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本文為中國科學(xué)院海岸帶研究所趙建民課題組在ScienceoftheTotalEnvironment期刊發(fā)表了的文章,通過iTRAQ標(biāo)記定量蛋白質(zhì)組學(xué)研究弧菌***加劇了海洋酸化造成的牡蠣免疫抑制效應(yīng)。海洋酸化可能增加海洋軟體動物疾病加劇的風(fēng)險。從而將產(chǎn)生重大的經(jīng)濟(jì)和生態(tài)影響,因此本研究結(jié)果具有重要的指導(dǎo)意義。在本研究中,研究者將太平洋牡蠣暴露于酸化海水(約2000ppm)中28天,然后用金氏弧菌進(jìn)行***處理,以此研究海洋酸化是否會影響牡蠣對病原菌***的免疫反應(yīng)。此外,利用基于iTRAQ的定量蛋白質(zhì)組學(xué)方法,對牡蠣鰓這一潛在的造血部位進(jìn)行了研究,以分析對OA和金氏弧菌共同作用較敏感的生理過程。蛋白質(zhì)組學(xué),Label Free/iTRAQ/dia/MRM/PRM。天津蛋白組學(xué)質(zhì)譜
作者通過iTRAQ蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)鑒定敲低NMT1后發(fā)生變化的蛋白質(zhì)。結(jié)果鑒定到三種上調(diào)蛋白(LXN,RPL29andFAU)和六種下調(diào)蛋白(NMT1,MTPN,AHSG,ALB,GON7andTF)(圖2A)。作者將這些蛋白質(zhì)分別命名為N-豆蔻?;抡{(diào)蛋白(NDP)和上調(diào)蛋白(NUP)。有趣的是,敲低NMT1會減少NDP和NUP的N-豆蔻?;^表達(dá)NMT1會誘導(dǎo)NDP和NUP的N-豆蔻?;▓D2B)。在小鼠模型中,敲除NMT1會導(dǎo)致NDP和NUP的去N-豆蔻?;?,這可以通過在肝臟中表達(dá)外源性NMT1來部分逆轉(zhuǎn)(圖2C)。這些發(fā)現(xiàn)表明,盡管NMT1對NDP和NUP的表達(dá)起著相反的作用,但NMT1同時刺激NDP和NUP的N-豆蔻?;?。上海差異蛋白組學(xué)歐易鹿明生物基于質(zhì)譜技術(shù),生物信息學(xué)方法,提供蛋白質(zhì)組學(xué)。
在本研究中,利用iTRAQ標(biāo)記定量蛋白組學(xué)方法對東京野茉莉種子發(fā)育的4個時間點采樣進(jìn)行蛋白質(zhì)組學(xué)分析。獲得了2338個蛋白和1473個DEPs。Mfuzz聚類分析顯示,在種子發(fā)育過程中,轉(zhuǎn)錄本和蛋白質(zhì)組之間存在相當(dāng)大的時序一致性。在四個發(fā)育時期中,花后70天(種子發(fā)育活躍期)是視為東京野茉莉種仁發(fā)育的關(guān)鍵時期:在該階段與脂肪酸生物合成相關(guān)的功能基因和酶蛋白均達(dá)到表達(dá)峰值,同時種仁內(nèi)部大部分營養(yǎng)物質(zhì)開始迅速積累。通過轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)和蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)綜合分析油脂合成的調(diào)控網(wǎng)絡(luò),乙酰CoA羧化酶和**酸脫氫酶兩個酶體系處于中心位置,在脂肪酸的合成過程中具有主導(dǎo)作用。
為了驗證TMT蛋白組學(xué)數(shù)據(jù),作者選擇了18個與蓮種胚脫水保護(hù)功能密切相關(guān)的候選DEPs進(jìn)行PRM蛋白靶向驗證。PRM鑒定了18個候選DEPs。這些蛋白質(zhì)的表達(dá)模式在PRM和TMT的定量結(jié)果之間顯示出類似的趨勢。然而,PRM檢測到的蛋白豐度的倍數(shù)變化值要大于TMT數(shù)據(jù)。這一結(jié)果在很大程度上支持了TMT數(shù)據(jù)的可靠性?;赥MT標(biāo)記定量蛋白質(zhì)組學(xué)的生物信息學(xué)分析,對脅迫生理指標(biāo)進(jìn)行了測定,以驗證蓮種胚脫水的保護(hù)機制。在快速脫水階段,REC和MDA含量的變化與RWC相反,它們的水平迅速增加(圖6A,B)。ABA含量在快速脫水和脫水成熟階段前略有增加(圖6C)。上label free蛋白組學(xué)蛋白質(zhì)組學(xué)原理。
蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)研究案例:作為一種常見的******,脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(DON)在田間或加工和儲存過程中會污染谷物和飼料。DON在動物中會引起厭食和生長遲緩在內(nèi)的一系列不良反應(yīng)。本文作者使用轉(zhuǎn)錄組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)對鼠C2C12細(xì)胞進(jìn)行了研究,分析DON對成肌細(xì)胞分化的影響。研究結(jié)果表明,DON通過下調(diào)細(xì)胞骨架和ECM-integrin-FAK-RAC-PAK信號通路來影響成肌細(xì)胞的分化。本文研究體現(xiàn)了組學(xué)技術(shù)在機制研究中的重要作用。中文標(biāo)題:霉菌***脫氧雪腐鐮刀菌烯醇通過下調(diào)細(xì)胞骨架和ECM-integrin-FAK-RAC-PAK信號通路影響成肌細(xì)胞分化研究對象:脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、C2C12細(xì)胞發(fā)表期刊:EcotoxicologyandEnvironmentalSafety影響因子:6.291發(fā)表時間:2021年10月發(fā)表單位:中國科學(xué)院上海營養(yǎng)與健康研究所運用生物技術(shù):轉(zhuǎn)錄組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)(由歐易/鹿明生物提供技術(shù)支持)、免疫熒光、免疫印跡、PCR歐易生物鹿明生物蛋白組學(xué)聯(lián)合分析。安徽分泌蛋白組學(xué)
質(zhì)譜技術(shù),生物信息學(xué)方法,提供蛋白質(zhì)組學(xué) 。天津蛋白組學(xué)質(zhì)譜
使用TMT標(biāo)記定量蛋白質(zhì)組學(xué)分析,與GFP-群體相比,在GFP+細(xì)胞中TM處理后,線粒體復(fù)合物IV的多個亞基被特異性下調(diào),對下調(diào)的蛋白質(zhì)進(jìn)行基因本體 (GO)分析,顯示參與線粒體電子傳遞鏈 (ETC) 的通路富集。同時作者還分析了從人 LM2 細(xì)胞系中分選的 LM2 GFP+和 GFP- 細(xì)胞,在 TM 處理 48 小時后蛋白組學(xué)分析,揭示了GFP+細(xì)胞優(yōu)先富集,同時揭示了線粒體 ETC 相關(guān)的通路。因此,TM 處理特別影響具有更高細(xì)胞內(nèi)銅水平的 SOX2/OCT4+ 細(xì)胞中的線粒體 ETC 通路。蛋白質(zhì)組學(xué)分析確定了富含線粒體功能的途徑。細(xì)胞色素c氧化酶 (Complex IV) 是一種線粒體金屬酶,是線粒體ETC的終末酶。天津蛋白組學(xué)質(zhì)譜
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