在精細(xì)診療領(lǐng)域,患者外周血中的循環(huán)DNA(ctDNA),在的早期篩查,圍術(shù)期監(jiān)測,藥物療效評估,預(yù)后等方面具有重要的臨床應(yīng)用價值。在肺液體活檢領(lǐng)域,EGFR突變由于其在東亞人群中的高突變率,實(shí)現(xiàn)精細(xì)檢測顯得尤為重要。研究表明,相較于熒光定量PCR,數(shù)字PCR對于血液ctDNA的檢測靈敏度更高(0.01%),EGFR突變的陽性檢出率也更高。在患者術(shù)后復(fù)發(fā)檢測中,數(shù)字PCR評估出的ctDNA陽性,可以早于影像學(xué)數(shù)月提前揭示出患者復(fù)發(fā)。因此,該項(xiàng)技術(shù)在肺精細(xì)診療中具有重要的作用。20世紀(jì)末,Bert Vogelstein等提出數(shù)字PCR的概念。華南地區(qū)雙螺旋生物儀器數(shù)字PCR系統(tǒng)
在定量PCR時,我們常常糾結(jié)一個問題,究竟是相對定量還是***定量呢?如今,你無需糾結(jié)了,因?yàn)閿?shù)字PCR(digitalPCR)來了。盡管這兩種技術(shù)有些類似,都是估計起始樣品中的核酸量,但它們有一個重要的區(qū)別。定量PCR是依靠標(biāo)準(zhǔn)曲線或參照基因來測定核酸量,而數(shù)字PCR則讓你能夠直接數(shù)出DNA分子的個數(shù),是對起始樣品的***定量。因此特別適用于依靠Ct值不能很好分辨的應(yīng)用領(lǐng)域:拷貝數(shù)變異、突變檢測、基因相對表達(dá)研究(如等位基因不平衡表達(dá))、二代測序結(jié)果驗(yàn)證、miRNA表達(dá)分析、單細(xì)胞基因表達(dá)分析等。法國國產(chǎn)數(shù)字PCR拷貝數(shù)變異、突變檢測、基因相對表達(dá)研究、二代測序結(jié)果驗(yàn)證、miRNA表達(dá)分析、單細(xì)胞基因表達(dá)分析等。
數(shù)字聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(digitalpolymerchainreaction,dPCR)技術(shù)因具有高靈敏度、受基質(zhì)干擾少等優(yōu)勢而被廣用于轉(zhuǎn)基因食品檢測。本研究綜述了數(shù)字PCR技術(shù)的原理、系統(tǒng)各部件的優(yōu)劣勢,梳理了數(shù)字PCR技術(shù)在轉(zhuǎn)基因檢測與溯源技術(shù)(標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì))方面的進(jìn)展和發(fā)展趨勢,以期為轉(zhuǎn)基因食品檢測領(lǐng)域提供參考依據(jù)。dPCR的擴(kuò)增過程大致上可以分為3步:樣品的分散、樣品的熱循環(huán)擴(kuò)增和樣品的檢測。對于數(shù)字PCR儀器系統(tǒng),各個部件之間仍然有較大的改進(jìn)空間,要發(fā)揮部件之間的協(xié)同作用是很重要的,而且有持續(xù)研究的價值。表1中總結(jié)了部分常見的數(shù)字PCR系統(tǒng)的類型,以及相對在硬件、便攜性、性價比和自動化程度上的比較。
二項(xiàng)式分布是一個離散概率分布,它給出了m次試驗(yàn)中k次成功的可能性,每次試驗(yàn)的概率為p,例如當(dāng)擲骰子時,二項(xiàng)分布給出了在10次試驗(yàn)中恰好有7次擲出4的概率。在數(shù)字PCR的情況中,投擲骰子類似于將一個目標(biāo)實(shí)體隨機(jī)“投擲”到一組分區(qū)中,當(dāng)目標(biāo)落在選定的分區(qū)中時,就是成功。如果有n個分區(qū),并且分區(qū)過程是完全隨機(jī)的,則目標(biāo)出現(xiàn)在所選分區(qū)中的概率為1/n。該試驗(yàn)重復(fù)m次,樣品中的每個分子一次。更多關(guān)于PCR的相關(guān)信息,歡迎咨詢廣州雙螺旋科學(xué)儀器有限公司。全自動數(shù)字PCR平臺,讓數(shù)字PCR真正邁入新時代,助推數(shù)字PCR普及應(yīng)用。
