河北瓊脂培養(yǎng)基制備儀

培養(yǎng)基的分裝，應(yīng)按使用的目的和要求，分裝于試管、燒瓶等適當(dāng)容器內(nèi)。分裝量不得超過(guò)容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵，其外還須用防水紙包扎（現(xiàn)試管一般多有用螺旋蓋者）。分裝時(shí)較好能使用半自動(dòng)或電動(dòng)的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培養(yǎng)基時(shí)，分裝量應(yīng)以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當(dāng)。分裝容器應(yīng)預(yù)先清洗干凈并經(jīng)干烤消毒，以利于培養(yǎng)基的徹底滅菌。每批培養(yǎng)基應(yīng)另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中，隨該批培養(yǎng)基同時(shí)滅菌，以為測(cè)定該批培養(yǎng)基較終pH之用。牛肉浸液中加入適量的蛋白胨、氯化鈉、磷酸鹽，調(diào)節(jié)pH7.2～7.6，經(jīng)滅菌處理后，即為基礎(chǔ)液體培養(yǎng)基。河北瓊脂培養(yǎng)基制備儀

培養(yǎng)基的種類(lèi)：培養(yǎng)基種類(lèi)很多，根據(jù)配制原料的來(lái)源可分為自然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基；根據(jù)物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基；根據(jù)培養(yǎng)功能可分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等；根據(jù)使用范圍可分為細(xì)菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基、酵母菌培養(yǎng)基、病菌培養(yǎng)基等。培養(yǎng)基，是指供給微生物、植物或動(dòng)物（或組織）生長(zhǎng)繁殖的，由不同營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽（包括微量元素）、維生素和水等幾大類(lèi)物質(zhì)。培養(yǎng)基既是提供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促使細(xì)胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)，也是細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的生存環(huán)境。黑龍江不銹鋼內(nèi)桶培養(yǎng)基制備儀培養(yǎng)基配成后一般需測(cè)試并調(diào)節(jié)pH，還須進(jìn)行滅菌，通常有高溫滅菌和過(guò)濾滅菌。

培養(yǎng)基的性能測(cè)試：1.外觀控制：制備好的培養(yǎng)基應(yīng)有相應(yīng)的顏色，一般的培養(yǎng)基應(yīng)澄清、無(wú)渾濁、無(wú)沉淀。使用前應(yīng)檢查培養(yǎng)基的顏色是否發(fā)生變化，是否蒸發(fā)/脫水。2.污染控制：從每批制備好的培養(yǎng)基中選取部分進(jìn)行污染測(cè)試(無(wú)菌試驗(yàn))，確定無(wú)微生物生長(zhǎng)方可使用。3.性能測(cè)試：(1)測(cè)試菌株選擇：測(cè)試菌株是具有其表示種的穩(wěn)定特性并能有效證明實(shí)驗(yàn)室特定培養(yǎng)基較佳性能的一套菌株。(3)半定量測(cè)試方法（改進(jìn)的劃線法接種法）。(4)定性測(cè)試方法（平板接種觀察法）。用接種環(huán)取測(cè)試菌培養(yǎng)物，在測(cè)試培養(yǎng)基表面劃平行直線。

培養(yǎng)基的脫氣：必要時(shí)，在使用前將養(yǎng)基放到沸水浴或蒸汽浴中加熱15min,加熱時(shí)松開(kāi)容器蓋子；加熱后蓋緊蓋子，并迅速冷卻至使用溫度。3.添加成分的加入：對(duì)熱不穩(wěn)定的添加成分應(yīng)在培養(yǎng)基冷卻至47℃~50℃時(shí)加入,滅菌的添加成分加入前應(yīng)冷卻至室溫,避免冷的液體會(huì)造成瓊脂凝膠或形成片狀物。4.培養(yǎng)基的棄置：所有污染和未使用的培養(yǎng)基的棄置應(yīng)采用安全的方式,并符合相關(guān)法律法規(guī)的規(guī)定。每批培養(yǎng)基應(yīng)另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中，隨該批培養(yǎng)基同時(shí)滅菌，以為測(cè)定該批培養(yǎng)基較終pH之用。培養(yǎng)基長(zhǎng)時(shí)間的高溫滅菌會(huì)使某些不耐熱的物質(zhì)破壞，如使糖類(lèi)物質(zhì)形成氨基糖、焦糖。

