相比于qPCR，dPCR在轉(zhuǎn)基因檢測(cè)中具有以下優(yōu)勢(shì)：（1）檢測(cè)靈敏度高：理論上dPCR的靈敏度可達(dá)1個(gè)拷貝，而實(shí)際應(yīng)用中dPCR的小檢出限和比較低定量限數(shù)值非常接近，所以dPCR可以在非常低的目標(biāo)拷貝數(shù)下得到精確的結(jié)果；通常轉(zhuǎn)基因比參考基因（內(nèi)源基因）濃度低很多；（2）前處理簡(jiǎn)單且受基質(zhì)成分干擾較小：dPCR反應(yīng)效率和精密度受到食品基質(zhì)成分干擾影響較小，可應(yīng)用于混合基質(zhì)樣品中低豐度DNA的檢測(cè)；（3）dPCR對(duì)抑制劑的敏感性較低：由于dPCR結(jié)果表示為“有熒光“或“無(wú)熒光”，即使存在抑制劑降低了熒光強(qiáng)度仍可以表示為“有熒光；（4）適合多重轉(zhuǎn)基因檢測(cè)：食品或飼料提取的DNA中可能包含多種轉(zhuǎn)基因片段，可以進(jìn)行多重dPCR檢測(cè)，提高分析效率。同時(shí)，dPCR可以直接溯源至SI國(guó)際單位制摩爾，適合單一、雙重及多重轉(zhuǎn)基因標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究，一次可識(shí)別不同的轉(zhuǎn)基因區(qū)域。下面詳細(xì)進(jìn)行說(shuō)明。在dPCR中，樣品被分區(qū)，使得樣品內(nèi)單個(gè)的核酸分子被定位并被集中在許多分離的區(qū)域內(nèi)。美國(guó)全自動(dòng)數(shù)字PCR試劑盒
PCR常使用目標(biāo)序列的拷貝數(shù)或某一給定樣品中轉(zhuǎn)基因的百分比來(lái)體現(xiàn)方法靈敏度。由于qPCR和dPCR實(shí)驗(yàn)過(guò)程所用試劑的兼容性較好，在使用dPCR進(jìn)行轉(zhuǎn)基因檢測(cè)時(shí)，通常直接參照qPCR的方法。使用不同技術(shù)對(duì)相同樣品檢測(cè)時(shí)，兩種方法的靈敏度是否具有可比性成為關(guān)注的問(wèn)題。Burns等21]使用Fluidigm公司的12.765（12板，每板765個(gè)微單元）芯片數(shù)字PCR分析儀測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)ERM-AD413檢測(cè)轉(zhuǎn)基因玉米MON810。該小組應(yīng)用dPCR技術(shù)評(píng)估在qPCR定義下的靈敏度數(shù)值，在拷貝數(shù)200-700之間，dPCR與qPCR的測(cè)量結(jié)果具有一致性。但與qPCR的靈敏度相比，dPCR在低于拷貝數(shù)200時(shí)有被低估的風(fēng)險(xiǎn)，在高于拷貝數(shù)1000時(shí)有被高估的風(fēng)險(xiǎn)。dPCR在同一陣列上同時(shí)測(cè)量轉(zhuǎn)基因和內(nèi)源性靶點(diǎn)時(shí)，需要稀釋內(nèi)源性靶點(diǎn)和轉(zhuǎn)基因靶點(diǎn)在合理拷貝數(shù)范圍內(nèi)以保證dPCR測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性。國(guó)產(chǎn)數(shù)字PCR儀器數(shù)字PCR在檢測(cè)珍貴樣品和樣品核酸存在降解時(shí)具有明顯的優(yōu)勢(shì)。
在精細(xì)診療領(lǐng)域，患者外周血中的循環(huán)DNA（ctDNA），在的早期篩查，圍術(shù)期監(jiān)測(cè)，藥物療效評(píng)估，預(yù)后等方面具有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值。在肺液體活檢領(lǐng)域，EGFR突變由于其在東亞人群中的高突變率,實(shí)現(xiàn)精細(xì)檢測(cè)顯得尤為重要。研究表明，相較于熒光定量PCR，數(shù)字PCR對(duì)于血液ctDNA的檢測(cè)靈敏度更高（0.01%），EGFR突變的陽(yáng)性檢出率也更高。在患者術(shù)后復(fù)發(fā)檢測(cè)中，數(shù)字PCR評(píng)估出的ctDNA陽(yáng)性，可以早于影像學(xué)數(shù)月提前揭示出患者復(fù)發(fā)。因此，該項(xiàng)技術(shù)在肺精細(xì)診療中具有重要的作用。
