藥物安全性評價試驗

我們將受測試斑馬魚分成三組，分別是正常對照組、模型對照組和服用肝保護劑組。其中正常對照組未攝入乙醇，模型對照組與服用肝保護劑組都攝入了等量的乙醇（乙醇通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內(nèi)）。肝保護劑組在攝入對乙醇的同時攝入美他多辛之類的肝保護劑。服用一段時間肝保護劑后，我們在顯微鏡下觀察斑馬魚肝臟及卵黃囊表型，同時制作成病理切片觀察肝臟的病理結(jié)構(gòu)變化。從病理切片中也能看出來，正常對照組肝細胞核規(guī)則清晰，肝細胞結(jié)構(gòu)正常，邊緣清晰。乙醇處理后，斑馬魚肝細胞結(jié)構(gòu)模糊、肝細胞核腫大，肝組織出現(xiàn)脂肪空泡樣變性，而肝保護劑組細胞和正常斑馬魚中形態(tài)相似。藥物功效評價-藥物毒性安全性評價項目 。藥物安全性評價試驗

蛋黃粉中60%為脂類，用蛋黃粉喂食斑馬魚，可以使斑馬魚血液中的脂肪含量快速升高，從而建立斑馬魚血脂高癥模型。經(jīng)過油紅O特異性脂肪染色（與組織內(nèi)甘油三酯等脂肪滴結(jié)合呈橘紅色），血脂高斑馬魚血管內(nèi)肉眼可見明顯的脂質(zhì)聚積，通過靜脈注射，可見熒光標記膽固醇的積累。我們評價斑馬魚降低血脂功效有4個指標：1.斑馬魚血脂表型圖；2.斑馬魚總甘油三脂含量；3.斑馬魚膽固醇表型圖；4.斑馬魚總膽固醇含量。1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對比實驗，服用降脂產(chǎn)品組的血脂聚積情況與模型對照組比較明顯減少。2.本實驗證實了阿托伐他汀鈣、辛伐他汀、洛伐他汀類降脂產(chǎn)品具有明顯的降脂降膽固醇作用。藥物的量效關(guān)系實驗報告評價血糖、血脂高血管壁增厚改善功效。

利用斑馬魚模型評價保護心肌作用。心肌損傷多數(shù)是由于炎癥、缺血、冠狀動脈狹窄等因素引發(fā)的心肌損傷，常表現(xiàn)為胸悶、胸痛、氣短、四肢乏力、心慌、惡心嘔吐等癥狀。斑馬魚心臟包含心房、心室和靜脈竇，心電圖譜也與哺乳動物類似。而且斑馬魚生長發(fā)育周期短，胚胎透明易觀察，心臟在受精后48小時就發(fā)育完全，有利于開展心肌損傷保護劑的研究。鹽酸異丙腎上腺素可以誘導(dǎo)斑馬魚心率加快，心肌持續(xù)收縮，心肌耗氧量持續(xù)增加，心臟由代償性收縮轉(zhuǎn)化為失代償，終將導(dǎo)致心肌損傷，使心肌細胞凋亡。經(jīng)過特異性熒光染色（凋亡細胞呈綠色），心肌損傷的斑馬魚在心臟部位會布滿凋亡細胞，可以明顯被觀察到。

我們將受測試斑馬魚分成三組，分別是正常對照組、模型對照組和改善貧血藥物組。其中正常對照組未攝入苯肼，模型對照組與改善貧血藥物組都攝入了等量的苯肼（苯肼通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內(nèi)）。服用改善貧血藥物組先攝入生血寧之類的改善貧血藥物后，再加入苯肼。服用改善貧血藥物一段時間后，再加入苯肼共同處理一段時間。我們對斑馬魚整體做紅細胞特異性染色，經(jīng)過分析斑馬魚的紅細胞數(shù)量（染色強度）?？梢钥吹剑Ｐ蛯φ战M紅細胞數(shù)量（染色強度）較正常對照組明顯減少，服用改善貧血藥物組的紅細胞數(shù)量（染色強度）與正常對照組比較相似，沒有明顯的紅細胞減少情況。斑馬魚模型評價基因毒性。

正常成人的心率在每分鐘60～100次之間，如果低于60次稱為心動過緩，是心律失常的一個重要類型，患者平時有頭暈、乏力、倦怠、精神差的癥狀。研究表明，斑馬魚心血管系統(tǒng)的發(fā)育與人高度相似，雖然斑馬魚是單心房單心室，但其心臟結(jié)構(gòu)及功能與人高度保守。同時，由于斑馬魚具有透明易觀察等優(yōu)點，開始被大量應(yīng)用于心血管疾病研究和藥物心血管毒性評價當中。維拉帕米能阻滯心肌細胞慢通道，抑制Ca2+向細胞的內(nèi)流，阻礙心臟慢反應(yīng)電活動，降低舒張期去極化速度，抑制竇房結(jié)的自律性，減慢心率；亦能延長房室結(jié)的有效不應(yīng)期，減慢房室傳導(dǎo)。用解剖顯微鏡下觀察斑馬魚心率，模型對照組斑馬魚心率較正常斑馬魚明顯減慢。利用斑馬魚模型評價心血管毒性。分子藥理學實驗

斑馬魚模型評價腎臟毒***物安全性評價試驗

我們先將測試斑馬魚喂食蛋黃粉和熒光標記的膽固醇（蛋黃粉和熒光標記的膽固醇通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內(nèi)），建立血脂高模型后，再將受測試斑馬魚分成兩組，分別是模型對照組和服用降脂劑組，服用降脂組攝入阿托伐他汀鈣、辛伐他汀、洛伐他汀之類的降脂劑。服用一段時間降脂劑后，我們對斑馬魚整體做脂肪特異性染色，觀察體內(nèi)甘油三酯聚積的變化，以及觀察體內(nèi)膽固醇的聚積情況，同時利用甘油三酯和膽固醇試劑盒檢測斑馬魚體內(nèi)甘油三酯和膽固醇含量的變化。藥物安全性評價試驗

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