師團(tuán)隊(duì)利用傳統(tǒng)的Y2H篩選技術(shù)結(jié)合NGS測(cè)序技術(shù)，優(yōu)化得到了Y2H-seq技術(shù)，與傳統(tǒng)的篩選測(cè)序相比，大幅度節(jié)省了時(shí)間和實(shí)驗(yàn)成本。為客戶提供專業(yè)的技術(shù)服務(wù)專業(yè)醫(yī)學(xué)課題標(biāo)書論文一站式酵母雙雜交。河北建庫酵母文庫報(bào)價(jià)

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酵母雙雜交、GSTpull-down實(shí)驗(yàn)顯示，SWC6可以直接與HY5、HYH相互作用（圖A-C）。pull-down實(shí)驗(yàn)顯示ARP6同樣可以與HY5、HYH相互作用（圖D）。split-LUC、Co-IP實(shí)驗(yàn)證實(shí)HY5可以與SWC6、ARP6結(jié)合（圖E-J）。下胚軸表型分析顯示，藍(lán)光下arp6hy5hyh三突變體下胚軸長(zhǎng)度明顯大于arp6突變體、hy5hyh雙突變體，表明ARP6和HY5有可能通過不同途徑調(diào)控下胚軸的發(fā)育。Semi-in vivo pull-down、Co-IP 實(shí)驗(yàn)顯示，藍(lán)光下，在 CRY1 存在下，SWC6 與 ARP6 的結(jié)合***增強(qiáng)。表明藍(lán)光***的 CRY1 可能通過藍(lán)光依賴的 CRY1-SWC6/ARP6 相互作用增強(qiáng) SWC6 與 ARP6 的結(jié)合。河北建庫酵母文庫報(bào)價(jià)

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