全自動(dòng)樣本制備系統(tǒng)DMX-1000配備氣流發(fā)生裝置和氣壓控制裝置，能夠?qū)崿F(xiàn)高精度壓力控制，結(jié)合**產(chǎn)品液滴生成芯片和微流控乳液滴生成技術(shù)，DMX-1000可以在70秒內(nèi)快速、穩(wěn)定、高效地生成大小均一的微乳液滴。微滴數(shù)量可達(dá)2萬(wàn)-60萬(wàn)個(gè)，粒徑范圍30-120μm，性能穩(wěn)定。除此之外，銳訊還提供微流控芯片的定制服務(wù)，以滿足不同的液滴數(shù)目和尺寸要求。平板式快速擴(kuò)增儀TC-1000，不再使用傳統(tǒng)的96孔板，而是特制的液滴擴(kuò)增芯片；不再是傳統(tǒng)的“燒開(kāi)水”加熱模式，代之以平板式單液滴層均勻受熱的方式。在這樣的改進(jìn)之下，TC-1000完成40個(gè)PCR循環(huán)只需約45分鐘（TC-2.0升級(jí)版更是把時(shí)間縮短到了25分鐘?。?，大幅縮短了等待時(shí)間，提升了實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。這對(duì)實(shí)驗(yàn)人員而言，無(wú)疑是莫大的福利——高效完成工作，不加班——愛(ài)工作，也愛(ài)生活。dPCR儀器在操作中集成了前處理以減少手工移液和樣品轉(zhuǎn)移的操作，增加了通量，并在價(jià)格上具有優(yōu)勢(shì)。
數(shù)字PCR技術(shù)的出現(xiàn)不是為了完全取代原有分子診斷技術(shù)，而是更好的補(bǔ)充和完善現(xiàn)有技術(shù)平臺(tái)。數(shù)字PCR為不同應(yīng)用場(chǎng)景下的多樣化核酸檢測(cè)需求提供了新的思路，尤其是在臨床檢測(cè)方面。國(guó)產(chǎn)數(shù)字PCR企業(yè)在商業(yè)化應(yīng)用方面，也不斷“攻城略地”。數(shù)字PCR作為當(dāng)下靈敏的核酸檢測(cè)技術(shù)，盡管目前國(guó)產(chǎn)數(shù)字PCR企業(yè)異軍突起，在臨床市場(chǎng)中實(shí)現(xiàn)了彎道超車(chē)，但未來(lái)仍然需要聚焦客戶(hù)需求，不斷夯實(shí)底層創(chuàng)新，同時(shí)在檢測(cè)成本、自動(dòng)化、試劑盒申報(bào)注冊(cè)、出海國(guó)際化等方面不斷努力，提供更為的解決方案。國(guó)際局勢(shì)，波譎云詭。在百年未有之大變局，實(shí)現(xiàn)中華民族的偉大復(fù)興，需要國(guó)內(nèi)企業(yè)瞄準(zhǔn)技術(shù)高地，以爭(zhēng)分奪秒的精神，解決技術(shù)"卡脖子"的難題，不斷攻堅(jiān)克難，自主創(chuàng)新，在與國(guó)際品牌的同臺(tái)競(jìng)技中，彰顯中國(guó)實(shí)力。數(shù)字PCR技術(shù)min檢測(cè)下限可到2copies/ml，比qPCR靈敏度提升了100倍。珠三角全自動(dòng)多重?cái)?shù)字PCR儀器
楊雁峰博士堅(jiān)信數(shù)字PCR是可以應(yīng)用于無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前篩查的理想技術(shù)之一，這也是他2016年創(chuàng)立塔歌生物的初衷。美國(guó)全自動(dòng)數(shù)字PCR試劑盒
目前dPCR主要有兩種形式，芯片式和液滴式，但基本原理都是將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應(yīng)器或微滴中，每個(gè)反應(yīng)器的核酸模板數(shù)少于或者等于1個(gè)。這樣經(jīng)過(guò)PCR循環(huán)之后，有一個(gè)核酸分子模板的反應(yīng)器就會(huì)給出熒光信號(hào)，沒(méi)有模板的反應(yīng)器就沒(méi)有熒光信號(hào)。根據(jù)相對(duì)比例和反應(yīng)器的體積，就可以推算出原始溶液的核酸濃度?？梢允褂脦追N不同的方法來(lái)分配樣品，包括微孔板，毛細(xì)管，油乳劑和帶有核酸結(jié)合表面的小型化腔室陣列。樣品的分配使人們可以通過(guò)假設(shè)分子種群遵循泊松分布來(lái)估計(jì)不同分子的數(shù)量，根據(jù)泊松分布的原理，反應(yīng)體系中目標(biāo)分子的拷貝數(shù)可以通過(guò)公式A=-ln[(N-X)/N]*N計(jì)算，從而解決了多個(gè)目標(biāo)分子存在于單個(gè)液滴中的可能性。美國(guó)全自動(dòng)數(shù)字PCR試劑盒
廣州雙螺旋科學(xué)儀器有限公司是以提供數(shù)字PCR，純水機(jī)，病理切片機(jī)，倍性分析儀為主的有限責(zé)任公司（自然），公司始建于2015-04-17，在全國(guó)各個(gè)地區(qū)建立了良好的商貿(mào)渠道和技術(shù)協(xié)作關(guān)系。雙螺旋科學(xué)儀器以數(shù)字PCR，純水機(jī)，病理切片機(jī)，倍性分析儀為主業(yè)，服務(wù)于精細(xì)化學(xué)品等領(lǐng)域，為全國(guó)客戶(hù)提供先進(jìn)數(shù)字PCR，純水機(jī)，病理切片機(jī)，倍性分析儀。多年來(lái)，已經(jīng)為我國(guó)精細(xì)化學(xué)品行業(yè)生產(chǎn)、經(jīng)濟(jì)等的發(fā)展做出了重要貢獻(xiàn)。