由于現有的商業(yè)化數字PCR設備在物理上只設置了2個檢測通道,所以存在一個明顯的短板:不能同時進行多個位點的檢測。在樣品多位點的檢測中,就需要更多的起始樣品,但臨床上組織的樣品非常有限。相比之下熒光定量PCR儀上就很容易實現多重檢測。為了考察利用數字PCR實現多重檢測的可能性,英國TheInstituteofCancerResearch的研究人員以非小細胞肺相關的KRAS基因為檢測對象,在Bio-Rad的數字PCR系統(tǒng)上通過3個三重ddPCR檢測體系來實現9個KRAS突變位點的檢測。數字PCR等新興技術要在臨床應用上得到爆發(fā)式增長,有賴于LDT市場的放開。美國微滴式數字PCR性能特點
對于檢測需要高靈敏度以及技術確認的情況下,數字PCR技術也可以發(fā)揮重要作用。技術數據表明,數字PCR技術對的比較低檢測下限可到2copies/ml,比qPCR靈敏度提升了100倍。經測試,數字PCR在檢測和診斷的某些方面優(yōu)于金標準qPCR,尤其是在低病毒載量樣本中,相比起qPCR,數字PCR特異性、靈敏度、重現性和檢測限受影響更小。因此,未來預計數字PCR技術也將在類疾病中得到更加廣的應用。數字PCR的應用甚廣,除了可應用于進行突變的檢測以外,也可運用于基因擴增的檢測。通過數字PCR技術可建立多重熒光體系,用于同時檢測比如非小細胞肺中常見的MET和HER2耐藥擴增。有研究報道,使用數字PCR技術對436例非小細胞肺樣品進行檢測,并挑選樣本驗證了數字PCR與RNA fish的檢測一致性。結果表明,該數字PCR技術在保證了基因擴增檢測準確性的同時,還節(jié)約了檢測時間。醫(yī)療系統(tǒng)認證數字PCR樣品回收數字PCR的應用甚廣,除了可應用于進行突變的檢測以外,也可運用于基因擴增的檢測。
dPCR的結果統(tǒng)計方式有2種,一種是采用標記多種顏色,通過不同檢測通道分辨不同顏色和強度,再根據分散液滴的數量計算待測基因的含量;另一種采用概率統(tǒng)計的數據處理方法,即通過泊松分布的方法對結果進行分析。應用概率統(tǒng)計分析數據和對數據處理方法的模型直接關系著結果的準確性和分析時間的長短。常用的統(tǒng)計方法是假設每個微反應單元的體積相同,根據泊松統(tǒng)計計算拷貝數,公式為:M=-Vx1n(1-x/)其中M是目標總拷貝數量;V是微反應單元數量;x是發(fā)光的微反應單元數量。
數字PCR產品的發(fā)展,為不同場景下的多樣化核酸檢測需求提供了新的思路,尤其是在醫(yī)學檢驗方面,在 性疾病早期檢測、病癥的液體活檢、無創(chuàng)產前檢查等領域展現出良好的應用前景。實現 性疾病早期高效檢測——以病毒為例,有病毒檢測、和臨床樣本病毒載量評估He監(jiān)測環(huán)境病毒載量;二代熒光定量PCR檢測技術是目前病毒檢測的"金標準",但由于病毒探針結合位點突變、樣本病毒載量不足等原因,在臨床檢測過程中經常出現假陰性結果,由于數字PCR具有更高的靈敏度、精細度,以及其適合痕量樣本檢測的特性,能夠檢測出熒光定量PCR檢測過程中錯過的 ,可作為后者的補充。在人群篩查及臨床診療中,為科學選取采樣方式,需要評估不同臨床樣本病毒載量,如鼻咽拭子、血尿、糞便、肺泡灌洗液等,由于數字PCR可提供一定程度上量化指標,為采樣方法的選取提供了參考,從而提高檢出率。在外防輸入的戰(zhàn)略要求下,環(huán)境病毒檢測工作尤為重要,數字PCR可對低核酸豐度樣本進行有效檢測,包括從不同環(huán)境中取樣的樣本,如病房、醫(yī)院衛(wèi)生間、實驗室等等,在病情防控中起到了不可忽視的作用。此外,數字PCR的應用場景還有病程不同階段的病毒載量評估、核酸參考品制備、抗病毒藥物研發(fā)等環(huán)節(jié)。dPCR可直接溯源SI國際單位制摩爾,適合單一、雙重及多重轉基因標準物質研究,一次可識別不同的轉基因區(qū)域。