數(shù)字PCR技術(shù)的出現(xiàn)不是為了完全取代原有分子診斷技術(shù),而是更好的補(bǔ)充和完善現(xiàn)有技術(shù)平臺。數(shù)字PCR為不同應(yīng)用場景下的多樣化核酸檢測需求提供了新的思路,尤其是在臨床檢測方面。國產(chǎn)數(shù)字PCR企業(yè)在商業(yè)化應(yīng)用方面,也不斷“攻城略地”。數(shù)字PCR作為當(dāng)下靈敏的核酸檢測技術(shù),盡管目前國產(chǎn)數(shù)字PCR企業(yè)異軍突起,在臨床市場中實(shí)現(xiàn)了彎道超車,但未來仍然需要聚焦客戶需求,不斷夯實(shí)底層創(chuàng)新,同時在檢測成本、自動化、試劑盒申報注冊、出海國際化等方面不斷努力,提供更為的解決方案。國際局勢,波譎云詭。在百年未有之大變局,實(shí)現(xiàn)中華民族的偉大復(fù)興,需要國內(nèi)企業(yè)瞄準(zhǔn)技術(shù)高地,以爭分奪秒的精神,解決技術(shù)"卡脖子"的難題,不斷攻堅(jiān)克難,自主創(chuàng)新,在與國際品牌的同臺競技中,彰顯中國實(shí)力。數(shù)字PCR具有諸多優(yōu)點(diǎn),但也存在一定的不足,如成本高、儀器操作復(fù)雜、經(jīng)濟(jì)效益低等。美國賽默飛數(shù)字PCR價格
dPCR儀器在操作中集成了前處理以減少手工移液和樣品轉(zhuǎn)移的操作,增加了通量,并在價格上具有優(yōu)勢。華南地區(qū)雙螺旋生物儀器數(shù)字PCR系統(tǒng)
對于檢測需要高靈敏度以及技術(shù)確認(rèn)的情況下,數(shù)字PCR技術(shù)也可以發(fā)揮重要作用。技術(shù)數(shù)據(jù)表明,數(shù)字PCR技術(shù)對的比較低檢測下限可到2copies/ml,比qPCR靈敏度提升了100倍。經(jīng)測試,數(shù)字PCR在檢測和診斷的某些方面優(yōu)于金標(biāo)準(zhǔn)qPCR,尤其是在低病毒載量樣本中,相比起qPCR,數(shù)字PCR特異性、靈敏度、重現(xiàn)性和檢測限受影響更小。因此,未來預(yù)計數(shù)字PCR技術(shù)也將在類疾病中得到更加廣的應(yīng)用。數(shù)字PCR的應(yīng)用甚廣,除了可應(yīng)用于進(jìn)行突變的檢測以外,也可運(yùn)用于基因擴(kuò)增的檢測。通過數(shù)字PCR技術(shù)可建立多重?zé)晒怏w系,用于同時檢測比如非小細(xì)胞肺中常見的MET和HER2耐藥擴(kuò)增。有研究報道,使用數(shù)字PCR技術(shù)對436例非小細(xì)胞肺樣品進(jìn)行檢測,并挑選樣本驗(yàn)證了數(shù)字PCR與RNA fish的檢測一致性。結(jié)果表明,該數(shù)字PCR技術(shù)在保證了基因擴(kuò)增檢測準(zhǔn)確性的同時,還節(jié)約了檢測時間。華南地區(qū)雙螺旋生物儀器數(shù)字PCR系統(tǒng)
廣州雙螺旋科學(xué)儀器有限公司公司是一家專門從事數(shù)字PCR,純水機(jī),病理切片機(jī),倍性分析儀產(chǎn)品的生產(chǎn)和銷售,是一家服務(wù)型企業(yè),公司成立于2015-04-17,位于廣州市黃埔區(qū)銳豐三街4號617房。多年來為國內(nèi)各行業(yè)用戶提供各種產(chǎn)品支持。臻準(zhǔn),美國艾科浦,銳訊生物,Sysmex,Eprerdia目前推出了數(shù)字PCR,純水機(jī),病理切片機(jī),倍性分析儀等多款產(chǎn)品,已經(jīng)和行業(yè)內(nèi)多家企業(yè)建立合作伙伴關(guān)系,目前產(chǎn)品已經(jīng)應(yīng)用于多個領(lǐng)域。我們堅(jiān)持技術(shù)創(chuàng)新,把握市場關(guān)鍵需求,以重心技術(shù)能力,助力精細(xì)化學(xué)品發(fā)展。廣州雙螺旋科學(xué)儀器有限公司每年將部分收入投入到數(shù)字PCR,純水機(jī),病理切片機(jī),倍性分析儀產(chǎn)品開發(fā)工作中,也為公司的技術(shù)創(chuàng)新和人材培養(yǎng)起到了很好的推動作用。公司在長期的生產(chǎn)運(yùn)營中形成了一套完善的科技激勵政策,以激勵在技術(shù)研發(fā)、產(chǎn)品改進(jìn)等。廣州雙螺旋科學(xué)儀器有限公司注重以人為本、團(tuán)隊(duì)合作的企業(yè)文化,通過保證數(shù)字PCR,純水機(jī),病理切片機(jī),倍性分析儀產(chǎn)品質(zhì)量合格,以誠信經(jīng)營、用戶至上、價格合理來服務(wù)客戶。建立一切以客戶需求為前提的工作目標(biāo),真誠歡迎新老客戶前來洽談業(yè)務(wù)。