20世紀(jì)末,Vogelstein等提出數(shù)字PCR(digitalPCR,dPCR)的概念,通過將一個(gè)樣本分成幾十到幾萬份,分配到不同的反應(yīng)單元,每個(gè)單元至少包含一個(gè)拷貝的目標(biāo)分子(DNA模板),在每個(gè)反應(yīng)單元中分別對目標(biāo)分子進(jìn)行PCR擴(kuò)增,擴(kuò)增結(jié)束后對各個(gè)反應(yīng)單元的熒光信號(hào)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。PCR實(shí)際上是一個(gè)在模板DNA、引物(模板片段兩端的已知序列)和四種脫氧核苷酸等存在的情況下,DNA聚合酶依賴的酶促合成反應(yīng),擴(kuò)增的特異性取決于引物與模板DNA的特異結(jié)合。在數(shù)字PCR賽道,塔歌生物將加速胎兒染色體非整倍體無創(chuàng)產(chǎn)前篩查注冊證的申報(bào)。上海賽默飛數(shù)字PCR技術(shù)
數(shù)字PCR技術(shù)的出現(xiàn)不是為了完全取代原有分子診斷技術(shù),而是更好的補(bǔ)充和完善現(xiàn)有技術(shù)平臺(tái)。數(shù)字PCR為不同應(yīng)用場景下的多樣化核酸檢測需求提供了新的思路,尤其是在臨床檢測方面。國產(chǎn)數(shù)字PCR企業(yè)在商業(yè)化應(yīng)用方面,也不斷“攻城略地”。數(shù)字PCR作為當(dāng)下靈敏的核酸檢測技術(shù),盡管目前國產(chǎn)數(shù)字PCR企業(yè)異軍突起,在臨床市場中實(shí)現(xiàn)了彎道超車,但未來仍然需要聚焦客戶需求,不斷夯實(shí)底層創(chuàng)新,同時(shí)在檢測成本、自動(dòng)化、試劑盒申報(bào)注冊、出海國際化等方面不斷努力,提供更為的解決方案。國際局勢,波譎云詭。在百年未有之大變局,實(shí)現(xiàn)中華民族的偉大復(fù)興,需要國內(nèi)企業(yè)瞄準(zhǔn)技術(shù)高地,以爭分奪秒的精神,解決技術(shù)"卡脖子"的難題,不斷攻堅(jiān)克難,自主創(chuàng)新,在與國際品牌的同臺(tái)競技中,彰顯中國實(shí)力。華南地區(qū)全自動(dòng)多重?cái)?shù)字PCR價(jià)格數(shù)字PCR的**原理:有限稀釋、終點(diǎn)PCR和泊松分布。
dPCR在使用過程中需要特別注意體積誤差造成的結(jié)果偏差。體積誤差對于測量拷貝數(shù)濃度會(huì)產(chǎn)生偏差。目前dPCR中體積優(yōu)化方法以光學(xué)顯微鏡觀測為主。分散體積的差異會(huì)增加拷貝數(shù)結(jié)果的不確定性,Emslie等使用光學(xué)顯微鏡縱向拍照比較圖片邊緣的微小差異,考察了數(shù)字PCR系統(tǒng)中每個(gè)微孔內(nèi)和孔與孔間的體積差異對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響程度。Corbisier等使用微滴數(shù)字PCR對6種不同質(zhì)量分?jǐn)?shù)棉籽粉質(zhì)粒DNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)[ERM-AD623a-f,濃度范圍(10~10)copies/ul]進(jìn)行分析,優(yōu)化了液滴體積得到相應(yīng)校正因子,并使用該校正因子發(fā)現(xiàn)并校準(zhǔn)了運(yùn)行軟件中液滴體積不變的假設(shè)而引起的數(shù)據(jù)偏離,數(shù)據(jù)結(jié)果的一致性有明顯提高。
國產(chǎn)品牌市場份額的不斷擴(kuò)大,固然有、貿(mào)易戰(zhàn)等因素,但更關(guān)鍵在于,國產(chǎn)dPCR企業(yè),立足本土,洞察客戶需求,不斷提供各種應(yīng)用場景下的解決方案。在儀器的自動(dòng)化程度上,領(lǐng)航基因、思納福醫(yī)療、達(dá)微生物分別推出全自動(dòng)一體機(jī),領(lǐng)航基因更是領(lǐng)行業(yè)之先,推出了數(shù)字PCR工作站;在終端應(yīng)用開發(fā)上,繼科維思HER2基因擴(kuò)增檢測試劑盒(數(shù)字PCR法)獲得NMPA認(rèn)證后,2022年新羿生物推出較早基于數(shù)字PCR技術(shù)的NMPA獲證檢測試劑盒;領(lǐng)航基因基于dPCR推出血流檢測試劑盒和結(jié)核與非結(jié)核分枝桿菌檢測試劑盒,并全速推進(jìn)試劑盒注冊臨床試驗(yàn)進(jìn)度;在熒光通道上,領(lǐng)航基因、思納福醫(yī)療、新羿生物大幅國外進(jìn)口品牌的2-4色熒光通道,分別推出7色、6色及5色熒光通道,進(jìn)一步提升樣本利用率和檢測靶標(biāo)覆蓋范圍,降低試驗(yàn)成本。dPCR可直接溯源SI國際單位制摩爾,適合單一、雙重及多重轉(zhuǎn)基因標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究,一次可識(shí)別不同的轉(zhuǎn)基因區(qū)域。