數字PCR技術是繼一代普通PCR、二代熒光定量PCR之后的第三代PCR技術。該技術將一個樣本分成幾到幾十萬份,分配到不同的反應單元,每個單元包含一個或多個拷貝的目標分子(DNA模板),在每個反應單元中分別對目標分子進行PCR擴增;擴增結束后,將有熒光信號的微滴判讀為1,沒有熒光信號的微滴判讀為0,終根據泊松分布原理以及陽性微滴的比例,計算出待檢靶分子的濃度或拷貝數。定量:不再依賴于Ct值和標準曲線,直接給出靶序列的起始濃度,實現真正意義上的定量。更高靈敏度與特異性:數字PCR可實現萬分之一稀有樣本的定量,可用于極微量核酸樣本檢測、復雜背景下的稀有突變檢測、表達量微小差異鑒定、單細胞基因表達等方面。數字PCR在分子診斷領域將會發(fā)揮巨大的作用,數字PCR適用于生物標志物研究、拷貝數變異分析、微生物檢測、轉基因生物檢測、mRNA和miRNA檢測、基因相對表達研究等,并對遺傳病、、產前診斷的研究提供了一種全新的技術思路與手段,具有廣的、不可替代的應用前景。dPCR在轉基因檢測方面的應用仍處于研究和探索的階段。廣東雙螺旋生物儀器數字PCR
Drop-off數字PCR檢測方法的**主要優(yōu)勢是能夠能夠在一個反應中檢測到基因組序列范圍短的同源基因突變。美國微滴式數字PCR性能特點
全自動樣本制備系統(tǒng)DMX-1000配備氣流發(fā)生裝置和氣壓控制裝置,能夠實現高精度壓力控制,結合**產品液滴生成芯片和微流控乳液滴生成技術,DMX-1000可以在70秒內快速、穩(wěn)定、高效地生成大小均一的微乳液滴。微滴數量可達2萬-60萬個,粒徑范圍30-120μm,性能穩(wěn)定。除此之外,銳訊還提供微流控芯片的定制服務,以滿足不同的液滴數目和尺寸要求。平板式快速擴增儀TC-1000,不再使用傳統(tǒng)的96孔板,而是特制的液滴擴增芯片;不再是傳統(tǒng)的“燒開水”加熱模式,代之以平板式單液滴層均勻受熱的方式。在這樣的改進之下,TC-1000完成40個PCR循環(huán)只需約45分鐘(TC-2.0升級版更是把時間縮短到了25分鐘?。?,大幅縮短了等待時間,提升了實驗進度。這對實驗人員而言,無疑是莫大的福利——高效完成工作,不加班——愛工作,也愛生活。美國微滴式數字PCR性能特點
廣州雙螺旋科學儀器有限公司一直專注于儀器儀表批發(fā);商品批發(fā)貿易(許可審批類商品除外);商品零售貿易(許可審批類商品除外);教學設備的研究開發(fā);辦公設備耗材批發(fā);生物技術開發(fā)服務;生物技術推廣服務;計算機批發(fā);生物技術轉讓服務;農業(yè)科學研究和試驗發(fā)展;醫(yī)學研究和試驗發(fā)展;自然科學研究和試驗發(fā)展;水處理設備的研究、開發(fā);食品科學技術研究服務;環(huán)保設備批發(fā);辦公設備批發(fā);,是一家精細化學品的企業(yè),擁有自己**的技術體系。公司目前擁有較多的高技術人才,以不斷增強企業(yè)重點競爭力,加快企業(yè)技術創(chuàng)新,實現穩(wěn)健生產經營。公司業(yè)務范圍主要包括:數字PCR,純水機,病理切片機,倍性分析儀等。公司奉行顧客至上、質量為本的經營宗旨,深受客戶好評。公司力求給客戶提供全數良好服務,我們相信誠實正直、開拓進取地為公司發(fā)展做正確的事情,將為公司和個人帶來共同的利益和進步。經過幾年的發(fā)展,已成為數字PCR,純水機,病理切片機,倍性分析儀行業(yè)出名企業(yè)。