深圳神經(jīng)元鈣成像價(jià)位

來源: 發(fā)布時(shí)間:2022-10-08

想要對(duì)鈣離子的動(dòng)態(tài)變化進(jìn)行有效的檢測(cè),鈣離子指示劑的選擇顯得尤為重要。鈣離子熒光指示劑在未結(jié)合鈣離子前幾乎無熒光,與鈣離子結(jié)合后,熒光強(qiáng)度明顯增強(qiáng)。利用這一原理,可以通過指示劑的信號(hào)強(qiáng)弱來觀察細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度水平的變化。根據(jù)激發(fā)光波長(zhǎng)范圍,鈣離子指示劑可以分為可見光激發(fā)和紫外光激發(fā),而根據(jù)其工作原理又可以分為比率和非比率型。常見的鈣離子指示劑有,紫外光激發(fā)Ca2+熒光探針、可見光激發(fā)Ca2+熒光探針、轉(zhuǎn)基因Ca2+指示劑。鈣信號(hào)在大腦皮層中更能反映神經(jīng)元的活性,因此神經(jīng)元鈣信號(hào)的檢測(cè)對(duì)研究大腦皮層功能至關(guān)重要。深圳神經(jīng)元鈣成像價(jià)位

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多種鈣離子指示劑和鈣成像手段的存在使研究人員能夠根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)需要進(jìn)行選擇。同樣,選擇合適的檢測(cè)設(shè)備也是至關(guān)重要的。對(duì)于使用CCD/sCMOS相機(jī)的成像系統(tǒng)來說,有兩個(gè)要求是很基本的:采集速度:根據(jù)不同的應(yīng)用所需的相機(jī)幀速也不同,對(duì)于神經(jīng)細(xì)胞來說,一般要求相機(jī)速度至少在10fps以上,有些高速應(yīng)用場(chǎng)景可能需要幾百甚至上千Hz的幀速。靈敏度:為了盡可能降低光漂白和其他副作用(特別是藍(lán)光激發(fā)時(shí)),需要降低激發(fā)光強(qiáng)度。因此相機(jī)要在較寬的發(fā)射光波長(zhǎng)范圍上具有高靈敏度,才能檢測(cè)到弱光條件下的信號(hào),并適應(yīng)不同的染料的光譜發(fā)射特性。寧波神經(jīng)細(xì)胞鈣成像哪里買鈣成像技術(shù)一出現(xiàn),就受到了全世界神經(jīng)科學(xué)家們的追捧。

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對(duì)新環(huán)境的探索確保了生存和進(jìn)化的適應(yīng)性,這是通過根據(jù)經(jīng)驗(yàn)動(dòng)態(tài)變化的探索性回合和逮捕來表達(dá)的。因此,調(diào)節(jié)探索性行為的神經(jīng)環(huán)路應(yīng)該參與經(jīng)驗(yàn)的整合,并利用它來選擇適當(dāng)?shù)男袨檩敵?。通過空間探索分析,研究人員發(fā)現(xiàn)在之前動(dòng)物被逮捕的地點(diǎn),瞬間逮捕數(shù)隨著經(jīng)驗(yàn)的增加而增加。在自由探索的小鼠身上進(jìn)行的Inscopix鈣成像顯示,基底外側(cè)杏仁核中有一個(gè)遺傳和投射定義的神經(jīng)元群,在自我控制的行為停止期間是活躍的。這個(gè)合集是以經(jīng)驗(yàn)依賴的方式響應(yīng)的,對(duì)這些神經(jīng)元的nVoke閉環(huán)光遺傳操作表明,它們?cè)谔剿鬟^程中驅(qū)動(dòng)經(jīng)驗(yàn)依賴的逮捕是充分和必要的。投影特異性成像和光遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)顯示,這些yizhi是由投射到**杏仁核的基底外側(cè)杏仁核神經(jīng)元影響的,揭示了杏仁核環(huán)路,該回路介導(dǎo)了熟悉部位的短暫阻止,但不影響回避或焦慮/恐懼樣行為。