培養(yǎng)基制備的九個(gè)步驟關(guān)注要點(diǎn)：步驟一：稱(chēng)取數(shù)量：用1/100的電子天平稱(chēng)出培養(yǎng)基所需的藥物。首先參照配方計(jì)算出配制相應(yīng)培養(yǎng)基需要各成分的數(shù)量，然后用電子天平準(zhǔn)確稱(chēng)取重量。步驟二：培養(yǎng)基溶化：將培養(yǎng)基納入燒杯容器中，加小適量的水，緩慢加水并用玻璃棒小幅度攪拌。倘若培養(yǎng)基中不含瓊脂，則不需要對(duì)培養(yǎng)基加熱；相反含有瓊脂，就需要用本生燈/電磁爐加熱煮沸。步驟三：調(diào)培養(yǎng)基pH：雖然培養(yǎng)基中含有緩沖物質(zhì)，可以盡量使培養(yǎng)基的pH值保持在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)，但如果配制的培養(yǎng)基不能要求，則必須進(jìn)行必要的調(diào)整。如果您有校準(zhǔn)過(guò)的pH計(jì)，則可以使用pH計(jì)。步驟四：培養(yǎng)基過(guò)濾：如果對(duì)配制的培養(yǎng)基沒(méi)有特殊要求，這一步可以省略。步驟五：培養(yǎng)基分裝：準(zhǔn)備好的培養(yǎng)基根據(jù)用途不同分為燒瓶、試管等容器，分裝試管量大采用自動(dòng)分液器，分裝試管量小，可以用漏斗分液。確定這批培養(yǎng)基的較終pH值。步驟六：培養(yǎng)基滅菌處理：分裝完成的培養(yǎng)基應(yīng)馬上滅菌。培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度過(guò)大，會(huì)使?jié)B透壓過(guò)高，使細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離而抑制微生物生長(zhǎng)。河北瓊脂培養(yǎng)基制備儀

有的培養(yǎng)基還含有素和色素，用于單種微生物培養(yǎng)和鑒定。河北瓊脂培養(yǎng)基制備儀

培養(yǎng)基制備儀：培養(yǎng)基的種類(lèi)繁多，但制備的方法大同小異，一般可分為6個(gè)步驟：用水、稱(chēng)量、溶解復(fù)水、滅菌、pH測(cè)定、保存。1、必須選用專(zhuān)門(mén)純凈水或者經(jīng)消毒過(guò)后的無(wú)菌水。2、培養(yǎng)基進(jìn)行復(fù)水的容器不得用銅鍋或鐵鍋，放置離子混入培養(yǎng)基中，影響微生物的生長(zhǎng)。3、容器的體積須大于復(fù)水后培養(yǎng)基總體積的2倍，預(yù)防出現(xiàn)溢出情況。4、在對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行加熱時(shí)，若培養(yǎng)基內(nèi)含有瓊脂粉成分，則需要將其充分浸泡一段時(shí)間。加熱的過(guò)程中不斷進(jìn)行攪拌防止出現(xiàn)培養(yǎng)基結(jié)底炭化從而造成成分損害。部分培養(yǎng)基則需要使用沸水進(jìn)行加熱，預(yù)防發(fā)生局部燒焦及沸騰溢出。5、瓊脂類(lèi)培養(yǎng)基進(jìn)行再融化時(shí)應(yīng)使用沸水浴或流動(dòng)蒸汽進(jìn)行加熱，較多只能加熱兩次，第二次再融化后仍未用完的培養(yǎng)基應(yīng)棄去。6、而當(dāng)對(duì)培養(yǎng)基實(shí)施滅菌時(shí)，需嚴(yán)格按照說(shuō)明規(guī)范操作。但是也不能盲目按照說(shuō)明的時(shí)間進(jìn)行，需結(jié)合實(shí)際情況，合理調(diào)節(jié)滅菌時(shí)間，防止出現(xiàn)培養(yǎng)基滅菌過(guò)度而造成的成分變性。河北瓊脂培養(yǎng)基制備儀

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