dPCR的結(jié)果統(tǒng)計(jì)方式有2種,一種是采用標(biāo)記多種顏色,通過不同檢測通道分辨不同顏色和強(qiáng)度,再根據(jù)分散液滴的數(shù)量計(jì)算待測基因的含量;另一種采用概率統(tǒng)計(jì)的數(shù)據(jù)處理方法,即通過泊松分布的方法對結(jié)果進(jìn)行分析。應(yīng)用概率統(tǒng)計(jì)分析數(shù)據(jù)和對數(shù)據(jù)處理方法的模型直接關(guān)系著結(jié)果的準(zhǔn)確性和分析時(shí)間的長短。常用的統(tǒng)計(jì)方法是假設(shè)每個(gè)微反應(yīng)單元的體積相同,根據(jù)泊松統(tǒng)計(jì)計(jì)算拷貝數(shù),公式為:M=-Vx1n(1-x/)其中M是目標(biāo)總拷貝數(shù)量;V是微反應(yīng)單元數(shù)量;x是發(fā)光的微反應(yīng)單元數(shù)量。相較于qPCR,數(shù)字PCR可讓你能夠直接數(shù)出DNA分子的個(gè)數(shù),是對起始樣品的定量。上海賽默飛數(shù)字PCR技術(shù)
使用數(shù)字PCR技術(shù)對436例非小細(xì)胞肺*樣品進(jìn)行檢測,并挑選樣本驗(yàn)證一致性。上海賽默飛數(shù)字PCR技術(shù)
全自動(dòng)樣本制備系統(tǒng)DMX-1000配備氣流發(fā)生裝置和氣壓控制裝置,能夠?qū)崿F(xiàn)高精度壓力控制,結(jié)合**產(chǎn)品液滴生成芯片和微流控乳液滴生成技術(shù),DMX-1000可以在70秒內(nèi)快速、穩(wěn)定、高效地生成大小均一的微乳液滴。微滴數(shù)量可達(dá)2萬-60萬個(gè),粒徑范圍30-120μm,性能穩(wěn)定。除此之外,銳訊還提供微流控芯片的定制服務(wù),以滿足不同的液滴數(shù)目和尺寸要求。平板式快速擴(kuò)增儀TC-1000,不再使用傳統(tǒng)的96孔板,而是特制的液滴擴(kuò)增芯片;不再是傳統(tǒng)的“燒開水”加熱模式,代之以平板式單液滴層均勻受熱的方式。在這樣的改進(jìn)之下,TC-1000完成40個(gè)PCR循環(huán)只需約45分鐘(TC-2.0升級(jí)版更是把時(shí)間縮短到了25分鐘!),大幅縮短了等待時(shí)間,提升了實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。這對實(shí)驗(yàn)人員而言,無疑是莫大的福利——高效完成工作,不加班——愛工作,也愛生活。上海賽默飛數(shù)字PCR技術(shù)
廣州雙螺旋科學(xué)儀器有限公司擁有儀器儀表批發(fā);商品批發(fā)貿(mào)易(許可審批類商品除外);商品零售貿(mào)易(許可審批類商品除外);教學(xué)設(shè)備的研究開發(fā);辦公設(shè)備耗材批發(fā);生物技術(shù)開發(fā)服務(wù);生物技術(shù)推廣服務(wù);計(jì)算機(jī)批發(fā);生物技術(shù)轉(zhuǎn)讓服務(wù);農(nóng)業(yè)科學(xué)研究和試驗(yàn)發(fā)展;醫(yī)學(xué)研究和試驗(yàn)發(fā)展;自然科學(xué)研究和試驗(yàn)發(fā)展;水處理設(shè)備的研究、開發(fā);食品科學(xué)技術(shù)研究服務(wù);環(huán)保設(shè)備批發(fā);辦公設(shè)備批發(fā);等多項(xiàng)業(yè)務(wù),主營業(yè)務(wù)涵蓋數(shù)字PCR,純水機(jī),病理切片機(jī),倍性分析儀。公司目前擁有專業(yè)的技術(shù)員工,為員工提供廣闊的發(fā)展平臺(tái)與成長空間,為客戶提供高質(zhì)的產(chǎn)品服務(wù),深受員工與客戶好評。誠實(shí)、守信是對企業(yè)的經(jīng)營要求,也是我們做人的基本準(zhǔn)則。公司致力于打造***的數(shù)字PCR,純水機(jī),病理切片機(jī),倍性分析儀。一直以來公司堅(jiān)持以客戶為中心、數(shù)字PCR,純水機(jī),病理切片機(jī),倍性分析儀市場為導(dǎo)向,重信譽(yù),保質(zhì)量,想客戶之所想,急用戶之所急,全力以赴滿足客戶的一切需要。