通過篩選天然與人工合成的融合體,在小鼠與斑馬魚幼蟲身上成功得到以為靶點(diǎn)的致密神經(jīng)回路報(bào)告,報(bào)告顯示來自神經(jīng)纖維的偽信號(hào)明顯減少,信噪比增加,神經(jīng)元之間的偽影相關(guān)性降低。這些結(jié)果均說明GCaMP6f和GCaMP7f的細(xì)胞體靶向變體(Soma-GCaMP6f,Soma-GCaMP7f)對(duì)提高單光子熒光成像技術(shù)的精細(xì)性起到著重要作用。這種胞體靶向突變體對(duì)提高神經(jīng)信號(hào)標(biāo)記的精細(xì)性是否具有組織特異性或物種特異性呢?研究團(tuán)隊(duì)針對(duì)這一問題,分別在小鼠不同腦區(qū)以及斑馬魚幼魚的整胚轉(zhuǎn)染和斑馬魚不同發(fā)育時(shí)期的信號(hào)采集等方面進(jìn)行研究。鈣離子也是神經(jīng)元活動(dòng)的重要“風(fēng)向標(biāo)”之一。

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紫外光激發(fā)Ca2+熒光探針Fura-2和Indo-1都是紫外光激發(fā)的雙波長(zhǎng)Ca2+熒光指示劑,也是目前較常用的比率型鈣離子熒光探針。與其他代的熒光指示劑相比,它們的熒光信號(hào)更強(qiáng),對(duì)Ca2+的選擇性也更強(qiáng)。比率指示劑會(huì)在與Ca2+結(jié)合后會(huì)改變吸收/發(fā)射特性。以雙波長(zhǎng)激發(fā)指示劑Fura-2為例。如圖2所示,低Ca2+濃度下,F(xiàn)ura-2在~380nm處激發(fā),高Ca2+濃度下,在~340nm處激發(fā)。光譜由兩個(gè)峰組成:左側(cè)較短波長(zhǎng)的吸收峰隨Ca2+濃度的增加而增大,右側(cè)較長(zhǎng)波長(zhǎng)的吸收峰隨Ca2+濃度的增加而減小。通過340/380nm交替激發(fā),獲取在510nm處對(duì)應(yīng)的發(fā)射光熒光強(qiáng)度的比率,就可以對(duì)Ca2+濃度進(jìn)行定量的測(cè)量。因?yàn)镕ura-2結(jié)果準(zhǔn)確,且不易被漂白,所以得到了普遍使用。想要同時(shí)觀察軸突和樹突的鈣離子信號(hào),大視野是很重要的。西安熒光顯微鈣成像什么價(jià)格

鈣成像數(shù)據(jù)采集盒擁有 2TB 存儲(chǔ)空間,可選擇以太網(wǎng)或 Wi? 方式連接電腦。深圳神經(jīng)元鈣成像價(jià)位

目前可用的指示劑較多,根據(jù)熒光光譜、與鈣離子親和力及其化學(xué)特性的不同大致分為化學(xué)性鈣離子指示劑和基因編碼鈣離子指示劑。前者指可特異性與鈣離子結(jié)合的小分子,常用的有fura-2、indo-1等;而后者主要指來源于綠色熒光蛋白GFP及其變異體的蛋白質(zhì),可與鈣調(diào)蛋白和肌球蛋白輕鏈激酶M13域結(jié)合,常用的有GCaMP、TN-XXL等,其中GCaMP5G和GCaMP6被廣泛應(yīng)用于在體鈣成像研究中。生物熒光蛋白:Aequorin是水母熒光素(coelenterazine)通過硫酸酯鍵或過氧化鍵緊緊連到脫輔水母發(fā)光蛋白上形成的,遇到鈣離子就發(fā)出470nm藍(lán)光,可以作為鈣離子的檢測(cè)試劑;化學(xué)鈣離子指示劑:Fura-2可在紫外光下被jihuo且發(fā)射出505-520nm光;基于FRET的基因編碼的鈣指示劑;單個(gè)熒光基因編碼的鈣指示劑。深圳神經(jīng)元鈣成像價(jià)位

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