濕熱滅菌:濕熱滅菌在高壓鍋或培養(yǎng)基制備器中進(jìn)行,高壓滅菌一般采用121℃±3℃滅菌15min,具體培養(yǎng)基按食品微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)中的規(guī)定進(jìn)行滅菌。培養(yǎng)基體積不應(yīng)超過1000mL,否則滅菌時(shí)可能會(huì)造成過度加熱。所有的操作應(yīng)按照標(biāo)準(zhǔn)或使用說明的規(guī)定進(jìn)行。滅菌效果的控制是關(guān)鍵問題。加熱后采用適當(dāng)?shù)姆绞嚼鋮s,以防加熱過度。這對于大容量和敏感培養(yǎng)基十分重要,例如含有煌綠的培養(yǎng)基。過濾除菌:過濾除菌可在真空或加壓的條件下進(jìn)行。使用孔徑為0.2μm的無菌設(shè)備和濾膜。消毒過濾設(shè)備的各個(gè)部分或使用預(yù)先消毒的設(shè)備。一些濾膜上附著有蛋白質(zhì)或其他物質(zhì)(如物品),為了達(dá)到有效過濾,應(yīng)事先將濾膜用無菌水潤濕。全自動(dòng)培養(yǎng)基制備儀主要特點(diǎn):滅菌-加熱-攪拌-混合-冷卻一體化控制。北京觸摸屏培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基的類型:天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基是指利用各種動(dòng)、植物或微生物的原料,其成分難以確切知道。用作這種培養(yǎng)基的主要原料有:牛肉膏、麥芽汁、蛋白胨、酵母膏、玉米粉、麩皮、各種餅粉、馬鈴薯、牛奶、血清等。用這些物質(zhì)配成的培養(yǎng)基雖然不能確切知道它的化學(xué)成分,但一般來講,營養(yǎng)是比較豐富的,微生物生長旺盛,而且來源普遍,配制方便,所以較為常用,尤其適合于配制實(shí)驗(yàn)室常用的培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基的穩(wěn)定性常受生產(chǎn)廠或批號(hào)等因素的影響。北京培養(yǎng)基制備器哪個(gè)品牌好培養(yǎng)基的分裝:培養(yǎng)基的分裝,應(yīng)按使用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等適當(dāng)容器內(nèi)。
常用培養(yǎng)基的制備及注意事項(xiàng)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私馀囵B(yǎng)基的配制原理;掌握配制培養(yǎng)基的一般方法和步驟;了解常見滅菌、清毒基本原理及方法;掌握干熱天菌、高壓蒸汽滅菌及過濾除菌的操作方法。二、實(shí)驗(yàn)原理培養(yǎng)基是人工按一定比例配制的供微生物生長繁殖和合成代謝產(chǎn)物所需要的營養(yǎng)物質(zhì)的混合物。培養(yǎng)基的原材料可分為碳源、氮源、無機(jī)鹽、生長因素和水。根據(jù)微生物的種類和實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟煌?,培養(yǎng)基也有不同的種類和配制方法。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是一種應(yīng)用較普遍和較普通的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基,有時(shí)又稱為普通培養(yǎng)基。由于這種培養(yǎng)基中含有一般細(xì)胞生長繁殖所需要的較基本的營養(yǎng)物質(zhì),所以可供微生物生長繁殖之用。干熱天菌、高壓蒸汽滅菌方法主要是通過升溫使蛋白質(zhì)變性從而達(dá)到殺死微生物的效果。
培養(yǎng)基滅菌方法有哪五種類型:1、輻射滅菌原理方法:輻射滅菌原理:是用高能電磁輻射和細(xì)菌核酸的光化學(xué)反應(yīng)引起細(xì)菌死亡。常用的是紫外線,X射線和伽馬射線。主要用于室內(nèi)空氣和器皿的表面消毒。2、干熱滅菌原理方法:干熱滅菌原理:是采用高溫氧化微生物,使蛋白質(zhì)變性并濃縮電解質(zhì)以殺死微生物。3、化藥滅菌原理方法,化藥滅菌原理:使用化藥與微生物細(xì)胞中的成分發(fā)生反應(yīng),從而使蛋白質(zhì)變性酶失活。4、過濾滅菌原理方法:過濾滅菌原理:是使用不能滲透的微生物濾膜進(jìn)行滅菌。使用方法是使用0.01-0.45毫米的細(xì)孔濾膜對壓縮空氣,酶溶液和其他對熱不穩(wěn)定的復(fù)合溶液進(jìn)行滅菌。5、濕熱滅菌原理方法:在工業(yè)生產(chǎn)中,用于滅菌對于培養(yǎng)基,管道和設(shè)備,通常將蒸汽加熱到一定溫度并保持一段時(shí)間,這稱為濕熱滅菌。濕熱滅菌原理:是直接用蒸汽進(jìn)行滅菌。蒸汽冷凝后會(huì)釋放出大量潛熱。蒸汽具有強(qiáng)大的穿透力,破壞細(xì)菌蛋白質(zhì)和核酸的化學(xué)鍵,使酶失活并殺死由于代謝紊亂引起的微生物。培養(yǎng)基制備器滅菌之后保持的溫度是可以預(yù)設(shè)的。殺菌劑裝入口寬大,并附有保險(xiǎn)鎖。
MS培養(yǎng)基的特點(diǎn):MS培養(yǎng)基普遍被使用,它的無機(jī)鹽濃度較高,十分有利于組織生長所需的礦質(zhì)營養(yǎng)和加速愈傷組織的生長。因?yàn)榕浞街械碾x子濃度高,在配制、貯存、消毒等過程中,即使有些成分略有出入,也不會(huì)對離子間的平衡造成比較大的影響。MS固體培養(yǎng)基可以用來對愈傷組織可以進(jìn)行誘導(dǎo),或者用來培養(yǎng)胚、莖段、莖尖及花藥。在進(jìn)行細(xì)胞懸浮培養(yǎng)時(shí),它的液體培養(yǎng)基能夠得到非常明顯的效果。在這種培養(yǎng)基中,有比較適當(dāng)比例和數(shù)量的無機(jī)養(yǎng)分,能夠滿足植物細(xì)胞在營養(yǎng)上和生理上的需要。所以,通常情形下,氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子汁等有機(jī)附加成分不需要再被添加。MS培養(yǎng)基中的硝酸鹽、鉀和銨的含量相比于其它培養(yǎng)基的基本成分要更加的高,這亦是其的明顯特征。培養(yǎng)基制備器分裝好的培養(yǎng)基應(yīng)立即進(jìn)行滅菌。北京培養(yǎng)基制備器哪個(gè)品牌好
培養(yǎng)自養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基應(yīng)由簡單的無機(jī)物組成。北京觸摸屏培養(yǎng)基制備器
⑴倒置的小管充滿培養(yǎng)基,不留氣泡。⑵在關(guān)閉殺菌鍋的排氣閥之前,將鍋內(nèi)的氣體排空。⑶試管塞不要塞得太緊。使用硅膠塞時(shí),請勿使用橡膠塞。⑷不可過早打開殺菌鍋,等殺菌鍋內(nèi)的氣壓和溫度降到與室溫相同或相差不大時(shí)再打開殺菌鍋。如果按照以上方法操作還有氣泡,可以用水作為培養(yǎng)基組的對照試驗(yàn)。如果培養(yǎng)基組有氣泡,對照組沒有氣泡,可以確定培養(yǎng)基本身原因。為有效體現(xiàn)培養(yǎng)基其生物學(xué)特性,其制備生長及繁殖需要特定的PH范圍。北京觸摸屏培養(yǎng)基制備器